제 3위 소화액 채취기법은 기존 반추위 영양생리 대사 패턴 측정방법인 in vivo, in vitro 및 in situ 방법의 단점을 극복하고 정확한 반추위 생리대사 패턴의 측정을 할 수 있는 기회를 가진다. 이 제 3위 소화액 채취기법을 이용한 측정방법은 기존의 post-ruminal sampling 기법과 비교해서 다음과 같은 장점들이 존재한다. 1) 단지 반추위캐뉼라가 설치된 동물만이 필요하며, 2) 제 3위 소화액에는 비교적 적은 내인성 질소가 존재하며, 3) 제 3위 소화액은 제 4위에서 시작되는 소화효소에 의한 소화를 피할 수 있는 점 등이다. 제 3위 소화액 내 반추위 미분해 용해성 질소화합물(SNAN)의 측정은 in situ 방법의 전제조건인 반추위에서 rapidly degradable N은 무한정 분해되며 따라서 비용해성 사료 N 만이 반추위를 벗어난다는 것이 오류임을 보여준다. 제 3위 소화액 내 SNAN 중 유리아미노산 및 용해성 단백질과 비교해서 양적으로 가장 많은 peptide는 반추위 단백질대사에서 peptide에서 아미노산으로의 분해과정이 분해율 제한요인이 될 수 있음을 시사한다.
혼탁한 물질인 생체조직에서 신진대사, 혈액확산, 혈중산소의 비침습적 측정에 관한 연구를 광을 이용한 방법으로 제시하였다. 생체조직내의 산소포화도와 혈액분량을 측정하기 위하여 660nm와 880nm 의 광파장을 이용하여 측정하였으며, 생체조직에서 얻은 광 세기의 데이터는 조직내의 깊은 곳에서 생리적인 변화를 나타낸다. 데이터의 평가는 혈액분량과 산소포화도의 변화에 대한 지수의 기울기로서 조사하여 평가하였다. 여기서 곡선으로 나타낸 지수는 각각의 파장에서 기준파장의 세기와 측정부위에서의 반사광의 세기를 비율에 의한 자연대수로 나타냈다. 장단지 근육에 대한 실험 결과에 따르면 산소의 지수는 운동중에 현저하게 변화를 보여 주었다.
본 연구에서는 인공 관절치환술 시 삽입되는 라이너의 잔존 두께 측정과 비구컵과의 결합 상태를 판별 할 수 있는 생체 삽입형 보철물 두께 측정 시스템 개발을 위한 생체 삽입형 초음파 변환자의 개발, 잔존 두께측정 알고리즘 및 최적화된 초음파 운용 방법에 대한 연구를 진행했다. 세부적으로, 비슷한 민감도와 대역폭을 갖는 8MHz 와 20MHz의 중심주파수를 갖는 초음파 변환자를 제작하여 상용 폴리에틸렌 재질의 인공 고관절 라이너의 다양한 두께를 측정함으로써 신호대잡음비와 축방향 해상도 비교 분석을 진행하여 체내 초음파 운용 방식 최적화 연구를 진행하였다.
Rhodopseudomonas sp. KCTC 1437은 N $H_4^+$나 빛에 무관하게 수소를 발생할 수 있다. 이 사실로부터 이 균주는 nitrogenase뿐만 아니라 hydrogenase 에 의해서도 수소를 생성할 수 있다는 것을 확인했다. 이 두 효소의 수소생성 능력을 in vivo에서 측정할 수 있는 조건을 확립한 뒤 여러 가지 조건에 대해 발생한 수소양을 측정하였다. Hydrogenase 는 nitrogenase의 수소생성을 저해하는 $O_2$나 $N_2$, $C_2$$H_2$ 등에 대해서도 그 활성의 감소가 없거나 작았으며, $H_2$에 의해서는 오히려 수소생성능이 증대되었단. 또 이 균주는 hydrogenase에 의해 수소를 밭아들여 $CO_2$를 광환원시킬 수도 있음도 알았다. 이상의 결과, hydrogenase가 혐기적이면서 빛이 있는 조건에서만 수소를 생성하는 nitrogenase보다 더 광범위하고 유리한 조건에서 수소를 생성할 수 있음을 확인하였다. 이러한 사실은 이 균주로 대량의 수소생산을 할 때 유리하게 이용될 수 있을 것이다.
In vivo ethane production in rats was used as an index of oxygen toxicity. The rats were allocated to four exposure conditions; hyperbaric oxygenation (HBO=5 ATA, 100% $O_2$), normobaric oxygenation (NBO=1 ATA,100% $O_2$), hyperbaric aeration (HBA=5 ATA, 21% $O_2$) and normobaric aeration (NBA=1 ATA, 21% $O_2$). After 120 minutes of exposure, the rats exposed to high concentration and/or high pressure oxygen exhaled significantly larger amounts of ethane than those exposed to NBA, and the differences in ethane production between any two groups were statistically significant (p<.01). This finding supports the hypothesis that hyperoxia increases oxygen free-radicals and the radicals produce ethane as a result of lipid peroxidation. It is notable that the ethane exhalation level of the HBA group was significantly higher than that of the NBO group. This difference could not be accounted for by the alveolar oxygen partial presure difference between the two groups.
대두 발효 식품의 항산화 활서을 알아보기 위하여 in vitro와 in vivo에서 과산화 지질의 생성 억제와 항산화 관련 효소인 superoxide dismutae(SOD), catalase및 glu-tathion perosidase 활성을 증강시키는 실험을 실시하였다. In vitro 실험에서 항산화 활성을 실험한 결과 대두 발효식품은 POV와 관산화 지질의 생성을 유의성있게 억제시켰으며, quercetin과 catechin와 비교와 결과 SOD 활성은 상당히 높았다. 그리고 대두 발효 식품은 SD계 수컷 쥐에 2주간 사료에 첨가하여 먹인 후 항산화 활성을 측정한결과, 대두 발효식품을 쥐에 투여하여 사염화 탄소($CCl_4$)로 손상을 유도시킨 뒤 쥐의 간 microsome의 지질 과산화를 유의성 있게 억제 시켰다. 항산화 관련 효소인 SOD, catalase 및 glu-tathion perosidase 활성은 유의성 있게 증가하였고, 지질 과산화도 억제시켰다. 따라서 대두 발효 식품은 산화 스트레스로 생성되는 활성 산소의 소거에 효과적임을 알 수 있다.
목적 : 정천탕(定喘湯, JCT)이 IgE/mast cell로 유포되는 천식(喘息)등의 알러지성 질환에 대한 효과를 실험적으로 검증하고자 하였다. 방법 : IgE의 혈중농도와(in vivo) 분비 량을 측정하였으며(in vitro), 알러지 관련 유전자의 발현을 RT-PCR로 검색하였고, JCT의 수용성 복합 추출물이 compound 48/80로 유발되는 mast cell line(IC-2)의 histamine의 방출에 미치는 직접적인 영향을 측정하였다(in vitro). 결과 : 정천탕은 ovalbumin으로 유발시킨 마우스의 혈중 IgE량과 IL-4와 CD-40로 유도시킨 spleen B 임파구의 IgE 생성량도 현저하게 감소시켰다. 또한 INF-r의 발현은 증가시킨 반면, IL-4와 IL-6의 발현과 mast cell의 histamine 방출은 억제하는 것으로 나타났다. 결론 : 정천탕의 항알러지 효과를 실험적으로 확인 할 수 있었으며 임상적으로는 천식등 알러지성 질환에 사용 할 수 있을 것으로 사료된다.
조직배양(組織培養)을 이용(利用)한 마우스복강거식세포내 인나균증식실험(人癩菌增殖實驗)으로서 trypsin-정제인나균(精製人癩菌)을 사용하여 1) 인나균(人癩菌)의 마우스복강내접종(腹腔內接種)에 의(依)하여 야기(惹起)되는 복강거식세포내의 생체내(生體內) 인나균감염(人癩菌感染)에 대(對)한 동역학적양상(動力學的樣相), 2) in vivo infection-in vitro cultivation에 의(依)한 인나균(人癩菌)의 복강거식세포내 증식태도(增殖態度) 그리고 3) 인나균(人癩菌)의 복강내접종(腹腔內接種)으로 인(因)한 마우스비장조직(脾臟組織)의 병리학적변화(病理學的變化)를 구명(究明)코저 본연구(本硏究)를 실시(實施)하였으며 아래의 결론(結論)을 얻었다. 1. 인나균(人癩菌)의 마우스복강내접종후(腹腔內接種後) 복강거식세포배양실시까지의 기간(其間)이 연장(延長)됨에 따라 배양(培養)된 복강거식세포에 있어서 세포질내(細胞質內)에 식균된 항산균수(抗酸菌數)와 항산균(抗酸菌)을 식균한 거식세포수(細胞數)가 각각 계속적(繼續的)으로 현저(顯著)하게 감소(減小)되어감이 관찰(觀察)되었다. 2. 인나균(人癩菌)의 복강내접종후(腹腔內接種後) 5개월(個月)에 이르기까지 생체내(生體內)에 존재(存在)하는 마우스복강거식세포에 있어서의 인나균증식(人癩菌增殖)을 관찰(觀察)할 수 없었다. 3. 인나균(人癩菌)의 복강내접종후(腹腔內接種後) 24시간(時間) 및 1주(週)만에 실시(實施)된 복강거식세포배양을 2 내지(乃至) 3개월간(個月間) 그 배양상태(培養狀態)를 유지(維持)하였던바 배양(培養)된 거식세포(細胞)의 염색표본(染色標本)에서 거식세포내(細胞內) 항산균수(抗酸菌數)의 뚜렷한 증가양상(增加樣狀)을 관찰(觀察)할수 있었다. 4. in vivo infection-in vitro cultivation 수기(手技)로서 배양(培養)된 복강거식세포를 사용(使用)한 총항산균수측정실험(總抗酸菌數測定實驗)에서 조직배양개시(組織培養開始) 9 및 11주(週)에 이르러 배양(培養)된 거식세포내(細胞內) 항산균수증가(抗酸菌數增加)에 대한 양적증거(量的證據)를 얻을수 있었다. 5. 인나균(人癩菌)의 복강내접종(腹腔內接種)으로 야기되는 마우스비장조직(脾臟組織)의 병리학적소견(病理學的所見)은 주로 적수부위(赤髓部位)에 나타난 변성변화(變性變化)이었으며, 균접종후(菌接種後) 5개월(個月)에 이르기까지 마우스비장내(脾臟內)에 있어서의 인나균(人癩菌)의 증식양상(增殖樣狀)을 관찰(觀察)할 수 없었다.
1차년도에서 이미 확립한 다양한리포좀의 제조 방법에 따라간세포를표 적하기 위해 이들 리포좀의 조성에 galactocercbroside를 함유시켜 targeted liposomes을 제조하였다. 표적리포좀의 제조 방법에 따른 봉합율 (cncapsulation)과 안정성을 조사했을 때, freezing-thawing 과정을 거친 리포좀이 encapsulation 과 stability가 가장 뛰어남을 알 수 있었다. In vitro 간세포 표적능력을 in vitro cell culture system에서 간세포 cell line (Hep G2, 2.2.15과 다른 cell line (Vero E6, J82)에 대한 표적리포좀과 control liposomes의 uptake를 FTTC 또는 CF 형광으로 측정했을 때, 표적리포좀이 간세포 cell line에 더 많이 uptake하는 것을 알았다. In vivo 실험에서는 6 - 8 주령의 mouse tail vain에 표적리포좀과 control liposomes을 주사하여 각 장기에 존재하는 리포좀의 양을 형광으로 측정했을 때, 표적리포좀 (targetcd liposomes)이 다른 장기에 비해 liver에 선택적으로 많이 분포함을 알수있었다. 또한 간암의 효과적인 치료를 위해 간세포와 암세포를 동시에 표적할 수는 double targeting liposomes을 design 하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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