우리나라 포도원에서 가장 많이 발생하여 피해를 주고 있는 grapevine leafroll-associated 3 Closterovirus (GLRaV-3)를 대상으로 기내 배양묘를 이용한 바이러스 순화 및 진단효율성을 검토하였다. 바이러스 감염주의 절간을 기내배양하여 증식시킨 기내 배양묘를 1개월 간격으로 계대배양하면서 배양묘를 ELISA 검정한 결과 고농도의 바이러스가 검출되었으며 배양묘의 부위별로 잎, 줄기 및 줄기 유래의 callus 조직에서 모두 고농도로 검출되었다. 또한 포장에서 재배되고 있는 포도나무의 잎이나 엽병조직에 비해 기내 배양묘의 조직을 사용하였을 때 높은 농도의 정제 바이러스를 얻을 수 있었으며, 전자현미경에 의한 dip 검경에서도 사상형 바이러스 입자가 관찰되었다. RT-PCR 진단에서는 기내 배양묘 조직을 사용하였을 때 포도 유엽조직과 엽병+중륵조직에 비해 검출효율이 높았다. 기내 배양묘의 잎조직을 이용하여 ELISA와 RT-PCR 검정감도를 비교한 결과 ELISA에 비해 RT-PCR 검정이 약 1,000배 감도가 높았다.
본 연구는 배지에 첨가된 목초액 및 코코넛액이 석곡 유묘의 증식 및 기내 개화에 미치는 영향을 조사하기 위하여 실시되었다. 목초액이 석곡 유묘의 증식에 미치는 영향은 NAA 0.1 mg/L와 kinetin 1.0 mg/L 가 첨가된 $H_{3} P_{4}$ 배지에 목초액 1.0 ml/L를 처리했을 때 유묘의 증식 및 생장이 양호 하였다. 코코넛액은 30 ml/L가 첨가되었을 때 유묘의 증식 및 생장이 가장 양호하였다. 기내 개화 역시 NAA 0.1 mg/L 와 kinetin 1.0 mg/L 가 첨가된 $H_{3} P_{4}$ 배지에 목초액 1.0 ml/L 또는 코코넛액 30 ml/L가 첨가되었을 때 전체 개체의 $ 20\% $에서 기내개화가 일어났다
The factors influencing somatic embryo maturation, high frequency somatic embryo germination, and plantlet formation were studied in Terminalia chebula Retz. Maturation of somatic embryo were influenced by a number of factors such as in vitro culture passage, concentrations of sucrose, levels of abscisic acid (ABA), basal media and media additive combinations. Maximum frequency of somatic embryo maturation ($57.22{\pm}2.02$), was obtained on MS medium supplemented with 50 g/l sucrose. Different factors such as strengths of MS nutrients, plant growth regulators, media additives and their combinations controlling somatic embryo germination and plantlet formation were studied. High frequency of germination and plantlet formation ($58.80{\pm}1.47$) were achieved by subsequent subculture of mature somatic embryos on MS medium containing 30 g/l sucrose and 0.5 mg/l benzyl-adenine (BA). However, although duration of in vitro passage of the callus tissue was critical, contribution of the combinations of plant growth regulators and media additives showed nugatory effect on somatic embryo maturation and germination as evident from variable responses.
울금의 기내대량번식을 위한 경정배양에 알맞은 기본배지의 종류와 기내증식 및 생장에 미치는 식물생장조절제의 농도를 구명하고자 본 실험을 수행한 결과는 다음과 같다. 울금의 경정은 MS(Murashige and Skoog)기본배지에 치상한 경우 Wanspojen, LS, White 배지보다 shoot와 root의 형성율이 높은 경향이었다. 기내의 유식물체 생장은 오옥신(NAA 0.5-l.0 $\textrm{mg}/\textrm{l}$)과 사이토키닌(BA 1.0-5.0 $\textrm{mg}/\textrm{l}$) 혼용처리가 효과적이었다.
Huh, Yoon Sun;Lee, Joung Kwan;Kim, Ik Jei;Kang, Bo Goo;Lee, Ki Yeol
Journal of Plant Biotechnology
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제42권2호
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pp.111-116
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2015
Interest and great demand for blueberry (Vaccinium corymbosum) have increased, as V. corymbosum is now one of the most economically important crops in Korea. It is expected that blueberry production and the area planted for cultivation will increase consistently in the years ahead because of high profitability and the consumer's demand for healthy ingredients. Effective mass production of blueberry is urgently needed for commercial cultivation establishment, but a main limitation is lack of a propagation system that produces a disease-free plant material for commercial plantation. A large amount of research has focused entirely on developing tissue culture techniques for blueberry propagation. However, controlling fungal and bacterial contamination of woody plant material is extremely difficult. Our study was conducted to investigate the effect of biocide addition during the in vitro culture of blueberry on plantlet growth and contamination occurrence. Four biocides, including Plant Preservative Mixture ($PPM^{TM}$), vancomycin, nystatin and penicillin G, were used in varying concentrations during the in vitro propagation of blueberry. When nystatin was added into the medium at low concentrations, the overall growth of blueberry plantlets was retarded. Addition of vancomycin and penicillin G in high concentrations decreased contamination but induced plantlet mortality. On the other hand, when 1ml/L $PPM^{TM}$ was added, the growth characteristics of blueberry plantlets did not significantly differ from non-treatment (control), and the contamination occurrence rate was very low. From these results, we found that the addition of the appropriate biocide could provide an effective method to reduce contamination in the culture process, thereby raising in vitro production efficiency.
네오레게리아(Neoregeria carorinae 'Tricolor')의 기내배양시 무늬소실을 줄일 수 있는 재료의 채취시기와 발근을 위하여 기내에서 처리된 오옥신이 온실에 이식된 식물체의 생육 및 개화에 미치는 영향에 관하여 실험한 결과, 화아분화 4주후(III단계)에 미숙화기를 배양한 것이 분화된 식물체 중 정상 식물체가 67%로 가장 많았고, 화아분화 직후 및 화아분화 5주후에 배양한 것은 모두 반입이 소실되었다. 미숙화기와 액아를 배양하여 나온 식물체중 정상식물체 획득율은 미숙화기 배양에서는 67%, 액아배양에서는 56.2%였다. 미숙화기를 배양하여 얻은 식물체가 액아를 배양하여 얻은 식물체보다 온실재배에서 생육이 월등이 좋았고, 개화율도 미숙화기를 배양하여 얻은 식물체는 27.8%이었으나 액아를 배양하여 얻은 식물체는 전혀 개화하지 않았다. IBA 0.5 mg/L가 첨가된 배지에서 발근시킨 식물체의 기외생육이 왕성하였으며, 기내에서 처리한 오옥신 종류와 농도는 온실에서 재배되고 있는 식물체의 변이에 영향을 미치지는 않았다.
In this study, we established an in vitro regeneration system to maximize the recovery of leafy perilla (Perilla frutescens L. Britton) plantlets as part of developing a molecular biotechnology-based metabolic engineering program for this crop plant. Hypocotyl segments including the apical buds were used as explants for the direct production of shoots without an interim callus phase. The number of shoots produced from the apical buds peaked within 3-4 weeks, and the shoots were subsequently cultured on Murashige and Skoog (MS) media supplemented with 2 mg $1^{-1}$ benzylaminopurine (BA). Spontaneous rhizogenesis was observed after 7-10 days of culture on MS media without hormonal additives. The rooted shoots developed into normal plants in soil after hardening on distilled water for 3-4 days. The average plantlet regeneration frequency was higher for the apical buds (64.33%) than for the top (15.66%), middle (4%), and basal (1.33%) segments of the hypocotyls. This regeneration system demonstrates a capacity for high-frequency plantlet recovery and thus should be considered for use in the genetic manipulation of leafy perilla.
Park, Dong-Jin;Kang, Young-Min;Jung, Ha-Na;Min, Ji-Yun;Kim, Yong-Duck;Karigar, Chandrakant S.;Choi, Myung-Suk
한국산림과학회지
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제95권2호
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pp.155-159
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2006
An efficient method for in vitro propagation of the medicinal plant Hovenia duleis, was established. Plantlets for micropropagation of H. dulcis were obtained from in vitro germinated seeds. The effectiveness of various levels of cytokinins (BAP, Kinetin and TDZ) on multiple shoot formation from stem nodes was tested. BAP (1.0 mg/L) treatment induced highest number of multiple shoots. The growth pattern of plantlet on various culture media was undertaken. The shoot elongation was optimal on 2MS basal medium without growth regulators. The in vitro rooting ability of H. dulcis shoots was examined with two-auxins IAA and IBA. The IAA (1.0 mg/L) treatments induced earliest rooting with maximum number of roots and root growth. Rooted shoots were transferred directly to small pots with artificial soil and such established plant exhibited a normal growth pattern similar to wild plantlet.
We have investigated that a couple of soft ferrite ceramic powders having a spinal structure have shown the effect on growth and secondary metabolites production of some medicinal plants cultured in vitro. The addition of the ceramic powders as bare state to culture medium has stimulated the growth of Achyranthes japonica callus and plantlet, adventitious root of Hyoscyamus niger and Platycodon grandiflorum hairy root about 65, 75, 150 and 50%, respectively. Whereas Centella asiatica callus and plantlet, Scopolia parviflora hairy root, and Hyoscyamus albus adventitious root were not affected markedly. Moreover, the ceramic powder has enhanced the growth of H. niger adventitious roots even under conditions of irradiating alone without any direct contact between ceramic powder and media. Based on growth stimulation effect, the ceramic powders have enhanced the gross production of tropane alkaloid in H. niger adventitious root, and polyacetylene in P. grandiflorum hairy root about 35 and 30%, respectively.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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