Hovenia dulcis Thunb fruits were successively extracted with hot water, water, methanol, ethyl acetate, and chloroform. The crude extracts were investigated for potential antioxidant by measuring scavenging against DPPH free radicals, reducing power, superoxide radicals, and protection of protein damage and cultured cells from a lethal dose of hydrogen peroxide ($H_2O_2$). In all chemical assays used, the hot water extract of H. dulcis fruits, which contained $61.14{\pm}2.57$ (Tannic acid mg/g extract, n=3) of total phenolic compounds contents exhibited highest activity in in vitro models of DPPH free radical scavenging activity, reducing power assay, superoxide radical scavenging activity and protection of protein damage. In addition, the hot water extract protected cultured RAW 264.7 macrophages from a lethal dose of $H_2O_2$ and reduced reactive oxygen species level in RAW 264.7 cells.
Previously , the methanolic extract of peach sees was found to have a strong tyrosinase inhibitory activity in an in vitro assay. Several phenolic compunds were isolated from the seeds by solvent fractionation , Sephadex LH-20 chromatography, and preparative HPLC , and one of them showing strong tyrosinase inhibition was identified as benzoic acid by UV, IR, $^1$H/$^1$$^3$C-NMR, and EI-MS spectrsopy. Benzoic acid (IC50= 250$\mu\textrm{g}$/ml) and L-ascorbic acid (IC50=28$\mu\textrm{g}$/ml), well-known tyrosinase inhibitors. In particular , benzoic acid inhibited markedly the enzymatic browing (melanosis) of apple juices at low concentration of 0.01% and 0.05, comparable to that of L-ascorbic acid (P<0.05). these results suggest that benzoic acid, one of an effective food preservatives, may be potentially useful as a functional alternative to sulfites for the control of melanosis in fruit juices.
Radical scavenging activity of water and methanol extracts of mulberry juice and cake prepared from mulberry fruit (Morus spp.) was evaluated using three in vitro assay systems. Mulberry fruits were homogenized with $0.5\%$ trifluoroacetic acid (TFA) in distilled water, filtered with cheeze-cloth and centrifuged to yield mulberry juice and cake. Mulberry juice was evaporated and solubilized in $0.5\%$ TFA in distilled water or $0.5\%$ TFA in $80\%$ aqueous methanol, followed by filtration and evaporation to obtain water (WMJ) and methanol (MMJ) extracts of mulberry juice. Mulberrry cake also was extracted with the above same solvents, and thereby finally obtaining water (WMC) and methanol (MMC) extracts of mulberry cake. Among four extracts, the MMC showed the most potent radical scavenging activity against DPPH radical $(IC_{50}=167.45\;{\mu}g/mL)$, and superoxide $(IC_{50}=36.18\;{\mu}g/mL)$ and hydroxyl radicals $(IC_{50}=467.08\;{\mu}g/mL)$. The WMC also exhibited stronger radical scavenging activity than those of two other mulberry juice extract, WMJ and MMJ. Meanwhile, the MMJ exerted stronger three radical scavenging activity than the WMJ. Total phenolic content of the water and MeOH extracts from mulberry cake was higher than that of the water and MeOH extracts from mulberry juice. Thus, these results suggest that the extracts of mulberry cake with high dietary phenolics may be useful potential source of natural antioxidant as radical scavenger.
본 실험에서는 꽈리를 열매, 꽃받침, 잎, 줄기, 뿌리 등 부위별로 구분하여 메탄올로 추출하고 추출 수율, 총페놀 함량, 총플라보노이드 함량, DPPH radical 소거능, 아질산염 소거능, superoxide anion radical 소거능, 환원력, 철 이온에 대한 킬레이트 효과 등을 측정하였다. 추출 수율은 열매가 가장 높았고 그 다음으로 꽃받침, 잎, 줄기, 뿌리 순이었다. 총페놀 및 총플라보노이드 함량은 잎 추출물이 가장 높았고 그 다음으로 꽃받침 추출물이었다. DPPH radical 소거능은 1 mg/mL 및 5 mg/mL의 농도에서 잎 추출물이 가장 높았고 꽃받침 추출물도 높은 활성을 나타내었다. 아질산염 소거능은 모든 부위에서 농도에 따라 유의적인 차이 없이 높게 나타났다. 꽈리 추출물의 superoxide anion radical 소거능은 꽃받침과 잎 추출물이 높은 활성을 나타내었다. 환원력은 잎 추출물에서 가장 높게 나타났고 철 이온에 대한 킬레이트 효과는 꽃받침, 줄기 및 뿌리 추출물이 높은 활성을 나타내었다. 이상의 결과를 종합하여 보면 꽈리의 잎 추출물에서 총 페놀 함량, 총플라보노이드 함량과 항산화 활성이 탁월하게 높게 나타났고 그 다음으로 꽃받침 추출물이 우수한 항산화 활성을 나타내어 향후 이를 이용한 천연 항산화제로 개발 가능성이 시사되었다.
The fruit body of Forsythiae Fructus (Oleaceae), a common Korean medical herb, is widely used in the treatment of cold and inflammation. In order to elucidate the action mechanism and the active principles from the plant against anti-influenza virus, the influenza virus hemagglutinin (HA) and neuraminidase (NA) gene RT-PCR and Viral Screening & Identification (VSI) assay were conducted, and the activity against viral replication was also investigated. Consequently, one active constituent, namely pinoresinol showed the in vitro antiviral principle using a cytopathic effect (CPE) reduction method, indicating pinoresinol possessed anti-influenza viral activity. Furthermore, combination of pinoresinol and Tamiflu exhibited higher activities than Tamiflu alone against influenza virus (H3N2) infection. The results suggested that combination of pinoresinol with Tamiflu could be a better candidate for an ant-H3N2 viral agent in the treatment of the influenza.
In urban areas, diesel exhaust particles (DEP) are probably a major component of particulate matters, especially in Korea where drive many diesel vehicles. The aim of this study was to investigate genotoxic effects of DEP using single ceil gel electrophoresis. In order to evaluate the mechanisms of DEP genotoxicity, the rat microsome mediated and DNA repair enzyme treated comet assays together with conventional comet assay were performed. Total diesel particles (DEPT) was collected without site fractionation from diesel engine bus and dichloromethane extract was obtained. The organic extract of DEPT revealed DNA damage itself in NIH/3T3 cells. The level of DNA breaks plus oxidative DNA lesions and microsome mediated DNA damage was assessed by modified single cell gel eletrophoresis. DEPT was able to induce oxidative DNA damage as well as microsome mediated DNA damage. Vitamin C as an model antioxidant reduced DNA damage in endonuclase III treated comet assay. One of flavonoid, galangin as a CYP1A1 inhibitor. reduced DNA damage in the presence of S-9 mixture. $DEP_T$ is the sources of oxidative stress, but antioxidants can significantly reduce oxidative DNA dmage. And $DEP_T$ may contain indirect mutagens which can be inhibited by CYP1A1 inhibitors. The ethanol extracts of the mixed vegetables (BV) or the mixed fruits (BF) were evaluated for their in vitro antigenotoxic effects. BV and BF showed potent Inhibitory effects against DEPT induced DNA damage with oxidative DNA lesions and in the prescence of S-9 mixture. These results indicate that BV and BF could prevent cellular DNA damage by inhibiting oxidative stress and suppressing cytochrome P4501A1 in cell culture.
Background: Rosa Roxburghii Tratt is a promising wild fruit crop in Southwest China. Its extracts have been used as traditional Chinese medicine, which benefit immune responses and cure various health disorders. However, whether Rosa Roxburghii Tratt polysaccharides could inhibit metastasis and invasion of ovarian cancer cells remains unknown. Materials and Methods: Effects of crude polysaccharides from Rosa Roxburghii Tratt on the viability of ovarian cancer A2780 cells were detected by MTT assay. Ovarian carcinoma cell migration and invasion after exposure to Rosa Roxburghii Tratt polysaccharides were quantified by wound healing and Transwell assays, respectively. Western blotting was applied to assess protein levels of MMP-9. Results: The results indicated that Rosa Roxburghii Tratt polysaccharides significantly reduced wound closure rate of A2780 cells, inhibited their migration and invasion, and suppressed the expression of MMP-9. Conclusions: Our findings indicated that Rosa Roxburghii Tratt polysaccharides have potential for develop as anti-metastatic cancer drug preparations for ovarian cancer patients.
산수유는 다양한 생리적 기능을 가지는 것으로 보고되어 있으며 또한 최근에 관심의 증가로 산수유로부터 유효성분의 추출 방법 개발은 산업적으로 매우 중요하며, 유효성분의 존재 여부를 분석하는 것은 산업적 상품의 진위와 품질을 판정하는데 중요한 수단이 된다. 본 연구는 loganin을 지표 물질로 하여 산수유로부터 유효성분을 추출하는 여러 방법을 비교 분석하였으며, 각 방법에 따라 추출한 시료의 기능성의 차이를 항산화 작용으로 분석하였다. 산수유로부터 항산화 성분을 추출하기 위하여 네 가지 방법을 적용하였다. 추출된 유효성분 지표물질로 loganin의 함량을 HPLC로 분석하였을 때 열수를 사용한 추출 방법이 알코올 추출 또는 효소 처리 방법 보다 효율적인 결과를 보여 주었다. 각 추출 시료의 항산화 기능은 DPPH radical 소거능, hydrogen peroxide scavenging assay, reducing power 측정으로 분석하였다. 추출 방법에 따라 항산화 기능이 차이가 있었으며, 열수 추출 시료가 DPPH radical 소거능과 hydrogen peroxide scavenging 효과가 우수하였고, 효소 처리 추출 시료는 reducing power가 우수하게 나타났다. 추출 방법에 따라 시료에 함유된 성분의 차이가 항산화 기능이 차이와 연관이 있다고 생각된다. 이 연구에서 얻은 결과는 산수유는 대조군으로 사용한 vitamin C에 준하는 항산화 성분을 함유하고 있으며, 이들 성분은 열수 추출 방법으로 효율적으로 추출되었으며, 열수 추출 방법은 산업적으로 응용될 수 있음을 제시하고 있다.
Hwang, Eunmi;Kim, Gye Won;Song, Ki Duk;Lee, Hak-Kyo;Kim, Sung-Jo
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제32권11호
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pp.1776-1788
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2019
Objective: The demands for measures to improve disease resistance and productivity of livestock are increasing, as most countries prohibit the addition of antibiotics to feed. This study therefore aimed to uncover functional feed additives to help enhance livestock immunity and disease resistance, using Acanthopanax sessiliflorus fruit extract (ASF). Methods: ASF was extracted with 70% EtOH, and total polyphenolic and catechin contents were measured by the Folin-Ciocalteu and vanillin assay, respectively. The 3D4/31 porcine macrophage cells ($M{\Phi}$) were activated by phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA), and cell survival and growth rate were measured with or without ASF treatment. Flow-cytometric analysis determined the lysosomal activity, reactive oxygen species levels (ROS), and cell cycle distribution. Nuclear factor kappa B ($NF-{\kappa}B$) and superoxide dismutase (SOD) protein expression levels were quantified by western blotting and densitometry analysis. Quantitative polymerase chain reaction was applied to measure the lipid metabolism-related genes expression level. Lastly, the antibacterial activity of 3D4/31 $M{\Phi}$ cells was evaluated by the colony forming unit assay. Results: ASF upregulated the cell viability and growth rate of 3D4/31 $M{\Phi}$, with or without PMA activation. Moreover, lysosomal activity and intracellular ROS levels were increased after ASF exposure. In addition, the antioxidant enzyme SOD2 expression levels were proportionately increased with ROS levels. Both ASF and PMA treatment resulted in upregulation of $NF-{\kappa}B$ protein, tumor necrosis factor $(TNF){\alpha}$ mRNA expression levels, lipid synthesis, and fatty acid oxidation metabolism. Interestingly, co-treatment of ASF with PMA resulted in recovery of $NF-{\kappa}B$, $TNF{\alpha}$, and lipid metabolism levels. Finally, ASF pretreatment enhanced the in vitro bactericidal activity of 3D4/31 $M{\Phi}$ against Escherichia coli. Conclusion: This study provides a novel insight into the regulation of $NF-{\kappa}B$ activity and lipid metabolism in $M{\Phi}$, and we anticipate that ASF has the potential to be effective as a feed additive to enhance livestock immunity.
본 연구에서는 수박에서 과실썩음병을 유발하는 Acidovorax citrulli를 억제하는 세균을 선발하고, 선발한 세균이 성장촉진 및 길항 효소를 생성하는지 확인하였다. 전국 26개 지역의 94곳의 수박재배지와 25곳의 대형 원예 육묘장에서 수박 식물체(잎, 꽃, 뿌리) 및 토양을 수집하였다. 수집한 sample에서 tryptic soy agar와 yeast extract peptone dextrose 배지에서 각각 1,953종과 841종 총 2,794종의 미생물을 분리하였으며, 2,794종의 미생물 중 2종의 A. citrulli를 선발하였다. 선발한 A. citrulli에 대한 기내 길항성 검정 결과 3-3B에서 24종, 9-4B에서 14종 총 28종의 길항 세균을 선발하였다. 선발한 길항 세균 중 BNPL-6-3B, HYGPL-1-3B, TIPL-6-1B, YGMP-2-7Y는 2종의 bacterial fruit blotch균 모두에서 강한 길항성을 보였다. 선발한 28종의 길항 세균을 대상으로 총 6가지의 생화학적 검증을 진행하였으며, 선발한 길항 세균 중 CB20R-2-5B, TIPL-4-2B, TIPL-6-1B, TIPL-7-4B 4가지 균주가 5가지의 생화학적 검증에서 성장촉진 및 길항 효소를 분비하는 것을 확인하였다. 또한, BNPL-3-3B와 BNPL-6-3B 두 균주는 성장촉진 효소 분비를 확인하는 4가지의 생화학적 검증(ammonia production, phosphate solubilization, starch hydrolysis, siderophore production)에서 모두에서 효소를 분비하는 것으로 확인되었다. 본 연구에서 선발한 28종의 길항 세균은 배지에서 A. citrulli를 효과적으로 억제하였으며, 사이안화 수소와 단백질분해효소 생산 능력 검정을 통해 길항 활성을 확인하였다. 또한, 선발한 길항 세균의 암모니아 생산 및 불용성 인산 가용화 능력을 확인하여 식물 성장촉진 활성을 가지는 것으로 확인하였다. 따라서, 본 연구결과는 향후 수박 과실썩음병 방제제 및 성장촉진제 등의 친환경 농자재 개발에 유용한 기초 자료가 될 것으로 판단된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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