Ji Sun Park;Young-Woo Kim;Hyungdong Kim;Sun-Ki Kim;Kyeongsoon Park
Journal of Microbiology and Biotechnology
/
v.33
no.11
/
pp.1506-1512
/
2023
Quantitative analysis of adenosine triphosphate (ATP) has been widely used as a diagnostic tool in the food and medical industries. Particularly, the pathogenesis of a few diseases including inflammatory bowel disease (IBD) is closely related to high ATP concentrations. A bioluminescent D-luciferin/luciferase system, which includes a luciferase (FLuc) from the firefly Photinus pyralis as a key component, is the most commonly used method for the detection and quantification of ATP. Here, instead of isolating FLuc produced in recombinant Escherichia coli, we aimed to develop a whole-cell biocatalyst system that does not require extraction and purification of FLuc. To this end, the gene coding for FLuc was introduced into the genome of probiotic Saccharomyces boulardii using the CRISPR/Cas9-based genome editing system. The linear relationship (r2 = 0.9561) between ATP levels and bioluminescence generated from the engineered S. boulardii expressing FLuc was observed in vitro. To explore the feasibility of using the engineered S. boulardii expressing FLuc as a whole-cell biosensor to detect inflammation biomarker (i.e., ATP) in the gut, a colitis mouse model was established using dextran sodium sulfate as a colitogenic compound. Our findings demonstrated that the whole-cell biosensor can detect elevated ATP levels during gut inflammation in mice. Therefore, the simple and powerful method developed herein could be applied for non-invasive IBD diagnosis.
Purpose : To evaluate and compare the diagnostic accuracy of MRI and ultrasound(US) for estimation of invasion depth of gastric carcinoma by correlation with histopathologic findings in vitro and to find out the best MR pulse sequence for detection and accurate delineation of tumor. Materials and Methods : Resected specimen of total or subtotal gastrectomy from 53 patients with gastric carcinoma were done of imaging studies of MRI and US. And US was examined by using high frequency linear transducer for tumor invasion depth by a radiologist. In each case, both imaging findings of MRI and US were evaluated independently for tumor detection and invasion depth by consensus of two radiologists and were compared the diagnostic accuracy between two imaging modalities according to the histopathologic findings. MR imaging with five MR pulse sequences, spin echo T1 and in- and out-of phase gradient echo T1 weighted images, FSE and SSFSE T2 weighted images, were performed. Five MR pulse sequences were evaluated and compared on the point of detection and accurate distinction of tumor from surrounding normal tissue. Results : In EGC, diagnostic accuracy of US(77%) was superior than that of MRI(59%) but no statistically significant difference was noted between two imaging modalities(p=0.096). In AGC, both imaging modalities of MRI and US showed relatively high diagnostic accuracy as 97% and 84% respectively. Diagnostic accuracy of MRI was statistically better than that of US at the significant level(p<0.001). The best MR pulse sequence among five in each specimen was FSE T2WI(75.5%, 40/53) in both EGC and AGC. In AGC, FSE T2WI showed excellent imaging quality by showing very high ratio (93.5%, 29/31) of accurate delineation of tumor. Conclusion : MRI and US show relatively high diagnostic accuracy in the evaluation of tumor invasion depth of resected specimen in AGC. The most excellent pulse sequence of MRI for the evaluation of tumor invasion depth is FSE T2WI on the point of detection and accurate delineation of tumor in both EGC and AGC.
New visible and fast assay system have been developed for tobacco transformant introduced with adenosine deaminase (ADA) marker gene, which converts cytotoxic adenosine analogues to non-toxic inosine analogues and ammonia. Ammonia was changed to blue color in the solution of phenol-nitoprusside and alkaline-hypochlorite. It was possible to detect activity of ADA visibly on the holes of 96 well plate using tiny explant of transgenic tobacco leaves within 1 hour incubation time. As substrates of ADA enzyme from transgenic plant on the plate, a number of adenosine analogues such as 9-D-arabinofuranosyl adenine, cordycepin, 2'-deoxyadenosine, adenosine and xylofuranosyl adenine were possible for detection of ADA activity. Optimal condition of substrate for ADA enzyme was each 10 mM and pH 7.5 in adenosine solution. Especially, transgenic plant did not convert adenosine to inosine and ammonia in the presence of ADA inhibitor deoxycoformycin, which means that ammonia produced from transgenic plant is due to expression of ADA gene. Now, we show that this detection system can be easily, sensitively, fast and cheaply as well as visibly assayed in vitro as GUS gene system with very small size of transformant explant.
Entomopathogenic nematodes were isolated through the investigation in soils collected from cultivated and non-cultivated fields using silkworms (Bombyx mori) and Galleria mellonella trap. The detectable rate of entomopathogenic nematodes of silkworms trap was higher than the G. mellonella trap. This study indicates the detection of entomopathogenic nematodes from soils that silkworms are sensitive superior to the G. mellonella to entomopathogenic nematodes. The steinernema, rhabditidae, and diplogatroidae strains successfully cultured on the silkworms host as well as on artificial media. Reproductivity in the living silkworm larva and pupa was 1.5 to 3.5${\times}$ 10$\^$5/ nematodes per host However, G. mellonella could be multiplied less than 5${\times}$l0$\^$5/ nematodes. The dried pupa of the silkworm following mositurize was cultured 0.5 to 2${\times}$10$\^$5/) nematodes per host. The culture methods of the steinernema, rhabditidae, and diplogatroidae strains, using silkworm powder, extracted chicken intestine, and food waste fertilizer could be applicative, but rate of reproduction was low.
Di-2-ethylhexyl phthalate (DEHP) is the most commonly used phthalate ester in polyvinyl chloride formulations including food packing and storage of human blood. DEHP is a well known as non-genotoxic carcinogen and endocrine disrupting chemical (EDC). DEHP have shown all negative results in ICH-guildeline recommended standard genotoxicity test battery. In this study, to assess the clastogenic and DNA damaging effect in human-derived tissue specific cells, DEHP was treated in human derived MCE-7 cells, HepG2 cells, LNCap cells, BeWo cells, MCE-10A cells, and female peripheral blood cells using micronucleus assay and in human breast carcinoma MCF-7 cells up to $1.28$\times$10^{-2}$ M using Comet assay. The in vitro micronucleus assay is a mutagenicity test system for the detection of chemicals which induce the formation of small membrane bound DNA fragment i.e. micronuclei in the cytoplasm of interphase cells, originated from clastogenic and/or aneugenic mechanism. The single cell gel electrophoresis assay (Comet assay) is used to detect DNA strand-breaks and alkaline labile site. In our results, DEHP increased significantly and/or dose-depentently and time-dependently micronucleus frequency at the 6 and 24 hr without metabolic activation system only in MCE-7 cells. DEHP treated with 2 hrs in MCF-7 cells using Comet assay induced DNA damage dose-depentantly.
Autophagy is an intracellular degradation and recycling system. Oocyte maturation is dynamic process, in which various proteins should be synthesized and degraded. In our previous study, we reported the loci of autophagosome and dynamics of autophagic activity in porcine oocytes during in vitro maturation. In this study, we verified loci of autophagosome in porcine follicular cumulus-oocyte complex by detection of microtubule-associated protein 1A/1B-light chain 3 (LC3) which is the reliable marker of autophagosome. Porcine ovary including various sizes of follicles was fixed within 1 hour after collection from slaughterhouse. After fixation, immunohistochemistry was conducted on sliced ovary tissue containing various sizes of follicles by using LC3 antibody. As a result, LC3 signal was clearly detected in both cumulus and oocytes of various sizes of follicles. We also found ring shaped signal which represent autophagosome near oocyte membrane. Most of the signals in oocytes were localized nearby cellular membrane while evenly dispersed in cumulus cells. Therefore, this result suggests that autophagy occurs in porcine COCs (cumulus-oocyte complexes) at follicular stage.
Background: Curcumin has has been reported to exert anti-inflammatory, anti-oxidation and anti-angiogenic activity in various types of cancer. It has also been shown to induce apoptosis in leukemia cells. We aimed to unravel the role of the redox pathway in Curcumin mediated apoptosis with a panel of human leukemic cells. Materials and Methods: In this study in vitro cytotoxicity of Curcumin was measured by MTT assay and apoptotic effects were assessed by annexin V/PI, DAPI staining, cell cycle analysis, measurement of caspase activity and PARP cleavage. Effects of Curcumin on intracellular redox balance were assessed using fluorescent probes like $H_2DCFDA$, JC1 and an ApoGSH Glutathione Detection Kit respectively. Results: Curcumin showed differential anti-proliferative and apoptotic effects on different human leukemic cell lines in contrast to minimal effects on normal cells. Curcumin induced apoptosis was associated with the generation of intracellular ROS, loss of mitochondrial membrane potential, intracellular GSH depletion, caspase activation. Conclusions: As Curcumin induces programmed cell death specifically in leukemic cells it holds a great promise as a future therapeutic agent in the treatment of leukemia.
Kim, Seon-Mi;Lim, Seong-In;Song, Jae-Young;Hyun, Bang-Hun
Korean Journal of Veterinary Research
/
v.52
no.4
/
pp.259-262
/
2012
Classical swine fever (CSF) is a highly contagious disease among swine that has an important economic impact on worldwide. One clinical symptom of CSF is leukopenia, in particular lymphopenia, which is a characteristic event that occurs early in the course of CSF. Though lymphopenia associated with apoptosis, the pathogenic mechanism underlying the lymphopenia has not been well studied. To understand these mechanisms, we investigated the response of porcine B cell lines to infection with SW03, virulent strain isolated from swine tissue in Korea. This study demonstrated that SW03-infected L35 cell were induced apoptosis through the detection of activated caspase-3. In addition, SW03 infection leaded to alterations in pro-apoptotic, Bax, and anti-apoptotic, Bcl-xL proteins of Bcl-2 family. Our results would suggest that SW03-infected L35 cells induced apoptosis via intrinsic mitochondrial pathway.
Ingrid Pernet;Corinne Reymermier;Anne Guezennec;Jacqueline Viac;Branca, Jean-Eric;Joelle Guesnet;Eric Perrier
Proceedings of the SCSK Conference
/
2003.09a
/
pp.85-96
/
2003
Normal human skin, constantly challenged by environmental micro-organisms, has an innate ability to fight invading microbes through antimicrobial peptides. These peptides, described in both plant and animal kingdoms are able to inactivate a broad spectrum of micro-organisms. Mammalian defensins constitute one of the most common antimicrobial peptide family. Among the three human beta-defensins hBD1, hBD2 and hBD3 produced in epithelia, only hBD2 and hBD3 are inducible and additionally have been described as expressed by differentiated keratinocytes at site of inflammation and infection. The aims of these studies were to define a cell culture model in which the basal production of hBD could be detected and up-regulated in order to enhance skin auto-protection against micro-organisms. A specific Polymerase Chain Reaction method have been developed for hBD2 and hBD3 mRNA detection in non-differentiated monolayer keratinocytes cell culture. We have been able to demonstrate that in vitro, hBD2 and hBD3 expression in normal human keratinocytes could be detected and enhanced by TNF-alpha and IFN-gamma, in hypercalcic culture conditions. This research opened the possibility of the development of cosmetic active compounds, able to induce the expression of skin natural antibiotic peptides responsible about microflora ecology of the skin.
Proceedings of the Korea Society of Environmental Toocicology Conference
/
2004.05a
/
pp.47-60
/
2004
Higher plants can be valuable genetic assay systems for monitoring environmental pollutants and evaluating their biological toxicity. Two assays are considered ideal for in situ monitoring and testing of soil, airborne and aqueous mutagenic agents; the Tradescantia stamen hair assay for somatic cell mutations and the Tradescantia micronucleus assay for chromosome aberrations. Both assays can be used for in vivo and in vitro testing of mutagens. Since higher plant systems are now recognized as excellent indicators and have unique advantages over in situ monitoring and screening, higher plant systems could be accepted by regulatory authorities as an alternative first-tier assay system for the detection of possible genetic damages resulting from the pollutants or chemicals used and produced by industrial sectors. It has been concluded that potential mutagen and carcinogen such as the heavy metals among indoor air particulates, volatile compounds in the working places, soil, and water pollutants contribute to the overall health risk. This contribution can be considerable under certain circumstances. It is therefore important to identify the level of genotoxic activity in the environment and to relate it to the biomarkers of a health risk in humans. The results from the higher plant bioassays could make a significant contribution to assessing the risks of pollutants and protecting the public from agents that can cause mutation and/or cancer. The plant bioassays, which are relatively inexpensive and easy to handle, are recommended for the scientists who are interested in monitoring pollutants and evaluating their environmental toxicity to living organisms.
본 웹사이트에 게시된 이메일 주소가 전자우편 수집 프로그램이나
그 밖의 기술적 장치를 이용하여 무단으로 수집되는 것을 거부하며,
이를 위반시 정보통신망법에 의해 형사 처벌됨을 유념하시기 바랍니다.
[게시일 2004년 10월 1일]
이용약관
제 1 장 총칙
제 1 조 (목적)
이 이용약관은 KoreaScience 홈페이지(이하 “당 사이트”)에서 제공하는 인터넷 서비스(이하 '서비스')의 가입조건 및 이용에 관한 제반 사항과 기타 필요한 사항을 구체적으로 규정함을 목적으로 합니다.
제 2 조 (용어의 정의)
① "이용자"라 함은 당 사이트에 접속하여 이 약관에 따라 당 사이트가 제공하는 서비스를 받는 회원 및 비회원을
말합니다.
② "회원"이라 함은 서비스를 이용하기 위하여 당 사이트에 개인정보를 제공하여 아이디(ID)와 비밀번호를 부여
받은 자를 말합니다.
③ "회원 아이디(ID)"라 함은 회원의 식별 및 서비스 이용을 위하여 자신이 선정한 문자 및 숫자의 조합을
말합니다.
④ "비밀번호(패스워드)"라 함은 회원이 자신의 비밀보호를 위하여 선정한 문자 및 숫자의 조합을 말합니다.
제 3 조 (이용약관의 효력 및 변경)
① 이 약관은 당 사이트에 게시하거나 기타의 방법으로 회원에게 공지함으로써 효력이 발생합니다.
② 당 사이트는 이 약관을 개정할 경우에 적용일자 및 개정사유를 명시하여 현행 약관과 함께 당 사이트의
초기화면에 그 적용일자 7일 이전부터 적용일자 전일까지 공지합니다. 다만, 회원에게 불리하게 약관내용을
변경하는 경우에는 최소한 30일 이상의 사전 유예기간을 두고 공지합니다. 이 경우 당 사이트는 개정 전
내용과 개정 후 내용을 명확하게 비교하여 이용자가 알기 쉽도록 표시합니다.
제 4 조(약관 외 준칙)
① 이 약관은 당 사이트가 제공하는 서비스에 관한 이용안내와 함께 적용됩니다.
② 이 약관에 명시되지 아니한 사항은 관계법령의 규정이 적용됩니다.
제 2 장 이용계약의 체결
제 5 조 (이용계약의 성립 등)
① 이용계약은 이용고객이 당 사이트가 정한 약관에 「동의합니다」를 선택하고, 당 사이트가 정한
온라인신청양식을 작성하여 서비스 이용을 신청한 후, 당 사이트가 이를 승낙함으로써 성립합니다.
② 제1항의 승낙은 당 사이트가 제공하는 과학기술정보검색, 맞춤정보, 서지정보 등 다른 서비스의 이용승낙을
포함합니다.
제 6 조 (회원가입)
서비스를 이용하고자 하는 고객은 당 사이트에서 정한 회원가입양식에 개인정보를 기재하여 가입을 하여야 합니다.
제 7 조 (개인정보의 보호 및 사용)
당 사이트는 관계법령이 정하는 바에 따라 회원 등록정보를 포함한 회원의 개인정보를 보호하기 위해 노력합니다. 회원 개인정보의 보호 및 사용에 대해서는 관련법령 및 당 사이트의 개인정보 보호정책이 적용됩니다.
제 8 조 (이용 신청의 승낙과 제한)
① 당 사이트는 제6조의 규정에 의한 이용신청고객에 대하여 서비스 이용을 승낙합니다.
② 당 사이트는 아래사항에 해당하는 경우에 대해서 승낙하지 아니 합니다.
- 이용계약 신청서의 내용을 허위로 기재한 경우
- 기타 규정한 제반사항을 위반하며 신청하는 경우
제 9 조 (회원 ID 부여 및 변경 등)
① 당 사이트는 이용고객에 대하여 약관에 정하는 바에 따라 자신이 선정한 회원 ID를 부여합니다.
② 회원 ID는 원칙적으로 변경이 불가하며 부득이한 사유로 인하여 변경 하고자 하는 경우에는 해당 ID를
해지하고 재가입해야 합니다.
③ 기타 회원 개인정보 관리 및 변경 등에 관한 사항은 서비스별 안내에 정하는 바에 의합니다.
제 3 장 계약 당사자의 의무
제 10 조 (KISTI의 의무)
① 당 사이트는 이용고객이 희망한 서비스 제공 개시일에 특별한 사정이 없는 한 서비스를 이용할 수 있도록
하여야 합니다.
② 당 사이트는 개인정보 보호를 위해 보안시스템을 구축하며 개인정보 보호정책을 공시하고 준수합니다.
③ 당 사이트는 회원으로부터 제기되는 의견이나 불만이 정당하다고 객관적으로 인정될 경우에는 적절한 절차를
거쳐 즉시 처리하여야 합니다. 다만, 즉시 처리가 곤란한 경우는 회원에게 그 사유와 처리일정을 통보하여야
합니다.
제 11 조 (회원의 의무)
① 이용자는 회원가입 신청 또는 회원정보 변경 시 실명으로 모든 사항을 사실에 근거하여 작성하여야 하며,
허위 또는 타인의 정보를 등록할 경우 일체의 권리를 주장할 수 없습니다.
② 당 사이트가 관계법령 및 개인정보 보호정책에 의거하여 그 책임을 지는 경우를 제외하고 회원에게 부여된
ID의 비밀번호 관리소홀, 부정사용에 의하여 발생하는 모든 결과에 대한 책임은 회원에게 있습니다.
③ 회원은 당 사이트 및 제 3자의 지적 재산권을 침해해서는 안 됩니다.
제 4 장 서비스의 이용
제 12 조 (서비스 이용 시간)
① 서비스 이용은 당 사이트의 업무상 또는 기술상 특별한 지장이 없는 한 연중무휴, 1일 24시간 운영을
원칙으로 합니다. 단, 당 사이트는 시스템 정기점검, 증설 및 교체를 위해 당 사이트가 정한 날이나 시간에
서비스를 일시 중단할 수 있으며, 예정되어 있는 작업으로 인한 서비스 일시중단은 당 사이트 홈페이지를
통해 사전에 공지합니다.
② 당 사이트는 서비스를 특정범위로 분할하여 각 범위별로 이용가능시간을 별도로 지정할 수 있습니다. 다만
이 경우 그 내용을 공지합니다.
제 13 조 (홈페이지 저작권)
① NDSL에서 제공하는 모든 저작물의 저작권은 원저작자에게 있으며, KISTI는 복제/배포/전송권을 확보하고
있습니다.
② NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 상업적 및 기타 영리목적으로 복제/배포/전송할 경우 사전에 KISTI의 허락을
받아야 합니다.
③ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 보도, 비평, 교육, 연구 등을 위하여 정당한 범위 안에서 공정한 관행에
합치되게 인용할 수 있습니다.
④ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 무단 복제, 전송, 배포 기타 저작권법에 위반되는 방법으로 이용할 경우
저작권법 제136조에 따라 5년 이하의 징역 또는 5천만 원 이하의 벌금에 처해질 수 있습니다.
제 14 조 (유료서비스)
① 당 사이트 및 협력기관이 정한 유료서비스(원문복사 등)는 별도로 정해진 바에 따르며, 변경사항은 시행 전에
당 사이트 홈페이지를 통하여 회원에게 공지합니다.
② 유료서비스를 이용하려는 회원은 정해진 요금체계에 따라 요금을 납부해야 합니다.
제 5 장 계약 해지 및 이용 제한
제 15 조 (계약 해지)
회원이 이용계약을 해지하고자 하는 때에는 [가입해지] 메뉴를 이용해 직접 해지해야 합니다.
제 16 조 (서비스 이용제한)
① 당 사이트는 회원이 서비스 이용내용에 있어서 본 약관 제 11조 내용을 위반하거나, 다음 각 호에 해당하는
경우 서비스 이용을 제한할 수 있습니다.
- 2년 이상 서비스를 이용한 적이 없는 경우
- 기타 정상적인 서비스 운영에 방해가 될 경우
② 상기 이용제한 규정에 따라 서비스를 이용하는 회원에게 서비스 이용에 대하여 별도 공지 없이 서비스 이용의
일시정지, 이용계약 해지 할 수 있습니다.
제 17 조 (전자우편주소 수집 금지)
회원은 전자우편주소 추출기 등을 이용하여 전자우편주소를 수집 또는 제3자에게 제공할 수 없습니다.
제 6 장 손해배상 및 기타사항
제 18 조 (손해배상)
당 사이트는 무료로 제공되는 서비스와 관련하여 회원에게 어떠한 손해가 발생하더라도 당 사이트가 고의 또는 과실로 인한 손해발생을 제외하고는 이에 대하여 책임을 부담하지 아니합니다.
제 19 조 (관할 법원)
서비스 이용으로 발생한 분쟁에 대해 소송이 제기되는 경우 민사 소송법상의 관할 법원에 제기합니다.
[부 칙]
1. (시행일) 이 약관은 2016년 9월 5일부터 적용되며, 종전 약관은 본 약관으로 대체되며, 개정된 약관의 적용일 이전 가입자도 개정된 약관의 적용을 받습니다.