Immunostimulation effects of the cell wall components isolated from Lactobacillus plantarum were investigated by studying the macrophage s tumorcidal activity, splenocyte proliferation, anticomplementary activity and the inhibition of peritoneal tumor cell growth measured with ICR mice inoculated with sarcoma 180. The immunopotentiating cell wall components were a complex of peptidoglycan and exopolysaccharides. The tumorcidal activity of macrophage against Yacl and B16 tumor cells was enhanced when the cell wall components were added into the macrophage s culture medium. They also stimulated splenocytes to proliferate up to the same level as when the concanavalin A was added into the splenocyte's culture medium. The complementary activity was inhibited by 50% when the cell wall components were incubated with the sheep red blood cells treated with hemolysin and guinea pig complement. This result confirmed that the cell wall components had an antitumor effect, because the anticomplementary activity is usually accompanied by an antitumor activity at the same time. This fact was confirmed again by the inhibition of the growth of sarcoma 180 when the cell wall components were injected intraperitoneally into ICR mice inoculated with sarcoma 180. As a result, it is concluded that the cell wall components isolated from Lactobacillus plantarum had multifunctional immunostimulation effects in vitro and in vivo.
Protein-polysaccharide fractions separated from nine Korean wild mushrooms were subjected to an in vitro screening test for lymphoblastogenic activity. Of these, PPLP, the protein-polysaccharide fraction of Lycoperdon pedicellatum, showed the most potent activity and were further investigated for its antitumor activity. When intraperitoneally injected into ICR mice once daily for six days at a dose of 30 mg/kg, PPLP strongly inhibited the growth of sarcoma 180 tumor cells, showing the inhibition ratio of 97.6%. PPLP also showed in vitro inhibitory activity on sarcoma 180 or leukemia L1210 at the concentration of 500 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ or higher. These results strongly suggest that PPLP might exert its antitumor activity through immunostimulation as well as inhibitory activity on the tumor cells.
Polysaccharide fraction isolated from Coriolus versicolor (Copolang) was studied on the antitumor activity and immunostimulation activities with reference to PS-K. Copolang showed nearly equal antitumor activities to the PS-K and exhibited marked augmentation effects on the antibody mediated hypersensitivity reaction, delayed type hypersensitivity reaction and NK-cell activity in tumor bearing mice. But it did not show any noticeable effect on the antibody secreting cell and macrophage function in normal mice. These results indicate that the antitumor activity and immunostimulating effect of Copolang are comparable to those of PS-K.
한국식품영양과학회 2001년도 International Symposium on Food,Nutrition and Health for 21st Century
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pp.161-169
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2001
Lactic acid producing bacteria were isolated from baby feces and characterized to be used as a probiotic with anti Helicobacter pylori functions. The selected bacteria had inhibition activity on the adherance and growth of H. pylori. These bacteria had additional beneficial characteristics for the probiotic such as antibacterial activity, antitumor activity, immunostimulation activity, resistance to antibiotic and bile salt, ability to bind to the intestinal cells, and safe for the human use.
Recently, we reported that immunostimulation of primary rat cortical astrocyte caused stimulation of glucose deprivation induced apoptotic cell death. To enhance the understanding of the mechanism of the potentiated cell death of clucose-deprived astrocyte by immunostimulation, we investigated the effect of immunostimulation on the glucose deprivation induced cell death of rat C6 glioma cells. Co-treatment of C6 glioma cells with lipopolysaccharide (LPS, $1\;{\mu}\textrm{g}/ml$) and interferon ${\gamma}(IFN{\gamma},\;100U/ml)$ is serum free condition caused marked elevationo f nitric oxide production ($>50\;{\mu}M$). In this condition, glucose deprivation caused significant release of lactate dehdrogenase (LDH) from C6 glioma cells while control cells did not show LDH release. To investigate whether elevated level of nitric oxide is responsible for the enhanced LDH release in glucose-deprived condition, C6 glioma cells were treated with 3-morphorinosydnonimine (SIN-1) and it was observed that SIN-1 caused increase in LDH release from glucose-deprived C6 glioma cells. Treatment of C6 glioma cells with $25\;{\mu}M$ of pyrrolidinedithiocarbamate (PDTC) which inhibit Nuclear factor kB (NF-kB) activation, caused complete inhibition of nitric oxide production. Treatment of C6 glioma cells with NO synthase inhibitors, $N^{G}$-nitro-L-arginine (NNA) or L-$N{\omega}$-nitro-L-arginine methyl ester (L-NAME), caused inhibition of nitric oxide production and also glucose deprivation induced cell death of cytokine-stimulated C6 glioma cells. In addition, diaminohydroxypyrimidine (DAHP, 5 mM) which inhibits the synthesis of tetrahydrobiopterine (BH4), one of essential cofactors for iNOS activity, caused complete inhibition of NO production from immunostimulated C6 glioma cells. The results from the present study suggest that immunostimulation causes potentiation of glucose deprivation induced death of C6 glioma cells which is mediated at least in part by the increased production of nitric oxide. The vulnerability of immunostimulated C6 glioma cells to hypoglycemic insults may implicate that the elevated level of cytokines in various ischemic and neurodegenerative diseases may play a role in their pathogenesis.
Background: In recent years, there has been considerable research on recycling of agro-industrial waste for production of bioactive compounds. The food processing industry produces large amounts of citrus peels that may be an inexpensive source of useful agents. Objective: The present work aimed to explore the phytochemical content, antioxidant, anticancer, antiproliferation, and antigenotxic activities of lemon, grapefruit, and mandarin peels. Materials and Methods: Peels were extracted using 98% ethanol and the three crude extracts were assessed for their total polyphenol content (TPC), total flavonoid content (TFC), and antioxidant activity using DPPH (1, 1-diphenyl-2-picrylhydrazyl). Their cytotoxic and mitogenic proliferation activities were also studied in human leukemia HL-60 cells and mouse splenocytes by CCK-8 assay. In addition, genotoxic/antigenotoxic activity was explored in mouse splenocytes using chromosomal aberrations (CAs) assay. Results: Lemon peels had the highest of TPC followed by grapefruit and mandarin. In contrast, mandarin peels contained the highest of TFC followed by lemon and grapefruit peels. Among the extracts, lemon peel possessed the strongest antioxidant activity as indicated by the highest DPPH radical scavenging, the lowest effective concentration 50% ($EC_{50}=42.97{\mu}g\;extract/mL$), and the highest Trolox equivalent antioxidant capacity (TEAC=0.157). Mandarin peel exhibited moderate cytotoxic activity ($IC_{50}=77.8{\mu}g/mL$) against HL-60 cells, whereas grapefruit and lemon peels were ineffective anti-leukemia. Further, citrus peels possessed immunostimulation activity via augmentation of proliferation of mouse splenocytes (T-lymphocytes). Citrus extracts exerted non-cytotoxic, and antigenotoxic activities through remarkable reduction of CAs induced by cisplatin in mouse splenocytes for 24 h. Conclusions: The phytochemical constituents of the citrus peels may exert biological activities including anticancer, immunostimulation and antigenotoxic potential.
In order to study the clinical usefulness of crude polysaccharides fractionated from Eleutherococcus senticosus, EN-3, in eliminating tumors, we have investigated the effect of combination therapy on the murine tumor metastasis and growth models. In experimental metastasis of colon26-M3.1 cells, prophylactic intravenous (i.v.) administration of EN-3 (0.5, 5, and 50 $\mu\textrm{g}$/mouse) inhibited tumor metastasis compared with tumor control group in 33.6, 66.8, and 81.8% respectively. The administration of EN-3 (50 $\mu\textrm{g}$/mouse) also exhibited a 66.1% therapeutic effect on lung tumor metastasis. Although EN-3 induced no toxic effect on both tumor cell and normal splenocyte in the concentration below 100 $\mu\textrm{g}$/mι in in vitro, it induced significant proliferating activity on normal splenocyte in the concentration-dependent manner. In an analysis of NK-cell activity, i.v. administration of EN-3 (4∼100 $\mu\textrm{g}$/mouse) significantly augmented NK cytotoxicity to YAC-1 tumor cells. The combination treatments of cisplatin (10 $\mu\textrm{g}$) and EN-3 (5 $\mu\textrm{g}$) induced synergistic effect on the inhibition of tumor metastasis in experimental tumor metastasis model produced by colon26-M3.1 cells. In addition, the combination treatments also exhibited prolongation of lifespan in S∼180 tumor bearing mouse for over the 60 days. Even though cisplatin (2.5 $\mu\textrm{g}$/mι) exhibited cytotoxicity to tumor cells and inhibited tumor growth over 95% in in vitro, combination treatment with EN-3 (20 $\mu\textrm{g}$/mι) was induced splenocyte proliferation and produced cytokines, such as TNF-$\alpha$, IL-1 and IL-12, from the macrophages. These results suggested that EN-3 stimulate immune system non-specifically and apply to the biological response modifiers (BRM) in chemo-immunotherapy for tumor prevention.
A protein-polysaccharide fraction of a Korean wild mushroom Psathyrella velutina, PVP, was prepared and its antitumor immunomodulatory activity was investigated. When PVP was administered once daily for seven days from day 1 to day 7 into male ICR mice implanted with 1 $\times$ 10$^{5}$ cells of sarcom 180 tumor cells into the peritoneum on day 4, it inhibited the growth of sarcoma 180 cells by 92.8%. In XTT assay, PVP also exhorted in vitro anti-proliferation activity on U-937, a human monoblastoid cell line, as well as sarcoma 180 cells. PVP showed marked stimulatory activity on the immune system in that it induced the accumulation of PEC (the stimulation index, Sl=4.90 at 100 mg/kg), stimulated the BALB/c mouse splenic lymphocytes to form lymphoblasts (Sl=5.75 at 100$\mu\textrm{g}$/ml), and upergulated the expression of CD25 molecules. All these results strongly support that PVP exhorts its antitumor activity through stimulation of the immune system as well as anti-proliferative activity on the tumor cells.
국내에서 자생하는 61주의 고등균류로부터 면역증강효과를 검색하기 위해 이들로부터 성분을 분리하여 이들의 항보체활성을 측정한 결과, krestin의 보체활성도인 20.6%보다 우수한 보체활성 효과를 나타낸 것은 11주 였으며, 이 중에는 Ganoderma lucidum 5주, Lentinus edodes 3주, Cordyceps sp. 3주 및 Agaricus campestris 1주이다.
Protein-polysaccharide fractions, PJ-3 and PJ-4, were prepared from mycelial culture filtrate of an insect-born fungus, Paecilomyces japonica DGUM 32001, and subjected to a flow cytometrical analysis for their vivo antitumor and immunomodulating activity in ICR mice. When i.p. injected once daily for semen days at 100 mg/kg, PJ-4 exerted a strong antitumor activity showing the growth inhibition ratio of 85.1% against i.p. implanted sarcoma 180 cells, while PJ-3 showed only a weak activity. Moreover, PJ-4 signiscantly increased the expression level of CD25 (IL-2R $\alpha$-chain) as well as forward scatter (FSC) values of splenic CD8$^{8}$ T cells. It is also noteworthy that PJ-4 strongly induced the peritoneal exudate cells in the same experiment. In an in vitro study, PJ-4 slightly inhibited the growth of sarcoma 180 cells at the concentration of 50$\mu$g/ml or higher. These results strongly suggest that PJ-4 might exert its antitumor activity through immunostimulation as well as direct inhibitory activity on the tumor cells.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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