To establish an effective diagnostic measure for detection of the antibodies against Actinobacillus pleuropneumoniae, the methods for tube agglutination test (TAT), plate agglutination test (PAT), micro-agglutination test(MAT) and agar-gel immunodiffusion test(ID) were improved and standarized, and the comparative studies were carried out. The results obtained through the experiments were summarized as follows. 1. The rabbit hyperimmune sera to reference serotypes 1 to 6 were cross-tested with TAT, PAT, MAT and ID. In the homologous systems, the range of antibody titers in TAT was 80 to 640, showing the cross-reaction in serotypes 3, 4, 5 and 6. The range of antibody titers in PAT was 4 to 64, showing the cross-reaction in serotypes 3, 4, 5 and 6. In ID, the range of antigen titers was 8 to 32, and cross-reaction was observed in serotype 5. 2. The optimal concentration of antigen in PAT and MAT were 100mg /ml and 1.25mg /ml respectively. The most sensitive reaction in MAT was observed in 52$^{\circ}C$ for 18hrs. 3. In ID, the most promising antigen and the buffer for agar-gel were EDTA-treated antigen and 0.05M tris buffer (pH 7.2), respectively. 4. By the tests for 200 swine sera, it was found that the frequency of positive reaction were 203 in TAT, 240 in PAT and 163 in ID. 5. When compared the titers of TAT with those of MAT for 200 swine sera, MAT showed the higher titer than TAT being increased by relative correlation. Int was found that the titer for positive readings were 20 in TAT and 40 in MAT. 6. when compared the results of ID with those of TAT for 200 swine sera, all sera with TAT titer under 10 were negative in ID. Of the sera with TAT titer 20 and 40, 55.1% nd 91.8% were positive in ID, respectively. All sera with TAT titer above 80 were positive in ID. In comparison of ID and MAT, all sera with MAT titer under 20 were negative in ID. Of the sera with MAT titer 40 and 80, 24.7% and 93.9% were positive in ID, respectively. All sera with MAT titer over 160 showed positive in ID. 7. In conclusion, the established MAT showed high sensitivity but low specificity, wherease ID revealed low sensitivity but high specificity.
Total 51 calves born from both 28 seropositive and 23 seronegative dams were subjected to study both prenatal and postnatal infections of bovine leukemia virus (BLV), and the duration of passive colostral antibody by means of immunodiffusion (ID) test. All calves were tested for precolostral and postcolostral periods by 16 months of age. The results were as follows: 1. Of 28 precolostral sera of the calves born from infected dams, one appeared positive, indicating in utero BLV infection from the dam. 2. BLV-antibody test for the postcolostral sera of the calves born from seropositive or seronegative dams showed that the colostral antibody of the calves disappeared from 2 to 6 months of age, and the increase of the number of seropositive calves initiated from 3 to 4 months of age indicated postnatal infection.
A microplate enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for detecting antibodies to bovine leukemia virus(BLV) is described and compared its sensitivity with that of the agar gel immunodiffusion test (ID) with BLV glycoprotein (gp) antigen using 263 sera collected in Korea and Japan. There was 98.5 per cent agreement between ELISA and ID when ELISA value, the value of tested serum(T) was devided with that of standard negative seurm(N) after the value of control was eliminated from T and N (T-C/N-C), of 1.5 or greater was considered positive. One hundred and forty four (99.6%) of 145 sera which were positive by ID were greater than 1.5 by ELISA, and 115 (97.5%) of 118 sera which were negative by ID were less than 1.5 by ELISA. As a result, it suggest that the ELISA test using BLV-gp antigen provides a useful serological tool for the diagnosis of BLV infection.
To investigate bovine leukosis virus (BLV) infection in the cattle rearing in a dairy farm where a case of bovine lymphosarcoma had been identified several years ago, the 196 Holstein cattle including newborn calves to 12 years of age were tested. The BLV antibody test and peripheral lymphocyte count for bovine leukosis were carried out by the immunodiffusion (ID) test and Bendixen's Kep. These tests were performed 2 to 4 times at the interval of 3 to 5 months. The observed results were as follows: 1. The positive rates of BLV-antibody in the 1st, the 2nd, the 3rd and the 4th tests were 23.3%, 28.1%, 49.0% and 55.7%, respectively. The conversion rates from negative to positive in the 2nd, the 3rd and the 4th tests were 8.9%, 41.4%, and 20.0%, respectively. Results showed that the highest conversion rate was observed at the 3rd test which was conducted after winter. The highest positive rate by ID test were observed in 4 year old cattle in the 1st and 2nd tests, and in 2 year old herd in the 3rd and 4th tests. 2. In hematological test by Bendixen's Key, the positive and suspicious rates in the 1st, the 2nd, the 3rd and the 4th tests were 5.8 and 7.8%, 8.3 and 6.6%, 8.7 and 10.1%, 10.8 and 19.6% respectively. Results showed that the positive and. suspicious rates increased in course of time. 3. 70 to 100% of the positive cattle in hematological test were positive for BLV-antibody test. All of 13 cattle with persistent lymphocytosis (PL) were also positive for BLV-antibody, indicating the high relationship between PL and BLV-antibody. 4. The number of total leukocytes and absolute lymphocytes in the BLV-antibody positive cattle appeared significantly higher than those of the negative cattle. The markedly increased cell counts were observed in the cattle over one year old. 5. The mean of total leukocytes and absolute lymphocytes in the negative cattle for BLV-antibody increased slightly after sero-conversion into positive. 6. In the clinical examinations during experimental periods, none of the 72 positive cattle for BLV-antibody showed any lesions for bovine leukosis.
Kim, Jong-man;Ahn, Jong-sam;Woo, Seung-roung;Jo, Dong-hee;Jo, Yun-sang;Park, Jeung-moon;Yoon, Yong-dhuk;Chang, Guk-hyun
Korean Journal of Veterinary Research
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v.34
no.1
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pp.93-97
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1994
A immunological survey of paratuberculosis in dairy and Korean native cattles was conducted by enzyme linked immunosorbent assay(ELISA), complement fixation test(CFT), agar gel immunodiffusion test (AGID) and intradermal skin test(ID). Over all prevalence of pararuberculosis in cattles was 6.7%(109/1633) by ID, 7.5(205/2719) by AGID, 9.3% (245/2641) by CFT and 13.4%(363/2719) by ELISA. Prevalence in dairy cattle was higher than that of Korean native cattle. Of 70 ELISA-positive cattle, 23(28.6%) and 48(68.6%) cattles were classified as positive in the AGID and positive or suspect in CFT, respectively. Of 92 ELISA-suspect cattle, 32(34.9%) and 48(52.2%) cattles were classified as AGID-positive and CFT-positive or suspect, respectively. It was concluded that paratuberculosis is widespread in cattle of Korea.
Jeon, Nak-Beom;Lee, Hyang-Burm;Shon, Dong-Hwa;Yu, Seung Hun
Research in Plant Disease
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v.9
no.2
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pp.94-98
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2003
To produce antibodies against Pseudomonas tolaasii and P. agarici, lyophilized P. tolaasii and P. agarici ($5{\times}10^7$ cfu/ml) and Freund, s adjuvant were immunized into rabbits 4 times. The specificity and sensitivity of the antibodies were evaluated by immunodiffusion test and indirect enzyme-linked immunosorbent assay (id ELISA). The ${\alpha}$-P. tolaasii antibody was very specific only against P. tolaasii, while ${\alpha}$-P. agarici antibody was not specific and showed a high cross reactivity toward P. tolaasii with detection limit concentration of $2{\times}10^3$ cfu/ml. However, the cross reactivities of ${\alpha}$-P. agarici antibody toward the related species including P. reactans were very low. Our results showed that ${\alpha}$-P. tolaasii and ${\alpha}$-P. agarici antibodies against P. tolaasii and P. agarici, respectively, might be useful for rapid and simple detection of the causal agents of bacterial brown and yellow blotches in cultivated oyster mushrooms.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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