• Applied Microscopy
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• 제29권2호
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• pp.201-209
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• 1999

무당개구리 상처치유 과정 중 재생되는 피부 상피세포의 형태학적 특성을 관찰하기 위하여 투과전자현미경을 이용하였다. 상처유도 추 재형성과정 중의 표피는 재생되는 상피세포에 의해 $3\sim4$층을 형성하였으며, 세포들의 크기는 상충에서 하층으로 갈수록 크게 신장되어 있음이 관찰되었다. 세포 간격 또한 세포층의 기저부를 향할수록 넓어졌다. 기저층에 위치한 세포는 세포질 돌기들을 내어 데스모소옴이 형성되어 있었고, 원주형이었다. 기저막이 형성된 세포들 사이에는 원기세포들이 위치하고 있었으며, 이 세포들은 불규칙한 난형 또는 타원형으로 세포의 크기는 다른 세포들에 비해 작게 관찰되었다. 따라서, 상피조직은 재생될 때 원기세포들의 분열과 이동이 동반되어야 하므로, 무당개구리 상피는 시간이 경과함에 따라 정상조직과 동일하게 재생될 수 있을 것으로 생각된다. 본 연구에서 상처가 치유된 시점으로 확인된 31일 경의 상피조직의 관찰 결과 역시 추측했던 점과 일치되어 정상과 동일한 조직학적 구성을 이루고 있었다. 또한 재형성 과정 중 상피는 피부가 정상조직으로 형성되기 전까지 수분유실을 막는 방어벽으로서의 기능과 허물을 벗는데 관여하는 것으로 확인되었다.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제49권3호
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• pp.285-290
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• 2011

Naegleria fowleri, a ubiquitous free-living ameba, causes fatal primary amebic meningoencephalitis in humans. N. fowleri trophozoites are known to induce cytopathic changes upon contact with microglial cells, including necrotic and apoptotic cell death and pro-inflammatory cytokine release. In this study, we treated rat microglial cells with amebic lysate to probe contact-independent mechanisms for cytotoxicity, determining through a combination of light microscopy and scanning and transmission electron microscopy whether N. fowleri lysate could effect on both necrosis and apoptosis on microglia in a time- as well as dose-dependent fashion. A $^{51}Cr$ release assay demonstrated pronounced lysate induction of cytotoxicity (71.5%) toward microglial cells by 24 hr after its addition to cultures. In an assay of pro-inflammatory cytokine release, microglial cells treated with N. fowleri lysate produced TNF-${\alpha}$, IL-6, and IL-$1{\beta}$, though generation of the former 2 cytokines was reduced with time, and that of the last increased throughout the experimental period. In summary, N. fowleri lysate exerted strong cytopathic effects on microglial cells, and elicited pro-inflammatory cytokine release as a primary immune response.

• 한방안이비인후피부과학회지
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• 제26권1호
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• pp.19-34
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• 2013

Objective : This study was performed to evaluate the effect of immune reaction inductive substances such as PMA, LPS, DPE, DNCB and WP, the whitman pigra extracting substance at simultaneously on the translocation of $NF{\kappa}B$ towards to the nucleus and the mRNA expression patterns of various cytokine genes in THP-1 cells, monocytes of human. Methods : To analyze the cytokine genes expressions, the RT-PCR method was used, and measuring TNF-${\alpha}$ that had been secreted during cell culture by the ELISA method. The morphological changes were observed during THP-1 cell by a scanning electron microscope and the quantitative distribution of $NF{\kappa}B$ in the cell that was analyzed through immunocytochemistry and a confocal microscopy. Results : WP showed different influences onto the mRNA expression patterns of cytokine genes with PMA, LPS. DPE and DNCB according to the types of immune inductive substances in the THP-1 cells. Upon treating PMA and DPE on the THP-1 cells at the same time or either additionally treating WP thereon, the movement of $NF{\kappa}B$ increase towards the nucleus from cell cytoplasm was able to be observed. The expressions of IL-$1{\alpha}$ and IFN-${\gamma}$ induced by PMA and PMA+DNCB were suppressed by WP while the expression of TGF-${\beta}$ was promoted. Regarding the secretion pattern of TNF-${\alpha}$ according to the treatment of PMA, its secretion amount was incredibly increased by concurrent treatment of WP, however, in case of co-treatment of WP with PMA and DNCB, it was found that the secretion amount of TNF-${\alpha}$ decreased. Conclusions : In this study, the WP extracting substance was confirmed that it had an influence on expression patterns of cytokine genes according to the actions of a variety kinds of immune reaction inductive substances treated on the THP-1 cells. Especially, WP co-treatment with PMA and DNCB was suppressed the expression of inflammatory cytokines, such as IL-$1{\alpha}$, IFN-${\gamma}$ and TNF-${\alpha}$.

• Applied Microscopy
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• 제29권2호
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• pp.189-193
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• 1999

장기간 투여된 불소가 흰쥐태아의 법랑모세포(ameloblast)에 미치는 영향을 알아보고자 임신한 흰쥐에 100ppm, 200ppm 및 300ppm의 불소가 함유된 음용수를 3주간 투여하였으며, 대조군에는 불소가 함유되지 않은 증류수를 섭취시켰다. 생후 11일이 경과된 어린 흰쥐를 희생하여 하악절치를 발치한 후, 법랑모세포의 미세구조적 변화를 관찰하였다. 법랑모세포의 생활주기인 전분비대, 분비대, 성숙대에서 법랑모세포를 광학 및 투과전자현미경으로 관찰한 결과, 실험군에서는 각 대의 법랑모세포에서 형태 및 구조적인 변형을 나타내었다. 즉, 미토콘드리아 기질 내에서 라멜라 형태의 동심원상의 구조가 평륜됨과 함께 조면소포체가 공포화되고 막성계의 유실로 붕괴가 관찰되었다. 특히 고농도 불소투여군에서는 법랑모세포사이에 세포막이 유실된 세포들이 관찰되었다. 따라서, 임신중인 흰쥐에 투여된 불소는 흰쥐태아의 치아발육과정에서 특히, 법랑질 형성에 관여하는 법랑모세포에 영향을 미쳐 전환주기에 변화를 주었고, 법랑모 세포의 미세구조적 및 형태적 변화를 야기하였다.

• Radiation Oncology Journal
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• 제9권1호
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• pp.117-122
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• 1991

흉폐부 또는 흉벽에서 발생하는 악성소세포 종양군인 Ewings sarcoma, 횡문근육종, Askin tumor, 신경아세포종, PNET, 임파종 등은 현미경학적 소견만으로는 감별하기 어렵다. 그러나 최근에는 조직세포화학적검사, 면역세포화학적검사, 세포배양, 세포유전학적 검사등의 도움으로 상기한 악성소세포 종양군들이 모두가 같은 계통의 primitive pluripotent cells로 부터 분화되어 발병되는 것으로 확인되었다. 치료는 외과적 절제술, 방사선치료, 항암요법 등이 시도되고 있으나 예후는 재발 과원격전이로 인하여 불량한 것으로 보고되고 있다. 본 저자들은 본원에서 치료한 예를 보고하면서 흉폐부에서 발생하는 악성소세포 종양군의 조직발생과 감별진단에 대하여 논하고자 한다.

• Restorative Dentistry and Endodontics
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• 제25권4호
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• pp.606-618
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• 2000

Dental pulp infection is most commonly caused by extensive dental caries, and some bacterial species invade root canals; bacterial components and products are thought to be associated with the pathogenesis of periapical periodontitis. A principle driving force behind pulpal disease response appears to lie in the host immune system's to bacteria and their products. We examined the production of interleukin $1{\beta}$ (IL-$1{\beta}$) and tumor necrosis factor ${\alpha}$(TNF-${\alpha}$) from human peripheral mononuclear cells, lymphocytes and monocytes stimulated by heat-killed Acitnobacillus actinomycetemcomitans (ATCC 29523), Porphyromonas gingivalis (ATCC 33277) and Prevotella intermedia (ATCC 25611), and also by their sonicated bacterial extracts (SBE), respectively. The effects of three strains of heat-killed bacteria and their SBEs on the morphology of cultured blood cell lines HL-60 (KCLB 10240) and J774A.1 (KCLB 40067) were observed under the inverted microscope. Ultrastructural changes of J774A.1 exposed to heat-killed P. intermedia and its SBE were investigated using transmission electron microscopy. Production of IL-$1{\beta}$ was reduced in human peripheral mononuclear cells after stimulation by sonic bacterial extracts of A. actinomycetemcomitans, P. gingivalis, and P. intermedia. Heat-killed and sonic extract of P. gingivalis inhibited the production of TNF-${\alpha}$ in peripheral mononuclear cells. Production of TNF-${\alpha}$ was inhibited in peripheral monocytes after stimulation by sonic extracts of A. actinomycetemcomitans, P. gingivalis, and P. intermedia. HL-60 and J 774A.1 cells showed granular degeneration after treatment with heat-killed and sonic extracts of A. actinomycetemcomitans, P. gingivalis, and P. intermedia Chromatin margination and shrinkage were observed in 774A.1 treated with heat-killed P. intermedia. Cell wall structure and organelles were destroyed and vacuoles were formed in cytoplasm in J774A.1 treated with P. intermedia sonic extract. These results suggest that A actinomycetemcomitans, P gingivalis and P intermedia may have an important role in the formation and progression of pulpal diseases via both modulation of production of IL-$1{\beta}$ and TNF-${\alpha}$ from blood mononuclear cells and cytopathic effects.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제58권2호
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• pp.173-179
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• 2020

Leishmaniasis is a prevalent cause of death and animal morbidity in underdeveloped countries of endemic area. However, there is few vaccine and effective drugs. Antimicrobial peptides are involved in the innate immune response in many organisms and are being developed as novel drugs against parasitic infections. In the present study, we synthesized a 5-amino acid peptide REDLK, which mutated the C-terminus of Pseudomonas exotoxin, to identify its effect on the Leishmania tarentolae. Promastigotes were incubated with different concentration of REDLK peptide, and the viability of parasite was assessed using MTT and Trypan blue dye. Morphologic damage of Leishmania was analyzed by light and electron microscopy. Cellular apoptosis was observed using the annexin V-FITC/PI apoptosis detection kit, mitochondrial membrane potential assay kit and flow cytometry. Our results showed that Leishmania tarentolae was susceptible to REDLK in a dose-dependent manner, disrupt the surface membrane integrity and caused parasite apoptosis. In our study, we demonstrated the leishmanicidal activity of an antimicrobial peptide REDLK from Pseudomonas aeruginosa against Leishmania tarentolae in vitro and present a foundation for further research of anti-leishmanial drugs.

• Safety and Health at Work
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• 제13권1호
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• pp.9-16
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• 2022

Background: The global shift toward greener societies demands new technologies and work operations in the waste-management sector. However, progressive industrial methods do not necessarily consider workers' health. This study characterized workers' exposure to bioaerosols and investigated the bioaerosols' potential to engage the immune system in vitro. Methods: Full shift personal aerosol sampling was conducted over three consecutive days. Dust load was analyzed by gravimetry, fungal and actinobacterial spores were analyzed by scanning electron microscopy, and endotoxin by limulus amebocyte lysate (LAL) assay. In vitro exposure of HEK cells to airborne dust samples was used to investigate the potential of inducing an inflammatory reaction. Results: The total dust exposure level exceeded the recommended occupational exposure limit (OEL) of 5.0 mg/m³ in 3 out of 15 samples. The inhalable endotoxin level exceeded the recommended exposure level by a 7-fold, whereas the fungal spore level exceeded the recommended exposure level by an 11-fold. Actinobacterial spores were identified in 8 out of 14 samples. In vitro experiments revealed significant TLR2 activation in 9 out of 14 samples vs. significant TLR4 activation in all samples. Conclusion: The present study showed that the dust samples contained potentially health-impairing endotoxin, fungi, and actinobacterial levels. Furthermore, the sampled dust contained microbial components capable of inducing TLR activation and thus have the potential to evoke an inflammatory response in exposed individuals.

• Applied Microscopy
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• 제30권1호
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• pp.101-111
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• 2000

기생충에서 세포 표면에 존재하는 당단백 말단 Glc-NAc(N-acetylglucosa-mine)와 NeuNAc (N-acetylneuraminic acid)가 숙주 면역계를 인식하고 영양물질 흡수와 막 투과성에 중요한 역할을 하는 것으로 알려졌다. 이들 당단백 말단 GlcNAc와 NeuNAc의 폐흡충 피낭유충과 유약성충, 성충의 충체 조직세포에 분포를 확인하기 위하여 WGA 황금입자 복합체를 반응시켰다. WGA 황금입자 복합체에 반응시킨 폐흡충 발육 단계별 조직을 전자현미경으로 관찰한 결과 폐흡충 피낭유충의 표피합포체에는 황금입자가 고밀도로 표지된 것이 관찰되어 폐흡충 피낭유충 표피세포질에 lectin수용체들이 고밀도로 분포하는 것으로 관찰되었다. 유약성충과 성충의 맹관 막구조물에 WGA 황금입자가 고밀도로 표지되어 맹관의 상피세포 막 구조물에 WGA 수용체들이 고밀도로 분포하는 것으로 확인되었다. 폐흡충 피낭유충과 유약성충 그리고 성충의 배설관 상피의 막구조물에 WGA 황금입자가 표지되어 배설관상피의 막구조물에 WGA 수용체가 분포하는 것으로 확인되었다. 따라서 피낭유충의 표피합포체와 표피세포의 세포질에 분포하는 WGA 수용체인 GlcNAc와 NeuNAc는 숙주의 면역계와 세포인식에 관여하며 유약성충과 성충은 표피세포의 GlcNAc와 NeuNAc는 소멸되고 맹관과 배설관 상피에 GlcNAc와 NeuNAc가 분포하여 영양물질 흡수와 막수송에 의한 재흡수작용이 활발한 것이 확인되었다.

• Applied Microscopy
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• 제39권2호
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• pp.167-173
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• 2009

간모세선충(Capillaria hepatica)은 설치류와 인간을 포함한 포유류의 간에 모세선충증(capillariasis)을 일으키는 기생선충이다. 성충은 모세관과 같이 대단히 가늘고 길며, 충체의 앞부분에는 stichosome (염주체) 및 bacillary band 등의 구조가 있다. 간모세선충은 설치류를 주숙주로 하며, 여러 지역에서 채집된 야생 설치류에 거의 100% 감염률이 보고되었다. 자연계에 존재하는 감염형 자충포장란은 물과 음식에 포함되어 포유류에 감염된다. 감염된 성충은 충란을 배출한 뒤 간 조직 내에서 사멸하고, 죽은 충체와 충란은 간 조직에서 숙주 면역반응을 유발시킨다. 본 연구에서는 집쥐로부터 충란을 수집하여 마우스에 감염형 자충포장란을 감염시키고. 감염 7주 후에 간 조직에 포함되어 있는 성충을 손상되지 않게 분리하였다. 분리된 간모세선충은 주사전자현미경과 투과전자현미경을 이용하여 충체 표피의 미세구조를 관찰하였다. 분리된 간모세선충은 길이가 약 99mm로 확인되었으며, 충체의 표피에는 cuticle, bacillary band 등의 구조물이 관찰되었다. Bacillary band에는 여러 형태의 pore가 분포하였고, pore는 cuticle을 가로질러 존재하며, cap material의 존재 유무에 따라 bacillary pore의 형태적 차이가 나타났다. 간모세선충은 간 조직내에서 성장하는 특성을 가지고 있으므로 손상되지 않도록 성충을 분리해 내기 어렵고, 이에 따라 충체 외부형태에 대한 연구가 용이하지 않았던 것으로 생각한다. 이러한 간모세선충의 성충을 손상없이 분리하고, 표피의 미세구조를 확인함으로써 아직까지 연구가 이루어지지 않은 간모세선충을 포함한 선충류의 형태에 관한 연구에 중요한 기초자료가 될 것으로 생각한다.