In order to investigate the possible application of immobilized yeast cells in sparkling wine production instead of riddling puns by the traditional method, fermentation characteristics were tested during the sparkling wine fermentation in the bottle using immobilized yeast cells with alginate. The rates of sugar consumption and alcohol production were faster with free cells than those with immobilized cells during the fermentation. The higher concentration of yeast cells and the lower concentration of alginate in the cell immobilization resulted in the faster sugar consumption and alcohol production. It also resulted in the increase of yeast cell concentration released from immobilized beads during the fermentation. However, no differences were shown in the contents of alcohol, residual sugar and CO2 pressure after fermentation. In case concentration of yeast cells released from immobilized beads during bottle fermentation, the higher concentration of alginate had and the lower had.
Saccharomyces cerevisiae was immobilized by incubating iron oxides with calcium alginate, and by polyacrylamide entrapment to use repeatedly for the conversion of glucose to ethanol. Magnetic and non-magnetic immobilized yeast and polyacrylamide immobilized yeast were compared with the native yeast a batch-fermentation of ethanol from glucose. Three kinds of immobilized yeast tended almost identically, having ethanol productivity as well as the final yield about the same to what was found for the native yeast. The long-term operational stability of three kinds of immobilized yeast were significant difference according as immobilized yeast activation or non-activation before ethanol fermentation. In the non-activation they lost their activity of fermentation rapidly in the beginning stage an slower at a later stage. On the other hand, in the activation with nutrient media, their activities were increased to some extent and stable in the later stage. The cell count of three kinds of immobilized yeast after activiation by incubating nutrient media, increased by a factor of about 45 to 48, whereas the fermenting capacity increased by a factor of 174 to 178. In the prearation of immobilized biocatalysts, magnetic matter does not seem to have any adverse affect on the properties of the microorganism. The immobilized biocatalysts by utilizing magnetic matter have some advantages, especially in application of viscous media or insoluble particle-containing media, for this work was linked with microbial utilization of environmental wastes and elimination of envirnmental pollutant.
The effects of media composition on citric acid fermentation using surface immobilized Saccharomycopsis lipolytica were studied. The use of the standard medium for these organisms resulted in rapid decrease of citric acid production and a transformation of immobilized cell morphologies from a yeast-type to a mycelium-type. When the standard medium was enriched with vitamins, trace minerals, a growth factor and ammonium to form a Vigorous Stationary Phase (VSP) fermentation type medium, relatively stable citric acid production (10 mg/lㆍh) was obtained. Using the VSP type medium, the surface immobilized cells also retained their yeast-type form.
We have developed an efficient immobilized cell separator for continuous operation of immobilized fungal cell cultures, and applied this separator to actual fermentation process for the production of cyclosporin A (CyA), a powerful immunosuppressant. In the experiments employing highly viscous polymer (carboxymethyl cellulose) solution, the decantor showed good separating performances at high solution viscosites and fast dilution rates. Air duct and cylindrical separator installed inside the decantor turned out to play key roles for the efficient separation of the immobilized cells. By installing the decantor in an immobilized perfusion reactor system (IPRS), continuous immobilized culture was stably carried out even at high dilution rate for a long period, leading to high productivities of free cells and CyA. Almost no immobilized biomass existed in effuluent stream of the IPRS, demonstrating the effectiveness of the decan- tor system for a long-term continuous fermentation. It was noteworthy that we could obtain these results despite of the unfavorable fermentation conditions, i.e., reduced density of the biosupports caused by overgrowth of cells inside the bead particles and existence of high density of suspended fungal cells (10g/l) in the fermentation broth.
To enhance the hyperproductive and low energy-consuming ethanol fermentation rate, the thermotolerant yeast S. cerevisiae RA-74-2 cells were immobilized. An efficient immobilization condition was proved to be $1.5{\%}$ (w/v) alginate solution, neutral pH and 20 h activation of beads. The fermentation characteristics and stability at various temperatures were examined as compared with free S. cerevisiae RA-74-2 cells. The immobilized cells had excellent fermentation rate at the range of pH 3-7 at 30-$42^{\circ}C$ in 15-$20{\%}$ glucose media. When the seed volume was adjusted to 0.12 (v/v) (6ml bead/50 ml medium), $11{\%}$ (w/v) ethanol was produced during the first 34 hand $12.15{\%}$ (w/v) ethanol [$95{\%}$ (w/v) of theoretical yield] during the first 60 h in $25{\%}$ glucose medium. In repetitive fermentation using a 2 litre fermentor, 5.79-$7.27{\%}$ (w/v) ethanol [76-$95{\%}$ (w/v) of theoretical yield] was produced during the 40-55 h in $15{\%}$ glucose media. These data suggested the fact that alginate beads of thermotolerant S. cerevisiae RA-74-2 cells would contribute to economic and hyperproductive ethanol fermentation at high temperature.
Acremonium chrysogenum was immobilized in ionotropic gel beads to develop semi-continuous production of cephalosporin C (CPC). Barium alginate beads were more stable than calcium alginate or strontium alginate beads in chemically defined media. The gel stability of Ba-alginate was further increased by cross-linking with polyethyleneimine (PEI). The presence of carboxymethyl cellulose inside Ba-alginate beads did not reduce mass transfer resistance. Ba-alginate microbeads that had little diffusion limitation increased CPC production rate 1.6 fold higher than that of normal beads. CPC fermentation with immobilized cells in Ba-alginate microbeads was performed continuously for 40 days by way of repeated fed-batch operations. Mathematical modeling was developed to describe the repeated fed-batch fermentation system. Results of the computer simulation agreed well with the experimental data, which made it possible to predict an optimal feeding rate that could maximize total CPC productions.
Yeast cells of a fusant strain constructed by protoplast fusion of Saccharomyces cerevisiae and Kluyveromyces frugilis were immobilized on calcium alginate beads. The increment of the ethanol tolerance of this strain to 8.0%, when compared with the parent K, fragilis, was confirmed. Based on the results from jar fermentation, a packed-bed reactor of theh immobilized yeast cells was operated. The optimal performance of the immobilized yeast reactor for ethanol production was achieved when supplying 10% lactose (suplemented 1.0% yeast extract) at a temperature of 30.deg.C. The maximal ethanol productivity was obtained as 13.3 g/I/hr at a dilution rate of $0.76 hr^{-1}$.
The aim of this study was to find out the rapid fermentation of soy sauce from koji hydrolyzate using column type reactor packed with immobilized yeast cells. Each immobilized cell of Zygosaccharomyces rouxii BH-90 and Candida versatilis BH-91 in the packed column type reactor produced 2.8% ethyl alcohol and 18mg/l 4-ethylguaiacol over 96 hours under the optimal condition. Continuous fermentation was performed by immobilized Z. rouxii BH-90 packed in column type reactor. Immobilized Z. rouxii BH-90 produced 2.30~2.85% ethyl alcohol during 30 days, and decreased gradually from 40 days to 80 days. Also C. versatilis BH-91 produced 4-ethylguaiacol at the constant rate of 16~18mg/l and decreased gradually after 40 days. Final product of soy sauce contained 2.8% ethyl alcohol and 18mg/l 4-ethylguaiacol. However, amino acid compositions of final products were consisted of predominantly glutamic acid, leucine, arginine, aspartic acid, lysine and valine, which were more than 50% of total amino acid.
The immobilized cell tubular tormentor was prepared by wood chips or alginate gel. Investigations of characterization of the performance of ethanol fermentation in the immobilized cell tubular tormentor were undertaken and the results were compared with those of other tormentors. The immobilized cell tormentor packed with alginate gel showed much higher ethanol productivity than that with wood chip. It was concluded that the immobilized cell tubular tormentor packed with alginate gel might offer better perspectives for continuous ethanol production than that with wood chip.
- Ethanol production by calcium alginate-immobilized baker's yeast was studied in the continuous shaked-flask reactor (CSFR) using glucose medium as a feed. Immobilized cells were stable at 30~$37^{\circ}C$ and pH 4~8. Fermentation characteristics of immobilized baker's yeast were examined changing the initial glucose concentration employed were 50, 100 and 150 g/l, respectively. It was investigated that the influent glucose concentration and the dilution rate have an influence on the ethanol fermentation characteristics at steady state in continuous culture of immobilized baker's yeast. The optimum conditions for high ethanol productivity and low residual glucose output in ethanol prodution were shown to be 0.2 h ' for the dilution rate and 150 g/l for the influent glucose concentration. The maximum ethanol productivity, ethanol yield, specific growth rate and glucose conversion rate were around 7.12 g/$l\cdot h$, 0.23, 0.366 g/$l\cdot h$ and 78.43, respectively.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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