In this study the anaerobic degradation of nitrate by in GFM (gel and foam matrix) and bead gel immobilized Paracoccus denitrificans DSM 65 in continous culture was conducted. A novel GFM immobilization system was developed in order to improve conventional system (bead). With increasing nitrate concentration in water, the nitrate reduction rate was increased. The observed maximum denitrification rate by in GFM immobilized cells was 177 mg/L h in buffered water, while that was 33 mg/L h in tap water. In comparison with bead system the reduction activity by GFM system showed $1.2{\sim}2.1$ times better. The denitrification activity was not changed after 16 days storage at $5^{\circ}C$ and also showed better activity than that of free cells or even bead immobilized cells.
The immobilization of Lactobacillus bulgaricus was investigated by various method, e.g. by use of polyacrylamide gel and Al-, Ca-, Fe- or Mg-alginate beads, and the most active immobilized cells were obtained by entrapment in a Ca-alginate beads. These immobilized microbial cells, when introduced into 4.5% lactose solution and whey solution showed maximum relative activity of 28% or lactose solution and 18% for whey solution as measured against the native microbial reference standard (100).
When the cells of yeast K35 were immobilized in Ca-alginate gel, cell concentration and viability decreased as alginate concentration increased. Considering the results, 2% (w/v) Ca-alginate concentration would be suitable. Among various concentrations of additives and cross-lin-king agent, the addition of 1.67% (w/v) of bentonite together with 0.33% (v/v) of glutaraldehyde (ABG bead) resulted in the highest ethanol production of 1.8%(w/v), using YPD medium containing 2% glucose. ABG bead seemed to be more resistant to phosphate ion than Ca-alginate bead. 0.33%(w/v) of phosphate was a proper concentration for the ethanol production by ABG bead. Scanning electron microscopic observation depicted that the immobilized cells on the bead surface were coated by alginate gel and that the cells in the internal bead were cross-linked with alginate matrix. When repeated-batch culture was performed with ABG bead for 40 days in a packed-bed reactor, ethanol concentration of about 90~110 g/l-gel was maintained. Cell viability was maintained around 70%, and outgrowing cell concentration was below 6.3% of total cell concentration. Consequently, the results showed that ABG head was a potential carrier for continuous production of ethanol compared to conventional Ca-alginate bead.
For the treatment of poorly biodegradable polyvinyl alcohol(PVA) in dye-processing wastewater, immobilized microbial beads were prepared by uslng agar-acrylamide method. PVA removal efficiency for the synthetic wastewater was 85% at the PVA volume loading rate of $3.1g/\ell$.day. In case of real desizing wastewater, PVA removal efficiency was 81.3% at the PVA volume loading rate of $3.25g/\ell$.day. In observation of cross section of immobilized bead passed 5 months with diameter of 2.4mm, the growth of cell was limited by the resistance of substrate and oxygen transfer for the inners region of more than 48% of bead radius from the surface. It was estimated that 70% of total removed PVA was degraded by the immobilized cells in the continuous immobilized reactor. Substrate utilization rate in the suspended reactor was decreased with increasing dilution rates above 0.083 hr-1, but that in the immobilized reactor was increased with increasing dilution rates up to 0.125hr-1. The substrate removal efficiency of immobilized reactor was much superior to that of suspended reactor with increasing dilution rates. Saturation constant of substrate utilization rate equation, Ks was $6.6 g PVA/\ell$, and maximum specific substrate utilization. k was 0.175g PVA/g cell.hr
The effects of ammonium ion on cell growth kinetics, monoclonal antibody productivity, and cell metabolism of hybridoma cells were investigated. The mouse-mouse hybridoma cell line VlIIH-8 producing mouse IgG2a was used as a model system. Ammonium ion showed an inhibitory effect on cell growth and monoclonal antibody production. New immobilized adsorbents were developed for the reduction of the inhibitory effect of ammonium ion. The ammonium ion selective zeolite, Phillipsite-Gismondine was entrapped in calcium alginate bead or in dialysis membrane and applied to the hybridoma cell culture system for the in situ removal of ammonium ion from culture media. The effects of ammonium the both serum supplemented and serum free media on the cell growth were studied by applying immobilized adsorbents of calcium alginate bead type. The results demonstrated a substantial enhancement in cell growth. Applying immobilized adsorbents of dialysis membrane type to serum supplemented media also resulted in the stimulation of cell growth, cell viability and monoclonal antibody production.
Immobilized nitrifier bead in airlift bioreactor were used to remove high levels of ammonia nitrogen from synthetic wastewater. Polyvinylalcohol(PVA) bead for immmobilization of nitrifier consortium were prepared by PVA-boric acid method by varying concentration of PVA and nitrifier consortium. By determining viscosity, sphercity and tailing, the characteristics of prepared beads were investigated and the continous immobilization process was developed. Synthetic wastewater containg 25g/$\textrm{m}^3$ of ammonia nitrogen could be treated within 0.5 hour and the highest removal rate of ammonia nitrogen was 934.2g/$\textrm{m}^3{\cdot}$ day.
Several enzyme immobilization methods has been compared for immobilization of pepsin. Carboxymethyl cellulose and diethylaminoethyl cellulose were activated with Hcl and with NaOH, and were used for immobilization of pepsin. Sepharose-4B was activated cyanogen bromide, and was used for immobilization of pepsin. Porous glass beads were derivatized with 3-aminopropyitrlethoxysilane and with succinicanhydride, and were used for immobilization of pepsin. The results abtained were summarized as follow, 1. 10 mg/gr. dry bead and 15mg/gr. dry bead of pepsin were absorbed to CM-cellulose and DEAE-cellulose, 20 mg/gr. dry bead and 27 mg/gr. dry bead were coupled to CM-cellulose and DEAE-cellulose with glutaraldehyde respectively. Enzyme yields were 22% and 24% of soluble pepsin. 2. 16 mg/gr. dry bead of pepsin was attached to cyanogen bromide activated sepharose-4B, 19mg/gr. dry bead was cross linked to the activated bead with glutaraldehyde. Immobilized enzyme activity was 23% of soluble pepsin. 3. 40 mg/gr. dry bead of pepsin was conjugated to the derivatized glass beads. Immobilized enzyme activity was 45% of soluble pepsin.
${\beta}$-Galactosidase was immobilized on chitosan bead by covalent bonding using glutaraldehyde. The characteristics of the immobilized enzyme were investigated. Maximum immobilization yield of 75% was obtained on chitosan bead. Optimum pH and temperature for the immobilized enzyme was 7.0 and $50^{\circ}C$, respectively. The immobilized enzyme showed a broader range of pH and temperature compared to a free one. A mathematical model for the operation of the immobilized enzyme in a packed-bed reactor was established and solved numerically. Under different inlet lactose concentrations and feed flow rate conditions, lactose conversion was measured in a packed-bed reactor. The experimental results of continuous operation in a packed-bed reactor were compared to theoretic results using Michaelis-Menten kinetics with competitive product inhibition and external mass transfer resistance. The model predicted the experimental data with errors less than 5%. Process optimization of continuous operation in a packed-bed reactor was also conducted. In a recirculation packed-bed operation, conversion of lactose was 97% in 3 hours. In a continuous packed-bed operation, the effect of flow rate and initial lactose concentration was investigated. Increasing flow rates and initial lactose concentration decreased the conversion of substrate.
A strain of Saccharomyces cerevisiae BY-366 was isolated to produce a strong sucrose-hydrolyzing enzyme. After entrapment of yeast cell invertase with alginate, enzymatic properties of immobilized cells were investigated. The results are as follows. 1. The optimum pH of invertase in immobilized cells and non- immobilized cells was 6.0 and 5.0, and pH stability of invertase in immobilized cells and non- immobilized cells was 6.0 and 5.0, respectively. 2 Activation energy of immobilized cells was 4.7 kcal/mol. 3 The immobilized preparation exhibited high resistance to heat and urea Induced denaturation. 4, The bead size less than 2 mm in diameter was desirable. 5. In spite of repeated use, the enzyme activity of immobilized cells was inhibited slightly in batch reaction, and a small column of the immobilized preparation could hydrolyze relatively high concentration of sucrose almost quantitatively to more than 6 days.
The behavior of total organic carbon (TOC) and phosphate were observed for 15 days with immobilized activated sludge using polyacrylamide (PAA) by sequencing batch reactor (SBR). In the preparation of immobilized sludge by PAA, it was found that suitable acrylamide concentration for actual wastewater treatment was to be 15% through the batch test. When SBR system was operated in the repeated aerobic and anaerobic conditions, TOC removal efficiency was 92%. The uptake rate of phosphate was increased from 1.78 mg-P/g cell/hr on the 5th day of acclimation to 2.5 mg-P/g cell/hr on the 15th day of acclimation. And the total phosphorus content in PAA bead was increased from 40 mg-P/g cell on the 1st day of operation to 55 mg-P/g cell on the 15th day of operation. From this study, lowering the volume of aeration tank was possible when PAA bead was used in wastewater treatment and long operation was also possible without the settler.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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