In this study, physio-chemical, mechanical, and sensory characteristics of Tofu containing 0, 0.5, 1.0, and 2.0% Adenophora remotiflora powder were examined. In addition, we examined the potential of utilizing Adenophora remotiflora powder as a functional food material by estimating total phenol contents, electron-donating abilities, and hydroxyl radical scavenging activities of the hot water and ethanol extracts of Adenophora remotiflora powder in the range from 0~2.0%. The total phenol content of the ethanol extracts of Adenophora remotiflora powder was $487.93{\mu}g/mL$ while the that of the water extract of Adenophora remotiflora powder was $403.70{\mu}/mL$. The electron-donating abilities of the ethanol and water extracts of Adenophora remotiflora powder were 75.37 and 86.10%, respectively. The hydroxyl radical scavenging activities of the ethanol and water extracts of Adenophora remotiflora powder were 65.50 and 66.22%, respectively. We also evaluated the quality characteristics of Tofu containing Adenophora remotiflora powder. In the case of color values, as the level of Adenophora remotiflora powder increased, the values of L (lightness) and a (redness) decreased, whereas that of b (yellowness) increased. In the case of mechanical properties, as the level of Adenophora remotiflora powder increased, hardness, gumminess, and chewiness values increased (p<0.05), whereas springiness and cohesiveness values decreased (p<0.05). In the case of sensory evaluation, MPT1.0 scored significantly higher in color, flavor, tenderness, texture, and overall quality. To sum up, Tofu containing 1% Adenophora remotiflora powder showed the highest overall preference.
Cisplatin treatment increases the excretion of inorganic phosphate in vivo. However, the mechanism by which cisplatin reduces phosphate uptake through renal proximal tubular cells has not yet been elucidated. We examined the effect of cisplatin on $Na^+$-dependent phosphate uptake in opossum kidney (OK) cells, an established proximal tubular cell line. Cells were exposed to cisplatin for an appropriate time period and phosphate uptake was measured using $[^{32}P]$-phosphate. Changes in the number of phosphate transporter in membranes were evaluated by kinetic analysis, $[^{14}C]$phosphonoformic acid binding, and Western blot analysis. Cisplatin inhibited phosphate uptake in a time- and dose-dependent manner, and also the $Na^+$-dependent uptake without altering $Na^+$-independent uptake. The cisplatin inhibition was not affected by the hydrogen peroxide scavenger catalase, but completely prevented by the hydroxyl radical scavenger dimethylthiourea. Antioxidants were ineffective in preventing the cisplatin-induced inhibition of phosphate uptake. Kinetic analysis indicated that cisplatin decreased Vmax of $Na^+$-dependent phosphate uptake without any change in the Km value. $Na^+$-dependent phosphonoformic acid binding was decreased by cisplatin treatment. Western blot analysis showed that cisplatin caused degradation of $Na^+$-dependent phosphate transporter protein. Taken together, these data suggest that cisplatin inhibits phosphate transport in renal proximal tubular cells through the reduction in the number of functional phosphate transport units. Such effects of cisplatin are mediated by production of hydroxyl radicals.
Kim, Ki-Hwa;Lee, Chang Woo;Dangi, Bikash;Park, Sun-Ha;Park, Hyun;Oh, Tae-Jin;Lee, Jun Hyuck
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제27권8호
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pp.1472-1482
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2017
Bacterial cytochrome P450 (CYP) steroid hydroxylases are effectively useful in the pharmaceutical industry for introducing hydroxyl groups to a wide range of steroids. We found a putative CYP steroid hydroxylase (BaCYP106A2) from the bacterium Bacillus sp. PAMC 23377 isolated from Kara Sea of the Arctic Ocean, showing 94% sequence similarity with BmCYP106A2 (Bacillus megaterium ATCC 13368). In this study, soluble BaCYP106A2 was overexpressed to evaluate its substrate-binding activity. The substrate affinity ($K_d$ value) to 4-androstenedione was $387{\pm}37{\mu}M$. Moreover, the crystal structure of BaCYP106A2 was determined at $2.7{\AA}$ resolution. Structural analysis suggested that the ${\alpha}8-{\alpha}9$ loop region of BaCYP106A2 is intrinsically mobile and might be important for initial ligand binding. The hydroxyl activity of BaCYP106A2 was identified using in vitro enzyme assays. Its activity was confirmed with two kinds of steroid substrates, 4-androstenedione and nandrolone, using chromatography and mass spectrometry methods. The main products were mono-hydroxylated compounds with high conversion yields. This is the second study on the structure of CYP106A steroid hydroxylases, and should contribute new insight into the interactions of bacterial CYP106A with steroid substrates, providing baseline data for studying the CYP106A steroid hydroxylase from the structural and enzymatic perspectives.
Novel $N_2O_2$ tetradentate ligands, H-3BPD and H-2BPD were synthesized. Hydrochloric acid salts of Br-3BPD, Cl-3BPD, Br-2BPD and Cl-2BPD having Br and Cl substituents at the $para$ position of the phenol hydroxyl group, were synthesized. The ligands were characterized by C. H. N atomic analysis, $^1H$ NMR, $^{13}C$ NMR, UV-visible, and mass spectra. The proton dissociation constants ($logK_n{^H}$) of the phenol hydroxyl group and secondary amine of the synthesized $N_2O_2$ ligands were shown by four step wise values. The orders of the calculated overall proton dissociation constants ($log{\beta}_p$) were Br-3BPD < Cl-3BPD < H-3BPD in case of 3BPD and Br-2BPD < Cl-2BPD < H-2BPD in case of 2BPD respectively. The order agreed well with that of $para$ Hammett substituent constants(${\delta}_p$). The stability constants($logK_{ML}$) of the complexes between the synthesized ligands and transition metal(II) ions agreed with the order of $log{\beta}_p$ of the ligands. The order of the $logK_{ML}$ value of the each transition metal (II) ion was Co(II) < Ni(II) < Cu(II) > Zn(II) > Cd(II) > Pb(II), which agreed well with that of Iriving-Williams series.
This study was designed to investigate the protective effect of Sasa borealis leaf extract on 2,2'-azobis(2-amidinopropane) dihydrochloride (AAPH)-induced oxidative stress in LLC-PK1 cells (porcine kidney epithelial cells). The butanol fraction from Sasa borealis leaf extract (SBBF) was used in this study because it possessed strong antioxidant activity and high yield among fractions. Exposure of LLC-PK1 cells to 1 mM AAPH for 24 hr resulted in a significant decrease in cell viability, but SBBF treatment protected LLC-PK1 cells from AAPH-induced cell damage in a dose dependant manner. To determine the protective action of SBBF against AAPH-induced damage of LLC-PK1 cells, we measured the effects of SBBF on lipid peroxidation and antioxidant enzymes activities of AAPH treated cells as well as scavenging activities on superoxide anion radical and hydroxyl radical. SBBF had a protective effect against the AAPH-induced LLC-PK1 cellular damage and decreased lipid peroxidation and increased activities of antioxidant enzymes such as superoxide dismutase and glutathione peroxidase. Furthermore, SBBF showed strong scavenging activity against superoxide anion radical. The $IC_{50}$ value of SBBF was $28.45{\pm}1.28\;{\mu}g/mL$ for superoxide anion radical scavenging activity. The SBBF also had high hydroxyl radical scavenging activity ($IC_{50}=31.09{\pm}3.08\;{\mu}g/mL$). These results indicate that SBBF protects AAPH-induced LLC-PK1 cells damage by inhibiting lipid peroxidation, increasing antioxidant enzyme activities and scavenging free radicals.
This study was designed to investigate the protective effect of fucoidan against AAPH-induced oxidative stress in LLC-PK1 cells (porcine kidney epithelial cells). Oxidative stress was induced by exposing of LLC-PK1 cells to the 1 mM 2,2'-azobis(2-amidino propane) dihydrochloride (AAPH) for 24 hr. Exposure of LLC-PK1 cells to 1 mM AAPH for 24 hr resulted in a significant (p<0.05) decrease in cell viability, but fucoidan treatment protected LLC-PK1 cells from AAPH-induced cell damage in a dose dependant manner. To investigate the protective action of fucoidan against AAPH-induced damage of LLC-PK1 cells, we measured the effects of fucoidan on lipid peroxidation and antioxidant enzymes activities of AAPH treated cells as well as scavenging activities on superoxide anion radical and hydroxyl radical. Fucoidan had protective effect against the AAPH-induced LLC-PK1 cellular damage and decreased lipid peroxidation and increased activities of antioxidant enzymes such as superoxide dismutase (SOD) and glutathione peroxidase (GSH-px). Furthermore, fucoidan showed strong scavenging activity against superoxide anion radical. The $IC_{50}$ value of fucoidan was $48.37{\pm}1.54\;{\mu}g/mL$ for superoxide anion radical scavenging activity. The fucoidan also had high hydroxyl radical scavenging activity ($IC_{50}=32.03\;{\mu}g/mL$). These results indicate that fucoidan protects against AAPH-induced LLC-PK1 cell damage by inhibiting lipid peroxidation, increasing antioxidant enzyme activities and scavenging offree radicals.
The free radical scavenging activities and the protective effects of Rhus javanica extracts against oxidative damage induced by reactive oxygen species (ROS) were investigated. n-Hexane, ethyl acetate and water fractions were prepared from a methanol extract. DPPH radical, superoxide anion and hydroxyl radical scavenging activities were estimated. Intracellular ROS formation was quantified using fluorescent probes, 2', 7'-dichlorofluorescin diacetate (DCFH-DA) for hydroxyl radical and dihydroethidium (DHE) for superoxide anion. The oxidative DNA damage was investigated by the comet assay in HepG$_2$ cells exposed either to $H_2O$$_2$ or to menadione. The highest $IC_{50}$/ values for DPPH radical scavenging activity was found in the ethyl acetate fraction with a value of 5.38 $\mu\textrm{g}$/mL. Cells pretreated with $\geq$ 1 $\mu\textrm{g}$/mL of the ethyl acetate extract had significantly increased cell viability compared to control cells, which were not pretreated with the extract. Intracellular ROS formation and DNA damage in HepG$_2$ cells, which were pretreated with the various concentrations of Rhus javanica ethyl acetate extract and then incubated either with $H_2O$$_2$ or with menadione, reduced in a dose-dependent manner. These findings suggest that Rhus javanica might have biologically active components which have strong protective effects against ROS induced oxidative damages to the biomolecules, such as cell membranes and DNA.
The purpose of this research is to evaluate the quality characteristics and antioxidant activities of Makjang, Korean traditional fermented soybean paste, which has recently been disappearing, for its preservation. Six kinds of commercial Makjang from three different regions (Kang-won-do, Choong-chung-do, and Kyung-sang-do) were analysed for approximate composition, salinity, pH, total phenol contents, and DPPH and hydroxyl radical scavenging activities. Moisture content of samples was 48.30-58.93% while, crude protein was 9.42-13.67%. Crude fat was 2.45-6.50%, crude fiber was 2.08-6.45%, and ash was 6.59-14.64%. Salinity content ranged from 5.63-12.68%, and pH ranged from 4.36-5.67. Soluble solid content and reducing sugar content of samples ranged from 38.3-54.5 Brix and 22.38-31.61% respectively. The lightness, redness, and yellowness of the Hunter color system of samples were 16.58-28.19, 7.8-16.51, and 8.35-14.21, respectively. Total polyphenol contents were 0.20-0.45 mg/ml. Antioxidant activities determined by DPPH radical scavenging activity and hydroxyl radical scavenging activity ($IC_{50}$ value) ranged from 45.07 mg/ml to 95.93 mg/ml and 69.81 mg/ml to 309.40 mg/ml, respectively. From these results, it was suggested that the manufacturing process of Makjang is needed to standardize for quality control, and for mass production.
Objectives : This study was performed to investigate the antioxidant activity of water extracts from Lycopus lucidus Turcz. ex Benth. leaves, stems and roots at the $100{\mu}g/m{\ell}$ concentration. Methods : The different part of Lycopus lucidus Turcz. ex Benth. extract was prepared using water. The antioxidant activities of polyphenol contents, total flavonoid contents, DPPH(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) free-radical scavenging activity, SOD like activity, hydroxyl radical, ABTS(2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid), $Fe^{2+}$ chelating, and nitrite scavenging activity. Results : The total polyphenol and total flavonoid content of leaves were the highest at $221.85{\mu}g/mg$ and $794.13{\mu}g/mg$, respectively. Electron donating ability was the 79.68% in the water extract from leaves. The ABTS radical scavenging activity of the hot extracts, leaves ${\gg}$ roots > stems was higher in the order. It was shown the highest at 94.53% in the water extract from leaves, which showed a value equal to 94.7% of ascorbic acid. The hydroxyl radical scavenging activity was the highest at 8.07% in the water extract from leaves. SOD like activity and $Fe^{2+}$chelating activity were leaves of 12.3% and 27%, respectively, which were much higher than those of any other parts. The nitrite scavenging ability of extracts was increased at pH 2.5, and those was the highest in leaves of 83.03%. Its were more than twice the 41.61% of BHT. Conclusion : The results suggest that Lycopus lucidus Turcz. ex Benth. can be used as nutraceutical foods and natural antioxidant.
The silver colloidal effects on the excited-state structure and intramolecular charge transfer (ICT) of p-N,N-dimethylaminobenzoic acid (DMABA) in aqueous cyclodextrin (CD) solutions have been investigated by UV-VIS absorption, steady-state and time-resolved fluorescence, and transient Raman spectroscopy. As the concentration of silver colloids increases, the ratio of the ICT emission to the normal emission (Ia /Ib) of DMABA in the aqueous $\alpha-CD$ solutions are greatly decreased while the Ia /Ib values in the aqueous B-CD solutions are significantly enhanced. It is also noteworthy that the ICT emission maxima are red-shifted by 15-40 nm upon addition of silver colloids, implying that DMABA encapsulated in $\alpha-CD$ or B-CD cavity is exposed to more polar environment. The transient resonance Raman spectra of DMABA in silver colloidal solutions demonstrate that DMABA in the excited-state is desorbed from silver colloidal surfaces as demonstrated by the disappearance of νs (CO2-)(1380 cm-1 ) with appearance of ν(C-OH)(1280 cm -1) band, respectively. Thus, in the aqueous B-CD solutions the carboxylic acid group of DMABA in the excited-state can be readily hydrogen-bonded with the secondary hydroxyl group of B-CD while in aqueous and $\alpha-CD$ solutions the carboxylic acid group of DMABA has the hydrogen-bonding interaction with water. Consequently, in the aqueous B-CD solutions the enhancement of the Ia /Ia value arises from the intermolecular hydrogen-bonding interaction between DMABA and the secondary hydroxyl group of B-CD as well as the lower polarity of the rim of the B-CD cavity compared to bulk water. This is also supported by the increase of the association constant for DMABA/ B-CD complex in the presence of silver colloids.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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