Coprinellus congregatus, known as an inky cap, is autolysed into ink soon after the maturation of the mushrooms. Electron microscopy was used to examine the ultrastructural changes associated with the autolysis as an initial step to understand the role of hydrolytic enzymes in this process. During the early stages of maturation of the mushrooms, most of cytoplasm of hymenial and subhymenial tissues seemed to be transported to the developing basidiospores. The depletion of cytoplasm within the tissues and the maturation of the basidiospores may initiate the degradation of the cell walls of the tissues. Both hymenial and subhymenial tissues seemed to degraded at the same time. This study suggested that the critical steps in the autolysis of mushrooms is not the degradation of the cytoplasm, but the degradation of the cell wall by hydrolytic enzymes such as chitinases.
Hyunok Doo;Hyeri Kim;Jin Ho Cho;Minho Song;Eun Sol Kim;Jae Hyoung Cho;Sheena Kim;Gi Beom Keum;Jinok Kwak;Sriniwas Pandey;Hyeun Bum Kim;Ju-Hoon Lee
Journal of Animal Science and Technology
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v.65
no.3
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pp.679-682
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2023
The Lactococcus taiwanensis strain K_LL004 was isolated from the gut of a grasshopper (Oxya chinensis sinuosa) collected from local farm in Korea. L. taiwanensis strain K_LL004 is the functional probiotic candidate with an ability to hydrolyse plant polysaccharides. The complete genome of the L. taiwanensis strain K_LL004 contains one circular chromosome (1,995,099 bp) with a guanine + cytosine (GC) content of 38.8%. Moreover, 1,929 Protein-coding sequence, 19 rRNA genes, and 62 tRNA genes were identified based on results of annotation. L. taiwanensis strain K_LL004 has a gene, which encodes hydrolytic enzymes such as beta-glucosidase and beta-xylosidase, that hydrolyzes plant polysaccharides.
Pseudomonas sp. strain DJ-12 is a bacterial isolate capable of degrading 4-chlorobiphenyl (4CBP) as a carbon and energy source. The catabolic degradation of 4CBP by the strain DJ-12 was studied along with the genetic organization of the genes responsible for the crucial steps of the catabolic degradation. The catabolic pathway was characterized as being conducted by consecutive reactions of the meta-cleavage of 4CBP, hydrolytic dechlorination of 4-chlorobenzoate (4CBA), hydroxylation of 4-hydroxybenzoate, and meta-cleavage of protocatechuate. The pcbC gene responsible for the meta-cleavage of 4CBP only showed a 30 to 40% homology in its deduced amino acid sequence compared to those of the corresponding genes from other strains. The amino acid sequence of 4CBA-CoA dechlorinase showed an 86% homology with that of Pseudomonas sp. CBS3, yet only a 50% homology with that of Arthrobacter spp. However, the fcb genes for the hydrolytic dechlorination of 4CBA in Pseudomonas sp. DJ-12 showed an uniquely different organization from those of CBS3 and other reported strains. Accordingly, these results indicate that strain DJ-12 can degrade 4CBA completely via meta-cleavage and hydrolytic dechlorination using enzymes that are uniquely different in their amino acid sequences from those of other bacterial strains with the same degradation activities.
This aims to review natural products transformed by mimic intestinal metabolisms with microorganisms and hydrolytic enzymes, which exhibit enforced biological activity, higher extraction yield and identification of active components. In the process, transformation to the smaller active compounds with enzymes and microbes mimics the pharmacological action of natural products by intestinal bacteria. In order to establish conditions for the fermentation and enzyme reaction, it is required to choose several natural products for biotransformation and investigate the optimal conditions for the fermentation or the enzyme reaction such as composition, temperature, pH, inoculum, and cultivation time. It is expected an increase of the internal absorption of the active materials without regard to the intestinal microbes or its ability through biosynthesis of the active materials by the microbes and enzymes. And this techniques can be applied to biotransformation of natural products such as sesaminol, resveratrol, 1-deoxy nojirimycin, naringenin, quercetin, and baicalin and to the metabolism study using the animal model.
The effects of the nonionic surfactant Tween 80 and a mixture of fibrolytic enzymes on total tract digestion, in situ disappearance (ISD) and ruminal fermentation characteristics of orchardgrass hay and barley grain were investigated in a 4${\times}$4 Latin square experiment with 4 non-lactating Holstein cows and 4 diets in 4 periods. Cows were offered a total mixed ration of 50% rolled barley grain and 50% orchardgrass hay treated with either 1) water (control), 2) 0.2% (vol/wt) Tween 80, 3) 0.2% (vol/wt) hydrolytic enzyme, or 4) 0.2% hydrolytic enzyme plus 0.2% Tween 80. Total tract digestibility coefficients of DM, nitrogen, NDF and ADF were not affected (p>0.05) by dietary treatment. Compared to the control, the rate of ISD of DM from orchardgrass hay was faster (p<0.05) in cows receiving diets treated with the enzyme alone or with enzyme plus Tween 80 (0.06/h vs. 0.076 and 0.069/h). The rate of digestion was lower (p<0.05) as compared to control when barley grain was treated with these additives. Ruminal fluid pH and concentrations of total VFA, acetate, isobutyrate and butyrate were not affected (p>0.05) by treatments. Cows that consumed diets treated with enzyme plus Tween 80 had higher (p<0.05) ruminal concentrations of propionate and isovalerate, and lower (p<0.05) acetate:propionate ratios. Compared to the control, microbial protein synthesis tended (p = 0.13) to increase with the addition of enzyme to the diet while nonammonia nitrogen flow to the duodenum increased (p<0.05) with both enzyme and Tween 80 treatments. The study indicated that fibrolytic enzymes alone or in combination with Tween 80 could enhance ISD of orchardgrass hay and ruminal concentrations of propionate, valerate and iso-valerate, but do not affect total tract digestibility.
A bacterium hydrolysing various organic materials including cellulose, protein, starch and lipid was isolated. The isolate was identified as Bacillus subtilis, and named Bacillus subtilis CK-2 in this paper. This bacterium showed optimal growth at $40\sim45^{\circ}C$, pH 6~9, and 0~3% of NaCl. B. subtilis CK-2 seemed to synthesis highly active autolysin. The hydrolytic enzymes produced by B. subtilis CK-2 were primary enzymes because extracellular enzyme activities varied similarly to the growth curve. The hydrolytic enzymes seemed to be stable at basic pH conditions. From these results, B. subtilis CK-2 was found to bea useful bacterial agent for composting, or for use in feed-production waste in agriculture, fishery, forest materials, livestock farming, and food.
Han, Viet-Cuong;Yu, Nan Hee;Yoon, Hyeokjun;Ahn, Neung-Ho;Son, Youn Kyoung;Lee, Byoung-Hee;Kim, Jin-Cheol
The Plant Pathology Journal
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v.38
no.2
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pp.115-130
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2022
Though information exists regarding the pathogenesis of the shot-hole disease (SH) in flowering cherry (FC), there has been a lack of research focusing on SH management. Therefore, here, we investigated the inhibitory activities of antagonistic bacteria against SH pathogens both in vitro and in vivo as well as their biochemical characteristics and bioactive compounds. Two biosurfactant-producing bacterial antagonists, identified as Bacillus velezensis strains JCK-1618 and JCK-1696, exhibited the best effects against the growth of both bacterial and fungal SH pathogens in vitro through their cell-free culture filtrates (CFCFs). These two strains also strongly inhibited the growth of the pathogens via the action of their antimicrobial diffusible compounds and antimicrobial volatile organic compounds (VOCs). Crude enzymes, solvent extracts, and biosurfactants of the two strains exhibited antimicrobial activities. Liquid chromatography/electrospray ionization time-of-flight mass spectrometric analysis of the partially purified active fractions revealed that the two antagonists produced three cyclic lipopeptides, including iturin A, fengycin A, and surfactin, and a polyketide, oxydifficidin. In a detached leaf assay, pre-treatment and co-treatment of FC leaves with the CFCFs led to a large reduction in the severity of the leaf spots caused by Epicoccum tobaicum and Bukholderia contaminans, respectively. In addition, the two antagonists produced indole-3-acetic acid, siderophore, and a series of hydrolytic enzymes, along with the formation of a substantial biofilm. To our knowledge, this is the first report of the antimicrobial activities of the diffusible compounds and VOCs of B. velezensis against the SH pathogens and their efficiency in the biocontrol of SH.
Seo, Dong-Ho;Cho, Eui-Sang;Hwang, Chi Young;Yoon, Deok Jun;Chun, Jeonghye;Jang, Yujin;Nam, Young-Do;Park, So-Lim;Lim, Seong-Il;Kim, Jae-Hwan;Seo, Myung-Ji
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.47
no.1
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pp.125-131
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2019
We have isolated and identified 72 bacterial strains from four bentonite samples collected at the mining areas located in Gyeongsangbuk-do, Republic of Korea, and measured their hydrolytic enzyme (${\alpha}$-amylase, protease, and cellulase) activities to identify the isolates with industrial-use potential. Most of the isolates belonged to the Bacillaceae, with minor portions being from the Paenibacillaceae, Micrococcaceae, and Bacillales Family XII at the family level. Of the strains isolated, 33 had extracellular ${\alpha}$-amylase activity, 30 strains produced cellulase, and 35 strains produced protease. Strain MBLB1268, having the highest ${\alpha}$-amylase activity, was identified as Bacillus siamensis ($0.38{\pm}0.06U/ml$). Bacillus tequilensis MBLB1223, isolated from Byi33-b, showed the highest cellulase activity ($0.26{\pm} 0.04U/ml$), whereas Bacillus wiedmannii MBLB1197, isolated from Zdb130-b, exhibited the highest protease activity ($54.99{\pm}0.78U/ml$). These findings show that diverse bacteria of the Bacillaceae family adhere to and exist in bentonite and are potential sources of industrially useful hydrolytic enzymes.
Fermentation characteristics, nutrient retention and aerobic stability of barley silages prepared using 6 commercial inoculants were evaluated using 126 mini-silos (3-L) in a completely randomized design. Whole barley forage was chopped, wilted to 39% DM and treated with water (control, S) or one of six inoculants: A (containing Lactobacillus plantarum); B (L. plantarum and Enterococcus faecium); C (L. plantarum and Pediococcus cerevisiae); D (L. plantarum, Pediococcus pentosaceus and Propionibacterium freudenreichii, plus hydrolytic enzymes); E (Lactobacillus buchneri plus hydrolytic enzymes); F (L. buchneri and P. pentosaceus plus hydrolytic enzymes). Samples of treated forage were collected for analysis at the time of ensiling, and then 18 silos of each treatment were filled, capped and weighed. Triplicate silos were weighed and opened after 1, 3, 5, 7, 33, and 61 d. On d 61, $400{\pm}5g$ of material from each silo was placed in 1-L styrofoam containers, covered with cheesecloth and held at room temperature. Silage temperature was recorded hourly for 14 d via implanted thermocouple probes. Chemical composition of the forage at ensiling was consistent with previously reported values. At d 61, pH was lowest (p<0.01) in silage S. Ammonia-N was lower (p<0.05) in silage A than in silages S, B, E, or F. Compared to pre-ensiling values, water soluble carbohydrate concentrations were elevated in silages S, A, B, C and D, and decreased in E and F. Lactic acid concentrations were similar (p>0.10) across treatments. Acetic acid levels were highest (p<0.01) in silage E and lowest (p<0.01) in silage D. Recovery of DM was lower (p<0.01) in silage F than in silages S, A, B, C, or D. On d 61, yeasts were most numerous (p<0.01) in silage D, which was the only silage in which temperature rose more than $2^{\circ}C$ above ambient during aerobic exposure. Silage D also had the highest (p<0.01) pH and ADIN content after aerobic exposure. Lactic acid and WSC content of silage D decreased dramatically during the 14-d aerobic exposure period. Yeast counts (at d 14 of exposure) were lowest (p<0.01) in silages E and F. In general, the commercial inoculants did not appear to enhance the fermentation of barley silage to any appreciable extent in laboratory silos.
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