• 생명과학회지
• /
• 제16권6호
• /
• pp.964-971
• /
• 2006

기질의 침윤과 전이를 특징으로 하는 악성종양 세포는 세포외 기질이나 기저막에 의존적으로 작용한다. 세포외 기질을 분해하는 효소인 matrix metalloproteinase (MMP) 계들의 발현 및 활성증가는 대부분의 악성종양세포에서 전이와 침윤을 촉진시킨다. MMP family 가운데 특히 type IV collagenase 활성을 지닌 MMP-2와 MMP-9은 세포외기질의 중요한 구성분인 collagen, fibronectin을 분해하는 특성을 가지며 암 전이를 용이하게 하는 주요한 효소로 잘 알려져 있다. 본 연구에서는 항암후보물질인 disulfiram이 골 육종 (U20S), 신장암 (Caki-1) 및 자궁암 (Caski) 세포에서 MMP-2와 MMP-9의 효소활성 및 발현억제에 대해 조사하였다. MTT assay를 이용하여 disulfiram에 대한 암세포 viability 실험에서는 disulfiram이 암세포의 viability를 저해하였다. 또한 zymography, western blot 및 RT-PCR 등을 이용한 type IV collagenase의 활성 및 발현 실험에서 disulfiram은 type IV collagenase의 활성을 비롯하여 단백질 및 mRNA 발현을 억제시키는 것을 확인하였다. 따라서 disulfiram이 MMP-2와 MMP-9의 활성 및 발현 억제 기전을 통하여 골 육종, 신장암 및 자궁경부암 세포의 작용을 억제한다는 연구 결과는 disulfiram이 각종 악성종양의 침윤과 전이를 억제 또는 방지하기 위한 치료물질로서 임상에서 활용할 수 있는 가능성을 보여준다.

• Restorative Dentistry and Endodontics
• /
• 제35권5호
• /
• pp.359-367
• /
• 2010

연구목적: 본 연구의 목적은 glass ionomer cement (GIC)와 혼합된 mineral trioxide aggregate (MTA)의 생체친화성을 평가하고 이것을 MTA, GIC, IRM, SuperEBA와 비교해보는 것이다. 연구 재료 및 방법: 재료의 세포독성을 평가하기 위해 MG-63세포를 이용해 주사전자 현미경 관찰과 XTT assay를 실시하였다. 결과: 주사전자 현미경 관찰에서는 GIC와 혼합한 MTA, MTA, GIC의 표면에서 세포질 돌기를 가진 많은 세포들이 밀집되고 융합된 형태로 관찰되었다. 반면 IRM과 SuperEBA에서는 세포들의 수가 적고 둥근 양상을 보여주었다. XTT assay에서는 GIC와 혼합한 MTA에서의 세포 활성도는 모든 시점에서 MTA 또는 GIC와 유사하였다. 반면 IRM과 SuperEBA에서는 모든 시점에서 세포활성도가 다른 그룹에 비해 유의하게 더 낮았다. 결론: 본 연구에서 GIC와 혼합된 MTA는 MTA, GIC와 유사한 세포 반응을 나타냈다. 이것은 GIC와 혼합된 MTA가 MTA, GIC와 마찬가지로 좋은 생체친화성을 가진 재료라는 것을 시사한다.

• Journal of Periodontal and Implant Science
• /
• 제39권2호
• /
• pp.149-156
• /
• 2009

Purpose: Deproteinized bovine bone substitutes are commonly used in dental regenerative surgery for treatment of alveolar defects. In this study, three different bovine bone minerals - OCS-B (NIBEC, Seoul, Korea), Bio-Oss (Geistlich - Pharma, Switzerland), Osteograft/N - 300 (OGN, Dentsply Friadent Ceramed. TN, USA) - were investigated to analyze the basic characteristics of commercially available bone substitutes. Methods: Their physicochemical properties were evaluated by scanning electron microscopy, energy dispersive X-ray spectrometer (EDS), surface area analysis, and Kjeldahl protein analysis. Cell proliferation and alkaline phosphatase (ALP) activity of human osteosarcoma cells on different bovine bone minerals were evaluated. Results: Three kinds of bone substitutes displayed different surface properties. Ca/P ratio of OCS - B shown to be lower than other two bovine bone minerals in EDS analysis. Bio-Oss had wider surface area and lower amount of residual protein than OCS - B and OGN. In addition Bio - Oss was proved to have lower cell proliferation and ALP activity due to lots of residual micro particles, compared with OCS - B and OGN. Conclusions: Based on the results of this study, three bovine bone minerals that produced by similar methods appear to have different property and characteristics. It is suggested that detailed studies and quality management is needed in operations for dental use and its biological effects on new bone formation.

• 대한한방소아과학회지
• /
• 제16권1호
• /
• pp.39-74
• /
• 2002

Recently, increased attention has been paid to the growth of the height of children and adolescents. To accelerate growth, velvet antlers are typically used in Oriental medicine. The present study investigated the effects of velvet antlers of velvet antlers on bone growth using the cell line of Human Osteosarcoma (Hos), derived from the bone-generating cells essential to bone growth. In order to give certain stress to this Hos, the medium contained 1% FBS was used for culturing for Hos cell instead of 10% in control. In this condition of which the proliferation had been significantly decreased, the ethanol extract of upper part of velvet antlers was added, As a result, the cells proliferation rate was significantly increased. Using Oligonucleotide DNA microarray, comparison and analyses were done to see what kind of specific genes would be differentially expressed. The result showed that as opposed to the control group, the stressed group indicated a decrease in the expressions of 6 kinds of genes such as, Id1, retinoid X receptor(RXRB) and 14-3-3 epsilon, etc. The velvet antler treated group, as opposed to the control group, showed a decreased in the expressions of 8 kinds of genes such as Id1, etc. and an increase in the expressions of 24 kinds of genes. The number of genes that showed differences in the velvet antler treated group compared with the stressed group was 7 the expression of 1 kind of gene was decreased, and the expressions of 6 kinds of genes were increased. Considering the mechanism by which velvet antlers affected the growth of osteoblast through reviewing the functions of these genes, the following results were attained. The constraint in the proliferation of Hos cells resulting from the medium contained 1% FBS seems to be caused by three important factors: 1) the decrease of the expression of 14-3-3 epsilon involved in the signal transduction and metabolism of growth, 2) the decrease of the expression of Id1 gene involved in the metabolism of bone formation, and 3) the decreased of expression of RXRB gene involved in the metabolism of retinoci acid. It is suggested that the improvement of the cell proliferating effects by velvet antler treatment, in stressed condition si mediated by increment of 6 genes particularly 14-3-3 epsilon, RXRB, and IGF2, with are the crucial factors for the cell growth and differentiation, metabolism of retinoic acid and osteoblast proliferation, respectively.

• Journal of Periodontal and Implant Science
• /
• 제27권4호
• /
• pp.867-882
• /
• 1997

Safflower(Carthamus tinctorius $Linn\acute{e}$ has been traditionally used for the treatment of blood stasis, and Dipsasi Radix has been used as a drug for fracture in Chinese medicine. The purpose of present study was to examine the biologic effects of safflower extract and Disasi radix extracts on the periodontal. ligament cells and osteoblastic cells and on the wound healing of rat calvarial defect. The ethanolic extract of safflower blossom, safflower seed and Dipsasi Radix(125, 250, and 500 ${\mu}g/ml$) were prepared as test group, and PDGF-BB(lOng/ml) and unsafonifiable fraction of Zea Mays L.(125, 250, and 500 ${\mu}g/ml$) were employed as positive control. The effects of each agents on the growth and survival, ALPase activity, expression of PDGF-BB receptor, chemotactic response of PDL cell and ATCC human osteosarcoma MG63 cells in vitro were examined. The tissue regenerative effect of each extracts was evaluated by histomorphometric measuring of newly formed bone on the 8mm defect in rat calvaria after oral administration of 3 different dosages groups : 0.02, 0.1 and 0.35g/kg, per day. It was also employed the same dosages of unsaponifiable fraction of Zea Mays L. as positive controls. Safflower blossom extract, safflower seed extract, and Dipsasi Radix extract stimulate the cellular activity of MG63 cells in concentration range of $125-500{\mu}g/ml$, and safflower bolssom extract and safflower seed extract stimulate also the cellular activity of periodontal ligament cells in concentration range of $250-500{\mu}g/ml$. In activity of ALPase, $250-500{\mu}g/ml$ of safflower blossom extracts showed significant stimulating effects on MG63 cells, and the same concentration range of safflower seed extracts showed significant effect on periodontal ligament cells. In the recovery on PDGF-BB receptor expression which was depressed by $IL-1{\beta}$, $125-250{\mu}g/ml$ of safflower blossom extracts and $250-500{\mu}g/ml$ of safflower seed extracts showed significant increasing effect on MG63 cells, and $500{\mu}g/ml$ of safflower blossom extract and $250-500{\mu}g/ml$ of safflower seed extracts showed significant effect on periodontal ligament cells. In chemotactic response, among all tested group, safflower seed extracts only were chemotactic to MG63 cells and periodontal ligament cells in concentration range of $125-500{\mu}g/ml$. Also in the view of bone regeneration in rat calvarial defect model, the only group that was orally administrated 0.35g/kg, day of safflower seed extract showed significant new bone formation. These results suggested that safflower extracts might have a potential possibilities as an useful drug for adjunct to treatment for regeneration of periodontal defect.

• Restorative Dentistry and Endodontics
• /
• 제29권5호
• /
• pp.470-478
• /
• 2004

본 연구의 목적은 Prevotella nigrescens lipopolysaccharides (LPS)로 자극된 MG63 osteosarcoma 세포에서 생성, 분비되는 기질금속단백효소인 MMP-1과 그 억제제인 TIMP-1을 측정할 뿐아니라 수산화칼슘으로 처리한 P. nigrescens LPS에 의한 기질금속단백효소와 그 억제제의 분비수준의 변화를 알아보는데 있다. 혐기성 조건에서 배양한 P. nigrescens로부터 LPS를 추출하여 순수정제한 다음 0, 1 그리고 $10{\;}\mu\textrm{g}/ml$의 LPS 농도로 MG63 세포를 자극하거나 또는 수산화칼슘으로 처리한 $10{\;}\mu\textrm{g}/ml$의 LPS로 세포를 다양한 자극하여 다양한 시간이 경과한 다음 세포로부터 분비되는 MMP-1과 TIMP-1의 RNA 수준을 real time-PCR 방법으로 측정하였다. 실험결과 MMP-1의 mRNA수준은 48시간에서 최고에 달하였고 그 분비정도는 LPS의 농도에 비례하였다. TIMP-1 mRNA는 $1{\;}\mu\textrm{g}/ml$의 세균성 LPS 자극시 24시간 및 48시간에서 높은 증가를 보였으나 고농도인 $10{\;}\mu\textrm{g}/ml$의 LPS로 자극한 경우 오히려 그 발현이 억제되었다. 또한 수산화칼슘으로 전처리한 P. nigrescens LPS로 자극한 MG 63 세포에서는 MMP-1과 TIMP-1의 분비가 억제되었다. 이러한 결과를 통해 볼 때 P. nigrescens LPS에 의한 MMP-1과 TIMP-1의 발현조절이 치근단 질환에서 발생하는 치조골 흡수 기전중 하나로 사료된다. 뿐만 아니라 P. nigrescens에 의해 분비되는 기질금속단백효소를 매개로 하는 염증반응 감소에 수산화칼슘이 효과적으로 작용하는것으로 확인되어 치근단 질환에 관여하는 세균성 LPS를 제거하기 위해 임상적으로 사용되는 근거가 될 수 있다.

• 생명과학회지
• /
• 제20권2호
• /
• pp.281-291
• /
• 2010

본 연구는 유근피(root bark of Ulmus davidiana)에서 분리한 화합물인 hederagenin 3-O-b-D-glucopyranosyl($1{\rightarrow}3$)-a-L-rhamnopyranosyl($1{\rightarrow}2$)-a-L-arabinopyranoside (HDL)을 이용하여 $CoCl_2$에 의해 생성된 ROS에 대한 항산화 기전을 밝히기 위하여, ROS 생성과 관련된 산화 효소 및 항산화 효소에 대한 저해효과를 조사하였다. 또한 HDL이 $CoCl_2$에 의해 생성된 ROS의 조절을 통해 산화적 스트레스와 관련된 단백질 발현 및 세포주기에 미치는 영향을 조사하였다. 그 결과 HDL은 $CoCl_2$에 의해 유발된 xanthine oxidase와 $H_2O_2$ 생성 증가를 억제하였고, 산화와 관련된 SOD, CAT의 활성을 증가시켜 $H_2O_2$의 가수분해를 촉진하였다. 그리고 HDL은 $CoCl_2$에 의해 유발된 ferritin의 손상과 ferritin iron의 방출을 억제하 였으며, 지질과산화의 증가를 억제하였다. 뿐만 아니라 HDL은 $CoCl_2$에 의해 증가된 G1 phase의 세포를 감소시켰으며, 세포주기와 관련된 p53 및 $p21^{CIP1/WAF1}$의 발현을 감소시켰다. 이러한 연구결과들은 HDL이 천연물로부터 유래한 독성이 없는 항산화제로서의 가능성을 제시한다.