Kustiawan, Paula M;Phuwapraisirisan, Preecha;Puthong, Songchan;Palaga, Tanapat;Arung, Enos T;Chanchao, Chanpen
Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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v.16
no.15
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pp.6581-6589
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2015
Background: Previously, stingless bee (Trigona spp.) products from East Kalimantan, Indonesia, were successfully screened for in vitro antiproliferative activity against human cancer derived cell lines. It was established that propolis from T. incisa presented the highest in vitro cytotoxicity against the SW620 colon cancer cell line (6% cell survival in $20{\mu}g/mL$). Materials and Methods: Propolis from T. incisa was extracted with methanol and further partitioned with n-hexane, ethyl acetate and methanol. The in vitro cytotoxicity of the extracts was assessed by the MTT assay against human colon (SW620), liver (Hep-G2), gastric (KATO-III), lung (Chago) and breast (BT474) cancer derived cell lines. The active fractions were further enriched by silica gel quick column, absorption and size exclusion chromatography. The purity of each fraction was checked by thin layer chromatography. Cytotoxicity in BT-474 cells induced by cardanol compared to doxorubicin were evaluated by MTT assay, induction of cell cycle arrest and cell death by flow cytometric analysis of propidium iodide and annexin-V stained cells. Results: A cardol isomer was found to be the major compound in one active fraction (F45) of T. incisa propolis, with a cytotoxicity against the SW620 ($IC_{50}$ of $4.51{\pm}0.76{\mu}g/mL$), KATO-III (IC50 of $6.06{\pm}0.39{\mu}g/mL$), Hep-G2 ($IC_{50}$ of $0.71{\pm}0.22{\mu}g/mL$), Chago I ($IC_{50}$ of $0.81{\pm}0.18{\mu}g/mL$) and BT474 (IC50 of $4.28{\pm}0.14{\mu}g/mL$) cell lines. Early apoptosis (programmed cell death) of SW620 cells was induced by the cardol containing F45 fraction at the $IC_{50}$ and $IC_{80}$ concentrations, respectively, within 2-6 h of incubation. In addition, the F45 fraction induced cell cycle arrest at the G1 subphase. Conclusions: Indonesian stingless bee (T. incisa) propolis had moderately potent in vitro anticancer activity on human cancer derived cell lines. Cardol or 5-pentadecyl resorcinol was identified as a major active compound and induced apoptosis in SW620 cells in an early period (${\leq}6h$) and cell cycle arrest at the G1 subphase. Thus, cardol is a potential candidate for cancer chemotherapy.
The purpose of this research was to investigate the effect of reaction-precipitate from Coptidis Rhizoma and Glycyrrhizae Radix aqueous mixture(CGP) on the cytotoxicity. The effects of CGP on the growth of tumor cells, Balb/c 3T3 cell, mouse spleen cell and human lymphocyte were compared with those of berberine, glycyrrhizin and berberine glycyrrhizinate(BG), which were estimated by MTT colorimetric assay or cell counting. CGP, berberine and BG inhibited the growth of several tumor cells, such as Hep G2, A549, Raji, MCF-7, HeLa and KHOS-NP. Whereas, glycyrrhizin inhibited the growth of Raji and MCF-7, CGP did not affect on Balb/C 3T3 cells, mouse spleen cells and human lymphocyte at $10^{-6}{\sim}10^{-5}g/ml$. CGP increased the number of leukocyte in mice. This results indicate that CGP have the inhibitory action of the growth of human tumor cells, and the side effect of CGP is less than berberine and BG.
Kim, Young-Sang;Li, Xi-Feng;Kang, Kyong-Hwa;Ryu, BoMi;Kim, Se Kwon
BMB Reports
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v.47
no.8
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pp.433-438
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2014
Plant sterols have shown potent anti-proliferative effects and apoptosis induction against breast and prostate cancers. However, the effect of sterols against hepatic cancer has not been investigated. In the present study, we assessed whether the stigmasterol isolated from Navicula incerta possesses apoptosis inductive effect in hepatocarcimona (HepG2) cells. According to the results, Stigmasterol has up-regulated the expression of pro-apoptotic gene expressions (Bax, p53) while down-regulating the anti-apoptotic genes (Bcl-2). Probably via mitochondrial apoptosis signaling pathway. With the induction of apoptosis caspase-8, 9 were activated. The DNA damage and increase in apoptotic cell numbers were observed through Hoechst staining, annexin V staining and cell cycle analysis. According to these results, we can suggest that the stigmasterol shows potent apoptosis inductive effects and has the potential to be tested as an anti-cancer therapeutic against liver cancer.
Epigallocatechin gallate (EGCG), a well-known antioxidant molecule, has been reported to cause hepatotoxicity when used in excess. However, the mechanism underlying EGCG-induced hepatotoxicity is still unclear. To better understand the mode of action of EGCG-induced hepatotoxicity, we examined the effect of EGCG on human hepatic gene expression in HepG2 cells using microarrays. Analyses of microarray data revealed more than 1300 differentially expressed genes with a variety of biological processes. Upregulated genes showed a primary involvement with protein-related biological processes, such as protein synthesis, protein modification, and protein trafficking, while downregulated genes demonstrated a strong association with lipid transport. Genes involved in cellular stress responses were highly upregulated by EGCG treatment, in particular genes involved in endoplasmic reticulum (ER) stress, such as GADD153, GADD34, and ATF3. In addition, changes in genes responsible for cholesterol synthesis and lipid transport were also observed, which explains the high accumulation of EGCG-induced lipids. We also identified other regulatory genes that might aid in clarifying the molecular mechanism underlying EGCG-induced hepatotoxicity.
Objectives: The aim of this investigation was to evaluate the efficacy of KHchunggan-tang aqueous extract on the experimental nonalcoholic fatty liver disease(NAFLD) induced by palmitate. Materials and Methods: To generate a cellular model of NAFLD, we used HepG2 cells, a human hepatoma cell line, treated with 0.5 mM palmitate. By this cellular model, effects of KHchunggan-tang aqueous extract were evaluated. Intracellular lipid accumulation, free radical formation, and apoptosis were detected by Nile red staining, 2',7'-dichloroflourescin diacetate(H2DCF-DA), and 4',6-diamidino-2-phenylindole(DAPI)/propidium iodide(PI) staining, respectively. Some proteins related with NAFLD were determined by western blot. Results: Typical pathological features of NAFLD occurred in the cellular model. Palmitate increased the levels of intracellular lipid vacuoles, decreased cell viability, and increased apoptosis. Palmitate increased free radical formation and lipid peroxidation, too. However, KHchunggan-tang aqueous extract reduced palmitate-induced pathologic features, i.e. steatosis, free radical formation, and apoptosis. In addition, KHchunggan-tang aqueous extract suppressed palmitate-activated c-Jun N-terminal kinase(JNK) signaling, and SP600125, a JNK inhibitor, significantly reversed the palmitate-induced pathologic changes as KHchunggan-tang aqueous extract. It means that the signaling pathway other than JNK can be involved in the KHchunggan-tang mediated cellular protection of palmitate-treated Hep G2 cells. Conclusions: These results suggest that KHchunggan-tang aqueous extract has hepatoprotective effects on NAFLD with combined properties in cellular steatosis, ROS production, and cytoprotection, and thus may have valuable clinical applications for treatment of this chronic liver disease.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.34
no.5
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pp.573-580
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2005
Cholesterol $7\alpha-hydroxylase$ (CYP7A1) is the rate-limiting enzyme in the conversion of cholesterol to bile acids and plays a central role in regulating cholesterol homeostasis. We previously showed that a fermentable $\beta-glucan$ ingestion decreased plasma cholesterol levels due to fecal bile acid excretion elevation involved inincrease of cholesterol $7\alpha-hydroxylase$ mRNA expression and activity. It is proposed that short chain fatty acids (SCFA) produced by cecal and colonic fermentation of soluble fiber are associated with cholesterol-lowering effect of fiber. In the present study, we investigated whether CYP7A1 expression is up-regulated by short chain fatty acids or by hormones in cultured human hepatoma (HepG2) cells. Confluent HepG2 cell were incubated with acetate, propionate, or butyrate at 1 mM concentration for 24 hrs. Acetate as well as propionate increased to 1.8-fold expression of CYP7A1 mRNA than the control. Butyrate also increased 1.5-fold expression of CYP7A1 mRNA. Our data show for the first time that SCFA increase expression of CYP7A1 mRNA. Adding insulin, dexamethasone and triiodothyronine $(1\;{\mu}M)$ to HepG2 cell increased the expression of CYP7A1 mRNA to $150\%,\;173\%,\;141\%$, respectively. These results suggest that SCFA produced by cecal fermentation stimulate enteric nervous system, in which secreted some neuropeptides may be responsible for change in cholesterol and bile acid metabolism. These findings suggest that SCFA are involved in lowering plasma cholesterol levels due to the up-regulation of CYP7A1 and bile acid synthesis.
Complete prelining of artificial vascular grafts with autologous endothelial cells may be one of the ideal solutions to obtain a nonthrombogenlc blood-contacting surface. To establish an intact endothelial cell monolayer on a prosthetic surface at the time of implantation,a sufficient number of endothelial cells and adequate propagation condition In cell culture are prerequisites. In this experimental study, endothelial cells from microvessels of adult human oriental adipose tissue were enzymatically harvested, and optimal culture conditions for proliferation of the endothelial cells in cell culture were examined. Human oriental adipose tissue was digested with collagenase and endothelial cells were separated from other stromal elements by mesh filtration method. Cultured cells were identified as endothelial cells by immunofluorescent staining for factor VIII-related antigen. Proliferation in usual 20% fetal bovine serum (FBS) medium or medium containing endothelial cell growth factor (ECGF)(5 ng/ml) and heparin (HEP)(1,000 units/ml) were compared,and the effects of adding compounds that increase intracellular cyclic adenosine monophosphate levels, that is,cholera toxin (CT)(1 $\mu\textrm{g}$/ml) and isobutylmethylxanthine (IBMX)(0.2 ml),were also analyzed. In total,following eight media groups were examined. 1) FBS medium + ECGF + HEP, 2) FBS medium + ECGF + HEP+CT, 3) FBS medium+ECGF+HEP+lBMX, 4) FBS medium+ECGF+HEP+CT+ IBMX, 5) FBSmedium, 6) FBS medium +CT, 7) FBS medium + IBMX, 8) FBS medium + CT + IBMX. It was shown that the medium containing ECGF + HEP with or without cholera toxin was most efficient in Stimulating cell proliferation. IBMX was considered to have antagonistic effect to ECGF. Among experimental groups without ECGF and HEP, the addition of cholera toxin and IBMX was shown to significantly potentiate cell proliferation. This results could provide a practical method for use of cultured human endothelial cells for endothelial cell seeding of cardiovascular prosthetic device, particularly in small-diameter vascular grafts.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.34
no.3
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pp.317-322
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2005
This study was carried to investigate the inhibition effects of Lepista nuda mushroom extracts on the growth of the human cancer (HepG2, KATOⅢ, AGS) cells. The fraction Ⅰ of Lepista nuda mushroom extracts strongly inhibited to 71.4-91.8% for the growth of cancer cells. The growth of cancer HepG2, KATOⅢ and AGS cell which treated with 0.5 and 1㎎/mL of hot water fraction I was inhibited to 71.4% and 85.5%, 45.0% and 86.6%, 71.6% and 90.7% respectively. The growth of cancer cell HepG2, KATOⅢ and AGS which treated with 0.5 and 1㎎/mL of microwave fraction I was inhibited to 79.8% and 85.2%, 78.6% and 88.9%, 85.8% and 91.8%, respectively. The inhibition ratios of cancer cell growth were higher by microwave extracts than hot water extracts. And the more fraction were insoluble for water, the more inhibition ratios of cancer cell growth were lower.
Kim Young-Tae;Kim Young-Chul;Woo Hong-Jung;Lee Jang-Hoon
The Journal of Internal Korean Medicine
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v.24
no.1
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pp.123-133
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2003
Objectives : This study was designed to investigate the effects of Chungganhaeju-tang on expression of alcohol metabolizing enzymes, cell viability and alcohol-induced apoptosis. Materials and Methods : For this study, the human hepatoma cell line HepG2 was used. HepG2 cells were treated with ethanol-or acetaldehyde, chungganhaeju-tang, anti-Fas neutralizing antibody and were investigated by using quantitative RT-PCR, MTT and Trypan blue exclusion assays. Results : The results are summarized as follows: 1. Quantitative RT-PCR analysis demonstrated that ethanol-or acetaldehyde-mediated increase of ALDH gene expression was not affected by Chungganhaeju-tang treatment. 2, Ethanol-or acetaldehyde-induced apoptosis was remarkably inhibited by Chungganhaeju-tang in a dose-dependent manner. 3, Ethanol-or acetaldehyde-induced apoptosis was significantly blocked by anti-FasL neutralizing antibody, suggesting apoptosis induced by alcohol might be mediated by FasL/Fas signaling pathway. Conclusions : Taken all together, these results indicate that the FasL/Fas signaling plays a critical role in alcohol-induced apoptosis and Chungganhaeju-tang increases viability of liver cells by suppression of the FasL/Fas-mediated apoptosis-signaling pathway.
Kim, Sung Min;Jang, Eu Jean;Hong, Jong Won;Song, Sung Ho;Pak, Chun Ho
Horticultural Science & Technology
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v.34
no.2
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pp.331-341
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2016
We analyzed the functional fragrant components of three species of Cymbidium oriental orchids using gas chromatography-mass spectrometry (GC/MS). For the comparative analysis, C. goeringii 'Minchunran', 'Jugeumhwa', C. forrestii 'Chwigae', 'Songmae', 'Yongja', and C. faberi 'Choemae', 'Namyangmae', 'Hwaja' were investigated. Major fragrant components detected by GC/MS were selected on the basis of more than 3% value according to the analysis of peak area (%). We found that ${\alpha}$-bergamotene, which has a cytotoxic effect on breast cancer, cervical cancer, and glioblastoma, and nerolidol, which induces apoptosis of human hepatoma cells (HepG2), inhibits the growth of Streptococcus mutans and babesiosis, and has antibacterial properties, are common substances produced by C. goeringii L. Nerolidol and ${\beta}$-bisabolene, which is cytotoxic and suppresses the growth of malignant melanoma cells (B16-F10), HepG2, and leukemia cells (HL-60, K562), are major substances in C. forrestii R. Furthermore, ${\alpha}$-pinene, which inhibits the growth of gliobastoma cells (SF-767) and inhibits the anti-inflammatory action of hepatoma cells (BEL-7402); 1,8-cineole, which is a potential therapeutic agent for the treatment of gastric ulcers; and 1,3,7-octatriene, which functions as a pheromone, are the most common substances in C. faveri R. Thus, substances identified as major fragrant components in oriental orchid species have multiple beneficial applications in human health. This research forms the basis for further studies of the roles of major fragrant components in oriental orchids.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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