• 한국식품저장유통학회지
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• 제15권2호
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• pp.274-279
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• 2008

해양심층수 간장 및 일반간장을 제조하여 항돌연변이원성과 세포독성을 측정하였으며 sarcoma-180 cell을 이용하여 in vivo에서 항암효과를 살펴보았다. S. typhimurium TA98과TA100 균주를 이용한 실험에서 모든 시료에서 돌연변이원성이 없었으며, 항돌연변이원성 실험에서는 직접변이원인 MNNG($0.4{\mu}g$/plate)의 경우 TA100 균주에서 해양심층수간장의 시료농도 $200{\mu}g$/plate에서 90.9%의 높은 억제효과를 나타내었으며 4NQO($0.15{\mu}g$/plate)에 대해서는 같은 시료농도에서 62.0%의 억제효과를 나타내었다. 그리고 4NQO의 경우 TA98 균주에 대해서 해양심층수 간장은 61.7%의 억제효과를 나타내었으며 모든 시료는 농도 의존적으로 억제하는 것으로 나타났다. 세포독성 효과를 알아보기 위하여 HeLa, Hep3B, AGS, A549와 MCF-7을 사용하였다. 각 시료 추출물의 암세포 성장효과를 조사한 결과, 해양심층수 간장이 1 mg/mL의 농도에서 각각 69.4%, 70.5%, 55.6%, 82.1% 및 73.2%의 억제율을 나타내었다. 그리고 해양심층수 간장은 고형암 성장 억제 실험에서 대조군에 비해서 40.9%의 고형암 성장 억제효과를 나타내었다.

• Imaging Science in Dentistry
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• 제30권4호
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• pp.275-279
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• 2000

Purpose: Radiation damage is produced and viable cell number is reduced. We need to know the type of cell death by the ionizing radiation and the amount and duration of cell cycle arrest. In this study, we want to identified the main cause of the cellular damage in the oral cancer cells and normal keratinocytes with clinically useful radiation dosage. Materials and Methods: Human gingival tissue specimens obtained from healthy volunteers were used for primary culture of the normal human oral keratinocytes (NHOK). Primary NHOK were prepared from separated epithelial tissue and maintained in keratinocyte growth medium containing 0.15 mM calcium and a supplementary growth factor bullet kit. Fadu and Hep-2 cell lines were obtained from KCLB. Cells were irradiated in a /sup 137/Cs γ-irradiator at the dose of 10 Gy. The dose rate was 5.38 Gy/min. The necrotic cell death was examined with Lactate Dehydrogenase (LDH) activity in the culture medium. Every 4 day after irradiation, LDH activities were read and compared control group. Cell cycle phase distribution and preG1-incidence after radiation were analyzed by flow cytometry using Propidium Iodine staining. Cell cycle analysis were carried out with a FAC Star plus flowcytometry (FACS, Becton Dickinson, USA) and DNA histograms were processed with CELLFIT software (Becton Dickinson, USA). Results: LDH activity increased in all of the experimental cells by the times. This pattern could be seen in the non-irradiated cells, and there was no difference between the non-irradiated cells and irradiated cells. We detected an induction of apoptosis after irradiation with a single dose of 10 Gy. The maximal rate of apoptosis ranged from 4.0% to 8.0% 4 days after irradiation. In all experimental cells, we detected G2/M arrest after irradiation with a single dose of 10 Gy. Yet there were differences in the number of G2/M arrested cells. The maximal rate of the G2/M ranges from 60.0% to 80.0% 24h after irradiation. There is no significant changes on the rate of the G0/G1 phase. Conclusion: Radiation sensitivity was not related with necrosis but cell cycle arrest and apoptosis. These data suggested that more arrested cell is correlated with more apoptosis.

• Nutritional Sciences
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• 제9권1호
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• pp.9-13
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• 2006

The differential effects of various fatty acids such as n-3 and n-6 types or degrees of unsaturation on the CYP2E1 induction and the production of lipid peroxidation (LPO) were investigated. The CYP2E1-transduced human hepatoma HepG2 cells (E47) were cultured in RPMI 1640 media containing different concentrations of various fatty acids up to 48 h incubation compared to 04 cells and CYP2E1-null cells. Treated fatty acids were linoleic acid (LA:n-6, C18:2), arachidonic acid (AA:n-6, C20:4) and docosahexaenoic acid (DHA:n-3, C22:6). The cell survival rate was decreased corresponding to the degree of unsaturation (LA>AA $\cong$DHA) and to LPO production in E47 and 04 cells. The four or five unsaturation degree of fatty acids, AA and DHA, caused time- and dose-dependent cell death in E47 cells but not as much as in C34 (without CYP2E1), suggesting an important role of CYP2E1 in the DHA mediated damage. In the levels of lipid peroxides (LPO), AA also elevated LPO by 3- and 5- fold compared to DHA or LA treated E47 cells. However, AA did not increase LPO until 48 h incubation in C34 cells. In conclusion, the polyunsaturated fatty acids induced CYP2E1 induction might be changed by the elevated levels of lipid peroxide (LPO) and oxidative stress through the connection of CYP2E1 and degrees of unsaturated fatty acids.

• 한국식품영양학회지
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• 제25권2호
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• pp.259-265
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• 2012

본 연구에서는 배추와 양배추 에탄올 추출물의 총 폴리페놀 함량 및 총 플라보노이드 함량을 측정하고, glucosinolates 함량을 HPLC로 분석하였다. 또한, MTT assay를 통한 암세포 증식 억제 활성을 측정하였다. 배추와 양배추 에탄올 추출물의 항산화물질로 알려진 총 폴리페놀 함량은 각각 308.48 및 344.75 ${\mu}g$ GAE/g dry weight으로 나타났으며, 총 플라보노이드 함량은 각각 5.33 및 5.95 ${\mu}g$ QE/g dry weight으로 나타났다. 배추 추출물에서는 progoitrin, glucoalyssin, gluconapin, glucobrassicanapin, glucobrassicin, 4-methoxyglucobrassicin의 총 6개 glucosinolates를 확인하였다. 양배추 추출물에서는 glucoraphanin, sinigrin, glucobrassicin 및 4-methoxyglucobrassicin의 총 4개 glucosinolates를 확인하였다. 배추와 양배추 에탄올 추출물이 AGS 인체 위암세포주, HepG2 인체 간암세포주, LNCaP 인체 전립선암 세포주 증식에 미치는 영향을 MTT assay를 통해 알아보았다. 배추와 양배추 추출물의 농도가 증가함에 따라 농도 의존적으로 암세포 증식 억제 효능이 증가하였다. 또한, 배추와 양배추 추출물을 암세포에 처리하고 배양하는 시간이 24시간에서 48시간으로 길어질수록 암세포 성장 억제 효능도 증가하였다. 배추와 양배추의 추출과정 중에 생성된 glucosinolate 가수분해 산물과 폴리페놀, 플라보노이드 등의 생리활성 물질들이 암세포 성장 억제에 직접적인 영향을 주었을 것으로 사료된다. 한국인들이 자주 섭취하고 있는 배추와 양배추에는 주요 생리활성 물질인 글루코시놀레이트뿐 아니라 폴리페놀, 플라보노이드가 함유되어 있으며, 이들 추출물들은 암세포 증식 억제 효능이 있음을 보여주었다.

• 한국식품영양과학회지
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• 제37권10호
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• pp.1238-1243
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• 2008

잔대 뿌리는 우리나라에서 예로부터 민간약으로 이용되어 오고 있다. 본 연구에서는 인간 간세포인 HepG2에 잔대 뿌리의 에틸아세테이트 추출물을 처리했을 때 sodium nitroprusside(SNP)에 의해 유도된 세포 독성 및 항산화 유전자 발현에 미치는 영향력을 알아보았다. 먼저, 잔대 에틸아세테이트 추출물이 NO에 의해 유도된 세포 사멸을 저해할 수 있는지를 알아보기 위하여 HepG2 세포에 잔대 에틸아세테이트 추출물(각각 50과 100 $\mu$g/mL)을 24시간 먼저 처리한 후 세포내에서 NO을 생성시킬 수 있는 0.5 mM SNP를 처리하였다. NO에 의한 세포독성이 에틸아세테이트 추출물에 의해 저해되었다는 것을 mitochondrial dehydrogenase 활성을 알아보는 MTT assay를 실시하여 알아보았다. 더하여 우리는 잔대 에틸아세테이트 추출물이 세포내 항산화 방어 시스템인 Cu,Zn superoxide dismutase(SOD 1), Mn SOD(SOD 2), glutathione peroxidase(GPx), catalase와 glutathione metabolism과 관련되어져 있는 glutathione reductase(GR), $\gamma$-glutamyl-cystein synthetase(GCS), glutathione-S-transferase(GST), $\gamma$-glutamyltranspeptidase($\gamma$-GT), glucose-6-phosphate dehydrogenase(G6PD)의 mRNA 발현에 미치는 영향을 RT-PCR로 알아보았다. CAT, GCS 그리고 G6PD mRNA 수준이 잔대 에틸아세테이트 추출물 처리 후 증가하였으나, SOD 1, SOD 2, GPx, GST 그리고 $\gamma$-GT mRNA 수준은 변화지 않았다. 따라서 잔대 에틸아세테이트 추출물이 간접적 항산화 효과가 있고, 이들 효과는 아마 CAT, GCS, GR 그리고 G6PD 유전자 발현 증가에 의한 것이라고 추정되었다.

• Reproductive and Developmental Biology
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• 제31권3호
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• pp.187-191
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• 2007

본 연구는 사람 H-transferase가 과발현하는 돼지 체세포주를 개발하는데 있다. 돼지 세포에 사람 H-transferase 유전자를 발현시키는 것은 이종간 장기 이식에 있어서 초급성 거부 반응을 방지하기 위한 한 가지 방법이다. 본 연구에서는 과발현 벡터를 구축하기 위하여 사람 H-transferase을 HepG2 세포로부터 동정하였으며, 이 유전자를 CMV promoter를 이용하여 발현할 수 있도록 포유동물 발현 벡터인 pRc/CMV벡터에 삽입하였다. 또한, 돼지 산자의 귀 세포를 이용하여 체세포를 수립한 후 jetPEI DNA transfection reagent를 이용하여 벡터를 도입하였고, $300{\mu}g/ml$의 G418로 12일간 선별하였다. PCR을 이용하여 선별된 colony들을 분석한 결과, 벡터가 도입되었음을 확인하였고, RT-PCR을 이용하여 사람 H-transferase mRNA가 발현하는 것을 확인하였다. 본 연구에서 확립된 세포주는 사람 H-transferase가 과발현하는 형질 전환돼지의 생산에 이용될 수 있을 것으로 생각된다.

• 생명과학회지
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• 제17권1호
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• pp.76-81
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• 2007

메주의 헥산 및 메탄올 추출물과 그것을 용매로 분획하여 얻어진 디클로로메탄, 에틸아세테이트, 부탄올, 물 분획물들에 의한 SOS chromotest 실험계에서 항돌연변이 효과 및 SRB assay를 이용한 인체 암세포들의 성장 억제 효과에 대하여 검토하였다. SOS chromotest 실험계의 경우, 첨가농도 $100{\mu}g/assay$에서 메주의 디클로로메탄 및 에틸아세테이트 분획물은 각각 91%, 91%로 MNNG에 대하여 강한 항돌연변이 효과를 나타났다. AGS 인체 위암세포와 Hep 3B 인체 간암세포를 이용하여 항암효과를 실험한 결과, 메주 에틸아세테이트분획물은 첨가농도 $200{\mu}g/assay$에서 각각 93% 및 91%로 암세포 성장을 크게 저해시켰고 그 저해 효과는 디클롤메탄 분획물보다 더 높았다. 인체 위암세포인 AGS를 이용한 SRB assay을 이용한 억제 효과 실험에서 메주의 에틸아세테이트 분획물은 첨가농도 2 mg/assay에서 인체 위암 및 간암세포의 증식을 각각 64% 및 71%로 억제하여 분회물들 중 가장 높은 저해효과를 보였고 헥산 및 디클로로메탄 분획물은 그 다음으로 억제 효과가 높았다. 이러한 결과는 된장 메탄올 추출물과 그 분획물의 결과와 유사한 경향을 보였으므로 메주와 된장이 여러 종류의 미생물, 곰팡이류와 세균류들에 의해 발효과정을 거치는 동안 원재료인 콩에서는 없었던 혹은 함량이 적은 성분들이 생성되거나 증가되어 항암효과를 나타내는 것으로 추정되어 진다.

• 한국식품조리과학회지
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• 제27권5호
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• pp.523-530
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• 2011

This study was conducted to investigate antimicrobial, antioxidant and anticancer activities of Opuntia humifusa (OH) petal extracts. The methanol and hexane extracts of OH petals showed their highest antimicrobial activity against Clostridium perfringens. The OH petal butanol fraction had the best antioxidative peroxynitrite scavenging activity among OH petal extracts. The DPPH scavenging activity of OH petals was lower than the peroxynitrite scavenging effect. The hexane and methanol fractions at a concentration of 200 ${\mu}g$/mL inhibited proliferation >80% in four kinds of human cervical cancer cells(B16F10, HepG2, HT-29 and MCF-7). In particular, the anticancer effect against B16F10 human skin cancer cells at the same concentration was higher than that in the other cancer cells.

• 한국식품조리과학회지
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• 제28권2호
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• pp.175-182
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• 2012

In this study, antibacterial activity and cytotoxicity of the extracts from pericarp and seed of $Vitis$ $coignetiea$, which were extracted with 0.1% HCl-60% ethanol, were analyzed. The antibacterial activity of the extracts was determined by paper disc diffusion method against food spoilage and food-borne pathogens. The pericarp extract showed high antibacterial activity against $Bacillus$ $cereus$, $Escherichia$ $coli$ O157:H7, and $Pseudomonas$ $aeruginosa$, and the seed extract represented the high antibacterial activity against $B.$ $cereus$, $E.$ $coli$ O157:H7, and $Staphylococcus$ $aureus$. The cytotoxicity of the $Vitis$ $coignetiea$ extract against human cancer cells was determined using the MTT assay and SRB assay. The pericarp extract represented strong growth-inhibition activity against G361 and Hep3B cells and the seed extract greatly inhibited the growth of HeLa and G361 cells in the MTT assay. In addition, the pericarp extract displayed a high inhibition activity against the growth of AGS cells and the seed extract greatly inhibited the growth of HeLa, Hep3B, and MCF7 cells in the SRB assay. Especially, the cytotoxicities of the seed extract against HeLa were significantly higher than those of the extract against other cancer cells at all test concentrations. This study demonstrates that the extract from pericarp and seed of $Vitis$ $coignetiea$ possess high antibacterial activity and cytotoxicity.

• Toxicological Research
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• 제25권1호
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• pp.23-28
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• 2009

Some of the edible plants like apricot kernel, flaxseed, and cassava generate hydrogen cyanide (HCN) when cyanogenic glycosides are hydrolyzed. Rhodanese (thiosulfate: cyanide sulfurtransferases of TSTs; EC: 2.8.1.1) is a sulfide-detoxifying enzymes that converts cyanides into thiocyanate and sulfite. This enzyme exists in a liver and kidneys in abundance. The present study is to evaluate the conversion of apricot cyanogenic glycosides into thiocyanate by human hepatic (HepG2) and colonal (HT-29) cells, and the induction of the enzymes in the rat. The effects of short term exposure of amygdalin to rats have also been investigated. Cytosolic, mitochondrial, and microsomal fractions from HepG2 and HT-29 cells and normal male Spraque-Dawley rats were used. When apricot kernel extract was used as substrate, the rhodanese activity in liver cells was higher than the activity in colon cells, both from established human cell line or animal tissue. The cytosolic fractions showed the highest rhodanese activity in all of the cells, exhibiting two to three times that of microsomal fractions. Moreover, the cell homogenates could metabolize apricot extract to thiocyanate suggesting cellular hydrolysis of cyanogenic glycoside to cyanide ion, followed by a sulfur transfer to thiocyanate. After the consumption of amygdalin for 14 days, growth of rats began to decrease relative to that of the control group though a significant change in thyroid has not been observed. The resulting data support the conversion to thiocyanate, which relate to the thyroid dysfunction caused by the chronic dietary intake of cyanide. Because Korean eats a lot of Brassicaceae vegetables such as Chinese cabbage and radish, the results of this study might indicate the involvement of rhodanese in prolonged exposure of cyanogenic glycosides.