Whereas apoptosis is a critical mode of cell deletion in normal organism development, apoptotic cells are also observed in tumor therapy. We therefore investigated the expression of apoptotic cells induced as a function of time and dose in murine A-20 lymphoma treated with cyclophosphamide in vivo, by H&E and TUNEL method. The percent of apoptotic cells were scored from tumor section using TUNEL method. The expression of apoptotic positive cell was determined over a 10-day period following treatment of the mice with 200 mg/kg. Apoptosis increased further with time, reaching a peak value between 12~24 hr (scored 6.7$\pm$1.0%~6.1$\pm$0.7%), and then slowly declined to background levels by 10 days after treatment. The dependence of induction of apoptosis on the dose of cyctophosphamide was determined by treatment with 50, 100, or 200 mg/kg at 12 hr after treatment. Apoptosis was dose dependent in that as the dose was increased the percentage of apoptosis increased. However, the increase in apoptosis at the lower dose used (50 mg/kg) was higher on a per unit dose basis than that at the higher dose used (200 mg/kg). This result show that the alkylating agent cyclophosphamide strongly induces apoptosis in murine lymphoma.
PARK In-Seok;SEOL Dong-Won;KIM Eun-Mi;KIM Young Ja;LEE Young-don
Korean Journal of Fisheries and Aquatic Sciences
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v.38
no.3
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pp.158-163
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2005
This paper deals with the histology of the barbels of striped sea catfish, Plotosus lineatus (Thunberg). This fish have eight noticeable barbels of two pairs on their maxillary and mandibular. Each barbel is composed of an epidermis, dermis and a central rod of cartilage. The epidermis in the middle part of the maxillary barbel is thicker than those on other parts, and formed of stratified epithelium which contains many cutaneous taste buds and a few small club cells. Number of taste buds increase on the middle and posterior part of each barbel. The dermis consists of loose connective tissue fibers which encloses blood vessels and bundles of nerve fibers. The barbels of this fish can be categorized into stiff and flexible types and are accessory, feeding and sensory structures. Thus we substantiate that they are gustatory receptor organs for this fish.
Although it has been known that TGF-${\beta}1$ acts as a crucial cofactor in osteoclast differentiation, its mode of action is still unclear. In the present study, we studied the effect of TGF-${\beta}1$ on the differentiation of osteoclast depending on the developmental stages. Murine bone marrow cells were induced to differentiate into mature osteoclasts in the presence of receptor activator of NF-${\kappa}B$ ligand (RANKL) and macrophage colony stimulating factor (M-CSF). In the early stage of the differentiation TRAP(-) mononuclear precursor cells were obtained from nonadherent M-CSF dependent bone marrow cells, which further differentiated into mature osteoclasts. TGF-${\beta}1$ stimulated osteoclast differentiation, which was stronger when cells were stimulated by TGF-${\beta}1$ in the early stage than the later differentiation. TGF-${\beta}1$ increased the expression of RANK and synergistically stimulated RANKL-induced activation of NF-${\kappa}B$ MAP kinase in TRAP(-) mononuclear precursor cells. These results suggest that activation of osteoclast differentiation by TGF-${\beta}1$ may be ascribed to the both increased expression and activation of RANK in the osteoclast differentiation, especially in the early stage of differentiation.
The present study was performed to investigate the effect of maternal hypothyroidism and puberty onset in female rat pups. To do this, we employed propylthiouracil (PTU) to prepare a hypothyroid rat model. Pregnant rats were treated with PTU (0.025%) in drinking water from gestational day 14 to postnatal day 21 of offspring. Comparison of general indices such as body and tissue weights and puberty indices such as vaginal opening (VO) and tissue histology between control and PTU-treated rats were conducted. There was no significant difference in the date of VO between control and PTU group. The body weights of the PTU group were significantly lower, only 36.8% of the control group (p<0.001). Although the absolute thyroid weight was not changed by PTU treatment, the relative weight increased significantly about 2.8 times (p<0.001), indicating that hypothyroidism was successfully induced. On the other hand, the absolute weights of the ovary and uterus were markedly decreased by PTU administration (p<0.001), and the relative weight was not significantly changed. The ovarian histology of PTU group revealed the advanced state of differentiation (i.e., presence of corpora lutea). Inversely, the uterine histology of PTU group showed underdeveloped structures compared those in control group. Taken together, the present study demonstrates that our maternal hypothyroidism model resulted in minimal effect on pubertal development symbolized by VO despite of huge retardation in somatic growth. More sophisticatedly designed hypothyroidism model will be helpful to achieve a better understanding of pubertal development and related disorders.
Feijen, J.;Eenink, M.J.D.;Olijslager, J.;Schakenraad, J.M.;Nieuwenhuis, P.;Molenaar, I.
Journal of Biomedical Engineering Research
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v.7
no.2
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pp.111-112
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1986
Radiation-induced fibrosarcoma tumors were grown on the flanks of C3H mice. The mice were divided into two groups. One group was injected with Photofrin II, intravenously (2.5mg/kg body weight). The other group received no Photofrin II. Mice from both groups were irradialed for approximately 15 minutes at 100, 300, or 500 mW/cm2 with the argon (488nm/514.5 nm), dye(628nm) and gold vapor (pulsed 628 nm) laser light. A photosensitizer behaved as an added absorber. Under our experimental conditions, the presence of Photolfrin II increased surface temperature by at least 40% and the temperature rise due to 300 mW/cm2 irradiation exceeded values for hyperthermia. Light and temperature distributions with depth were estimated by a computer model. The model demonstrated the influence of wavelength on the thermal process and proved to be a valuable tool to investigate internal temperature rise.
Metformin is the most widely used anti-diabetic drug that helps maintain normal blood glucose levels primarily by suppressing hepatic gluconeogenesis in type II diabetic patients. We previously found that metformin induces apoptotic death in H4IIE rat hepatocellular carcinoma cells. Despite its anti-diabetic roles, the effect of metformin on hepatic de novo lipogenesis (DNL) remains unclear. We investigated the effect of metformin on hepatic DNL and apoptotic cell death in H4IIE cells. Metformin treatment stimulated glucose consumption, lactate production, intracellular fat accumulation, and the expressions of lipogenic proteins. It also stimulated apoptosis but reduced autophagic responses. These metformin-induced changes were clearly reversed by compound C, an inhibitor of AMP-activated protein kinase (AMPK). Interestingly, metformin massively increased the production of reactive oxygen species (ROS), which was completely blocked by compound C. Metformin also stimulated the phosphorylation of p38 mitogen-activated protein kinase (p38MAPK). Finally, inhibition of p38MAPK mimicked the effects of compound C, and suppressed the metformin-induced fat accumulation and apoptosis. Taken together, metformin stimulates dysregulated glucose metabolism, intracellular fat accumulation, and apoptosis. Our findings suggest that metformin induces excessive glucose-induced DNL, oxidative stress by ROS generation, activation of AMPK and p38MAPK, suppression of autophagy, and ultimately apoptosis.
Purpose: The entry of bacteria or harmful substances through the epithelial seal of human gingival keratinocytes (HGKs) in the junctional epithelium (JE) is blocked by specialized intercellular junctions such as E-cadherin junctions (ECJs). However, the influence of roughened substrates, which may occur due to apical migration of the JE, root planing, or peri-implantitis, on the development of the ECJs of HGKs remains largely unknown. Methods: HGKs were cultured on substrates with varying levels of roughness, which were prepared by rubbing hydrophobic polystyrene dishes with silicon carbide papers. The activity of c-Jun N-terminal kinase (JNK) was inhibited with SP600125 or by transfection with JNK short hairpin RNA. The development of intercellular junctions was analyzed using scanning electron microscopy or confocal laser scanning microscopy after immunohistochemical staining of the cells for E-cadherin. The expression level of phospho-JNK was assessed by immunoblotting. Results: HGKs developed tight intercellular junctions devoid of wide intercellular gaps on smooth substrates and on rough substrates with low-nanometer dimensions (average roughness $[Ra]=121.3{\pm}13.4nm$), although the ECJs of HGKs on rough substrates with low-nanometer dimensions developed later than those of HGKs on smooth substrates. In contrast, HGKs developed short intercellular junctions with wide intercellular gaps on rough substrates with mid- or high-nanometer dimensions ($Ra=505.3{\pm}115.3nm$, $867.0{\pm}168.6nm$). Notably, the stability of the ECJs was low on the rough substrates, as demonstrated by the rapid destruction of the cell junction following calcium depletion. Inhibition of JNK activity promoted ECJ development in HGKs. JNK was closely associated with cortical actin in the regulation of ECJs in HGKs. Conclusions: These results indicate that on rough substrates with nanometer dimensions, the ECJs of HGKs develop slowly or defectively, and that this effect can be reversed by inhibiting JNK.
Raluca, Balica Amalia;Cimpean, Anca Maria;Cioca, Andreea;Cretu, Octavian;Mederle, Ovidiu;Ciolofan, Alexandru;Gaje, Pusa;Raica, Marius
Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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v.16
no.11
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pp.4549-4553
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2015
Background: Colorectal carcinoma (CRC) is one of the major causes of cancer death worldwide. Data from the literature indicate differences between the proliferation rate of endothelial cells relative to the morphology growth type, possibly due to origin of specimens (autopsy material, surgery fragments) or quantification methods. Vascular endothelial growth factor (VEGF) is a factor that stimulates the proliferation of endothelial cells. It is expressed in more than 90% of cases of metastatic CRC. Aim: The aim of this study was to evaluate the endothelial cell proliferation and VEGF expression in primary tumors and corresponding liver metastases. Materials and Methods: Our study included 24 recent biopsies of primary tumors and corresponding liver metastases of CRC cases. CD34/Ki67 double immunostaining and RNA scope assay for VEGF were performed. Results: In the primary tumors analysis of VEGFmRNA expression indicated no significant correlation with differentiation grade, proliferative and non-proliferative vessels in the intratumoral and peritumoral areas. In contrast, in the corresponding liver metastases, VEGFmRNA expression significantly correlated with the total number of non-proliferative vessels and total number of vessels. CD34/Ki67 double immunostaining in the cases with poorly differentiated carcinoma indicated a high number of proliferating endothelial cells in the peritumoral area and a low number in the intratumoral area for the primary tumor. Moderately differentiated carcinomas of colon showed no proliferating endothelial cells in the intratumoral area in half of the cases included in the study, for both, primary tumor and liver metastasis. In well differentiated CRCs, in primary tumors, a high proliferation rate of endothelial cells in the intratumoral area and a lower proliferation rate in the peritumoral area were found. A low value was found in corresponding liver metastasis. Conclusions: The absence of proliferative endothelial cells in half of the cases for the primary tumors and liver metastases in moderately differentiated carcinoma suggest a vascular mimicry phenomenon. The mismatch between the total number of vessels and endothelial proliferation in primary tumors indicate that a functional vascular network is already formed or the existence of some mechanisms influenced by other angiogenic factors.
The ultrastructure and histochemical characteristics of the submandibular gland was examined in the big white-toothed shrew, Crocidura lasiura. A submandibular gland of Crocidura lasiura was a mixed gland composed of serous and mucous acinar cells. Secretory granules from the acini were discharged through the intercalated duct, the granular duct and the striated duct into the oral cavity. Serous and mucous acinar cells and granular duct cells had large amount of rough endoplasmic reticulum, free ribosome and prominent Golgi apparatus at the basal cytoplasm of the cell, and many granules at the apical cytoplasm. Oval type serous granules had a homogeneously pale round shape of bead at the center. Mucous granules were distinct from those of the other mammalian species having variety patterns with several dense bands into homogeneous pale matrix. A serous-like secretory granules and myelin-like body were observed in the cytoplasm and the lumen of granular duct cells. The myelin-like body is a characteristic structure only reported in the salivary glands of two shrews, Suncus murinus and C. dsinezumi. Striated duct cell had numerous well-developed mitochondria but secretory granule was not shown at all.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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