Aflatoxins is a chemically diverse group of toxic secondary metabolites that are produced by fungi and often occur in agricultural commodities. Because of their wide range of toxic effects, Aflatoxins cause severe economic losses to farmers and livestock producers and pose a health to human consuming contaminated foods. Long term prospects for biotechnological control of Aflatoxins require elucidation of the specific steps and regulation of their biosynthetic pathways . Aflatoxin determinations can be approached many ways. It is essential to safely handle all experimental materials associated with aflatoxin analysis or aflatoxigenic fungi Visual screening of suspect samples, base on the presence of conidial head of the aspergillus flavus group, and screening samples for the presence of bright greenish yellow flourescence are not chemical tests and such screening techniques may allow aflactoxin contaminated lots into commerce. Microcolumn screening procedures should always be used in conjunction with a quantitative method. Several thin layer chromatography(TLC) and high performance liquid chromatography(HPLC) methods are suitable for quantitation and are in general use. Immunochemical Methods such as the ELISA or affinity column chromatography methods are being rapidly developed. The chemical and immunochemical methods can be reliable if care is taken, using suitable controls and personnel that are well trained . All analytical laboratories should stress safety and include suitable analytical validation procedure. Especially a worldwide enquiry was undertaken in recent to obtain up-to-date information about aflatoxin legislation in as many countries of the world as possible. The information concerns aflatoxin in foodstuffs. aflatoxin MI in dairy products, aflatoxins in animal feedstuffs. Limits and regulations for aflatoxin have been expended in recent with more countries having legislation on subject, more products, and more aflatoxins covered by this legislation.
Aflatoxins, produced by strains of Aspergillus flavus and Aspergillus parasiticus, can be found worldwide in corn, barley, peanuts, and other commodities. Among this group of toxins, aflatoxin B$_1$was realized to be one of the most potent environmental carcinogens, mutagens and teratogens. It is routinely monitored by methods such as thin layer chromatography, liquid chromatography, fluorodensitometric technique and radioimmunoassay. However, these assays are expensive, necessitate radioactive reagents, and require overnight incubation. In this study, the determination of fungal flora in several sorts cereals has been carried out in order to obtain an appropriate information of the population of fungi. The quantitative analysis of aflatoxin B$_1$has been carried out by High Performance Liquid Chromatography (HPLC) method and Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA). The results were summarized as follow: 1) From the 100 samples,313 colonies of fungi were isolated. Among the 313 colonies, 274 were possible to identify into 11 genera. The identified genera were Aspergillus Penicillium, Mucor, Rhizopus, Alternaria, Cladosorium, Fusarium, Circinella, Chrysosporium, Paecilomyces and Phoma. 2) Six of Aspergillus flavus were aflatoxin-producing strains. Aspergillus flavus isolated from sample barleys was contained the highest content (21.8 $\mu\textrm{g}$/ml) of aflatoxin B$_1$. 3) The yield of aflatoxin B$_1$-oxime compound was appromately 75%. Aflatoxin B$_1$-oxime-Human serum albumin was approved by formal consent as complete antigen. 4) Direct competitive ELISA permitted detection of 0.15 ng levels. In the quantitative microanalysis, ELISA was superior to HPLC method.
강남콩 지방질중 triglyceride를 TLC로 분리한 후 HPLC에 의하여 PN별로 분획하였다. 각 PN별 triglyceride 분획은 다시 GLC에 의하여 acyl 탄소수별 조성을 분석하고 PN별 획분의 지방산 조성도 분석하였다. 이들 결과를 종합하여 triglyceride의 조성을 추정한 결과, 강남콩의 triglyceride는 총 14종이었으며 C18:2 C18:3 C18:3, C18:2 C18:2 C18:3, C18:3 C18:3 C18:3이 주성분으로 각각 전체 triglyceride의 26.6%, 18.5%, 14.9%이었다.
Ji, Seung Hyun;Paul, Narayan Chandra;Deng, Jian Xin;Kim, Young Sook;Yun, Bong-Sik;Yu, Seung Hun
Mycobiology
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제41권4호
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pp.234-242
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2013
A total of 62 bacterial isolates were obtained from Gomsohang mud flat, Mohang mud flat, and Jeju Island, Republic of Korea. Among them, the isolate CNU114001 showed significant antagonistic activity against pathogenic fungi by dual culture method. The isolate CNU114001 was identified as Bacillus amyloliquefaciens by morphological observation and molecular data analysis, including 16SrDNA and gyraseA (gyrA) gene sequences. Antifungal substances of the isolate were extracted and purified by silica gel column chromatography, thin layer chromatography, and high performance liquid chromatography. The heat and UV ray stable compound was identified as iturin, a lipopeptide (LP). The isolate CNU114001 showed broad spectrum activity against 12 phytopathogenic fungi by dual culture method. The semi purified compound significantly inhibits the mycelial growth of pathogenic fungi (Alternaria panax, Botrytis cinera, Colletotrichum orbiculare, Penicillium digitatum, Pyricularia grisea and Sclerotinia sclerotiorum) at 200 ppm concentration. Spore germ tube elongation of Botrytis cinerea was inhibited by culture filtrate of the isolate. Crude antifungal substance showed antagonistic activity against cucumber scleotiorum rot in laboratory, and showed antagonistic activity against tomato gray mold, cucumber, and pumpkin powdery mildew in greenhouse condition.
Objectives: This study aimed to investigate the stability of a decoction using three herbal plants and their major components according to the storage conditions and periods. Materials and Methods: A three-herb mixture (1:1:1) of Glycyrrhiza uralensis Fischer, Artemisia capillaris Thunberg, and Poncirus trifoliata Rafinesqui was decocted and kept at room temperature ($25{\pm}2^{\circ}C$) or cold temperature ($4^{\circ}C$) for 0, 2, 4 or 8 weeks in liquid form in a plastic pack under dark conditions. At time points given, they were lyophilized. 200 mg of powdered samples were dissolved in 1 mL of 90% methanol and then applied to a high performance thin layer chromatography (HPTLC) with glycyrrhizin, 6,7-dimethoxycoumarin or poncirin for quantitative or qualitative analysis. Results: There were no gross changes in HPTLC-based compositional band-patterns of the three herbal mixture according to the storage conditions and period. The major components of each herb, glycyrrhizin, 6,7-dimethoxycoumarin and poncirin, showed slight time-dependent reduction in their contents both at room and cold temperature for 8 weeks. Conclusion: We could conclude that the current herbal decoction is generally safe for the stability at both RT or CT for at least 8 weeks. Nevertheless, we proposed that further advanced studies are required for more multiple herbal mixtures and longer storage periods.
The rhizome of Acorus calamus Linn. is commonly known as "Vacha" in indigenous systems of medicine. It is distributed in marshy tracts of Kashmir, Sirmaur (Himachal Pradesh), Manipur and the Naga hills. It is regularly cultivated in Koratagere Taluk in Karnataka and other parts of India. This study deals with the detailed pharmacognostical evaluation of the dried rhizomes of Acorus calamus collected from DehraDun (Uttaranchal), Lucknow (Uttar Pradesh). The commercial sample procured from Delhi market was also evaluated to observe the difference between collected and market samples. Dried rhizome is vertically compressed, pale yellow to dark brown and occasionally orangish brown in colour. Transverse section showed two distinct region with scattered, concentric vascular bundles surrounded by fibrous bundle sheath. Some vascular bundles just beneath the endodermis devoid of bundle sheath. Though the botanical and physico-chemical characters of all the samples were quite similar but some variations were observed in High Performance Thin Layer Chromatography (HPTLC) fingerprint profile, the essential oil content and total percentage of asarone which was found to be highest in Lucknow and lowest in Delhi market sample. These variations may be explained due to some edaphic factors or storage conditions. An attempt was also made to test antioxidant activity (in vitro) and it was found to be 88% at 0.2 g/ml concentration.
A total of 26 and 55 isolates of fungi were isolated from corn and wheat samples collected from different markets in Korea, respectively. The number of Penicillium isolates from corn and wheat was 9 and 33, respectively. The Penicillium species isolated from corn were P. chrysogenum (3 isolates) and P. oxalicum (6 isolates), and from wheat were P. aurantiogriseum (16 isolates), P. citrinum (1 isolate), P. commun (4 isolates), P. griseofulvum (1 isolate), P. verrucosum (7 isolates), and P. viridicatum (4 isolates). Production of major mycotoxins in the yeast extract sucrose medium cultures of Penicillium isolates was analysed. Penicillium cultures were extracted with chloroform and purified by thin-layer chromatograhy (TLC), and high performance liquid chromatography (HPLC). Among 9 isolates of Penicillium from corn, 2 isolates of P. chrysogenum produced patulin, 1 isolate of the fungus produced patulin and citrinin, 2 isolates of P. oxalicum produced penicillic acid, 4 isolates produced pencillic acid and griseofulvin. Of the 33 isolates of Penicillium from wheat, 6 isolates of P. aurantiogriseum produced patulin, 8 isolates produced penicillic acid, 1 isolate produced patulin and penicillic acid, 1 isolate of P. citrinum produced citrinin and patulin, 2 isolates of P. commun produced brefeldin A and patulin, 1 isolate of P. griseofulvum produced brefeldin A, griseofulvin and patulin. Five isolates of P. verrucosum produced patulin, 1 isolate of the fungus produced penicillic acid, and 3 isolates of P. viridicatium produced penicillic acid.
Purpose: The present study investigated the nutritional and organoleptic characteristics of two African leafy vegetables (ALVs)-jute mallow (Corchorus olitorius L) and cowpea (Vigna unguiculata)-at various drying temperatures. Methods: The thin-layer drying of cowpea leaves and jute mallow was studied at various temperatures ($40-100^{\circ}C$) in a convective laboratory dryer, and the nutrient profiles of the dried vegetables were determined. The nutrients considered were vitamins B2 and C, and ${\beta}$-carotene. The level of vitamin C was determined by high-performance liquid chromatography (HPLC), whereas the levels of ${\beta}$-carotene and vitamin B2 were determined by titration. Results: ${\beta}$-carotene was the most stable nutrient, whereas vitamin C was the least stable nutrient in both cowpea leaves and jute mallow. The drying parameters-temperature and time-revealed that temperature had the most profound effect on vegetable nutrient stability. Organoleptic tests were carried out on the fresh and dried vegetable; there were no significant differences in preference between the fresh and dried ALVs (95% confidence interval). Conclusions: The present study revealed that the vegetables can be preserved by drying, and the study could be used as a guide for effective drying of those vegetables.
Kwak, Dong Hoon;Kim, Sung Min;Lee, Dea Hoon;Kim, Ji Su;Kim, Sun Mi;Lee, Seo Ul;Jung, Kyu Yong;Seo, Byoung Boo;Choo, Young Kug
Molecules and Cells
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제20권3호
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pp.354-360
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2005
Neuronal damage subsequent to transient cerebral ischemia is a multifactorial process involving several overlapping mechanisms. Gangliosides, sialic acid-conjugated glycosphingolipids, reduce the severity of acute brain damage in vitro. However their in vivo effects on the cerebral cortex damaged by ischemic infarct are unknown. To assess the possible protective role of gangliosides we examined their expression in the cerebral cortex damaged by ischemic infarct in the rat. Ischemia was induced by middle cerebral artery (MCA) occlusion, and the resulting damage was observed by staining with 2, 3, 5-triphenylterazolium chloride (TTC). High-performance thin-layer chromatography (HPTLC) showed that gangliosides GM3 and GM1 increased in the damaged cerebral cortex, and immunofluorescence microscopy also revealed a significant change in expression of GM1. In addition, in situ hybridization demonstrated an increase in the mRNA for ganglioside GM3 synthase. These results suggest that gangliosides GM1 and GM3 may be synthesized in vivo to protect the cerebral cortex from ischemic damage.
A new HPLC-method for separation and quantitative determination of ginsenosides in Panax ginseng, Panax quinquefolium and in pharmaceutical drug preparations is elaborated. A reversed-phase-system with ${\mu}Bondapak\;C_{18}$ column (3.9 mm $I.D.{\times}30\;cm$) using acetonitrile-water (30:70) 2 ml/min and acetonitrile-water (18:82) 4 ml/min is suitable for the base-line separation of $Rb_1,\;Rb_2,\;Rc,\;Rd,\;Rf,\;Rg_2,\;respectively\;Re,\;Rg_1$ in 30 minutes. The ginsenosides are directly detected at 203 nm (without derivatization) with the LC-55 or LC-75 spectrophotometer (Perkin-Elmer) at $100\%$ transmission. Detection limit is 300 ng at a signal-to-noise ratio of 10:1. The ginsenosides-peak identification is carried out with HPTLC (high performance thin layer chromatography), with MIR-IR (multiple internal reflection-IR-spectros-copy) and with FD-MS (field desorption mass spectrometry). The calibration curve of each ginsenoside has a correlation coefficient very near to 1. Relative standard deviation for quantitative determinations depends upon the amount of ginsenosides and is approximately 1\%$ for ginsenoside contents of 1\%$. This method is adaptable for routine analysis in quality control laboratories.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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