• 생명과학회지
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• 제18권9호
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• pp.1312-1315
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• 2008

DAPI 염색을 이용하여 세포사멸 유도물질의 초고속스크리닝에 적합한 protocol을 제작하였다. Liquid handler에서 dispensing과 multilabel counter에서의 상대적인 fluorescent intensity를 측정하는 과정을 자동화한 protocol을 제작하였고, 이의 과정은 매우 효율적으로 가동되었음을 확인하였다. DAPI에 binding된 DNA의 intensity를 측정하는 조건검토에서 가장자리의 36개를 reading하지 않는 것이 edge effect를 줄일수 있는 것을 확인하였고, 0.1 sec reading으로 시간을 절약할 수 있었다. 이의 결과를 효과적으로 이용할 경우, 세포사멸 유도물질의 초고속스크리닝 또는 이에 적합한 스크리닝이 가능함을 확인하였다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제26권2호
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• pp.213-225
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• 2016

To reduce attrition in drug development, it is crucial to consider the development and implementation of translational phenotypic assays as well as decipher diverse molecular mechanisms of action for new molecular entities. High-throughput fluorescence and confocal microscopes with advanced analysis software have simplified the simultaneous identification and quantification of various cellular processes through what is now referred to as high-content screening (HCS). HCS permits automated identification of modifiers of accessible and biologically relevant targets and can thus be used to detect gene interactions or identify toxic pathways of drug candidates to improve drug discovery and development processes. In this review, we summarize several HCS-compatible, biochemical, and molecular biology-driven assays, including immunohistochemistry, RNAi, reporter gene assay, CRISPR-Cas9 system, and protein-protein interactions to assess a variety of cellular processes, including proliferation, morphological changes, protein expression, localization, post-translational modifications, and protein-protein interactions. These cell-based assay methods can be applied to not only 2D cell culture but also 3D cell culture systems in a high-throughput manner.

• 한국식품저장유통학회지
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• 제12권5호
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• pp.482-488
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• 2005

산화적인 스트레스(Oxidative stress)는 신경염증의 발병요인 중의 하나로 알려져 있다. 이에 본 연구는 약용곤충추출물을 이용하여 항산화 물질을 찾고자 초고속 적용가능한 스크리닝 방법을 적용하였다. 우선, 분자염증은 활성산소 관련의 물질과 밀접한 관련이 있으므로 이들의 억제를 동반하는 추출물을 먼저 선별하였다. 항산화 실험과 관련하여 DPPH (1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl), FRAP(Ferric ion reducing antioxidant power), HO (Hydroxyl radical) 소거, linoleic acid에 대한 항산화 활성 등을 assay하였고 hydrogen peroxide(H2O2)에 의한 세포사멸 억제 활성을 보기 위해 MTT assay를 실시하였다. 실험 결과, 사마귀, 늦반딧불이, 무당벌레에서 다른 library에 비교하여 항산화 활성이 높게 나타났다.