Licorice(Glycyrrhizae Radix et Rhizoma) is recorded as the root of Glycyrrhiza uralensis Fischer or Glycyrrhiza glabra Linne or Glycyrrhiza inflata Bat.(Leguminosae) in Korean Pharmacopoeia $9^{th}$ edition (KP9) and Chinese Pharmacopoeia 2005(CP2005), Glycyrrhiza uralensis Fischer or Glycyrrhiza glabra Linne in Japanese Pharmacopoeia 2005(JP2005). It is established the content standard of Glycyrrhizin 2.5 % and liquiritin 1% in KP9 and CP2005. But, according to the reports, all Licorice species were not sufficient for content standard of liquiritin 1.0% for licorice in KP9 and CP2005. It shows different content of liquiritin among G. uralensis, G. glabra and G. inflata. Also, it was reported liquiritin, liquiritin apioside are transformed into liquiritigenin by human internal flora. Therefore, we have studied for the pre-treatment condition and analytical method of liquiritigenin; It was good efficinet in 2M HCl reflux(1 hr) for hydrolysis and in methylene chloride for solvent fractionation. And 1% acetic acid in DW(A) and acetonitrile(B) with gradient condition as a mobile phase was most effective in HPLC analytical condition. According to these experimental methods, we have anlayzed content of liquiritigenin about 77 Licorice sample. In this research, it was also examined the content of liquiritin and liquiritigenin for Glycyrrhizae Radix related growing area. According to the results, we suggested the content standard of glycyrrhizin more than 2.5%, liquiritigenin more than 0.7%(after hydrolysis) of licorice.
The cereal grain crops have strong flexibility against adverse environment and they have various functional compounds. The objective of the present study was to screen phenolic compounds in sorghum [Sorghum bicolor (L.) Moench], foxtail millet (Setaria italica), common millet (Panicum miliaceum L.) by high performance liquid chromatography (HPLC) with photodiode array (PDA) detector. Sorghum contained the highest amount of phenolic compounds among three different crops (sorghum, foxtail millet, common millet). Especially Moktaksusu showed the highest amount of phenolic compounds concentrations and biggest regional differences. The comparison of average phenolic compounds in sorghums by regions showed order to Milyang ($963.3\;{\mu}g{\cdot}g^{-1}$), Yeongyang ($923.1\;{\mu}g{\cdot}g^{-1}$), Gijang ($831.3\;{\mu}g{\cdot}g^{-1}$) and Bonghwa ($735.6\;{\mu}g{\cdot}g^{-1}$). Among the sorghum cultivars, Moktaksusu ($1407.9\;{\mu}g{\cdot}g^{-1}$) had the highest concentration of phenolic compounds. The average phenolic compounds of foxtail millets showed similar amount among Milyang ($319.0\;{\mu}g{\cdot}g^{-1}$), Gijang ($288.1\;{\mu}g{\cdot}g^{-1}$) and Bonghwa ($281.9\;{\mu}g{\cdot}g^{-1}$) areas. The phenolic compounds of Yeongyang ($246.6\;{\mu}g{\cdot}g^{-1}$) slightly low and that showed similar concentrations among three different regions. The concentration of phenolic compounds in foxtail millets, Chungchajo ($335.6\;{\mu}g{\cdot}g^{-1}$) showed the highest concentrations. The average phenolic compounds of common millets showed the highest concentrations in Milyang ($305.5\;{\mu}g{\cdot}g^{-1}$), Bonghwa ($262.0\;{\mu}g{\cdot}g^{-1}$), Gijang ($195.1\;{\mu}g{\cdot}g^{-1}$), Yeongyang ($237.2\;{\mu}g{\cdot}g^{-1}$) in decreasing order. The concentration of phenolic compounds of common millets was the highest in the Norangchalgijang ($337.0\;{\mu}g{\cdot}g^{-1}$), Hwanggumgijang ($250.0\;{\mu}g{\cdot}g^{-1}$) was also relatively higher than others. The results of this study will provide basic information for breeding sorghums, foxtail millets and common millets with higher phenolic compound concentrations.
1-Nitropyrene (1-NP), 2-NP and 2-nitrofluoranthene (2-NFR) are useful markers for studying the atmospheric behaviors of polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs) and nitropolycyclic aromatic hydrocarbons (NPAHs). However, present methods for measuring trace levels of these compounds are lesssensitive and laborious. Here we describe several improvements to a previously reported high-performance liquid chromatography-chemiluminescence detection system that allows it to determine trace levels of 1-, 2-NPs and 2-NFR. The proposed system was equipped with a reducer column packed with Pt/Rh instead of zinc whose life-time was limited. The combination of Cosmosil MS-II (monomeric ODS) and AR-II (polymeric ODS) columns was used instead of polymeric ODS columns as the separator column to improve the separation. An ethanol mixture with acetate buffer (pH 5.5) was used in place of an acetonitrile mixture with the same buffer to activate the reducer column. The same ethanol mixture was used as the mobile phase for the clean-up column. The switching time of the column switching valve was optimized to concentrate the amino-derivatives of above NPAHs quantitatively on the concentrator column. The concentrations of bis(2,4,6-trichlorophenly) oxalate and hydrogen peroxide in the chemiluminescence reagent solution were optimized to 0.4 mM and 30 mM, respectively, to increase the sensitivity. Under the above conditions, the detection limits (S/N=3) of 1-, 2-NPs and 2-NFR were 1 fmol (0.25 pg), 10 fmol (2.5 pg) and 4 fmol (1 pg), respectively. The proposed system was effectively used to determine trace levels of 1-, 2-NPs and 2-NFR in airborne particulates collected at Noto Peninsula. The atmospheric concentrations of 1-, 2-NPs and 2-NFR were not more than sub pg $m^{-3}$ levels. They were higher in winter (January) than in summer (July). In both seasons, the concentrations were in decreasing order, [2-NFR]>[1-NP]>[2-NP].
Recently, cancer incidence in modern society is increasing sharply. DNA damage is caused by intrinsic or extrinsic factors in the human body, cells protect themselves by defense mechanism against DNA damage. Also, Aberrant DNA and deficient DNA repair are closely associated with various diseases, including aging and cancer. Researchers are interested in search for proper materials to inhibition for DNA damage. As knew the side effects of synthetic antioxidant, some researches have been conducted about cancer prevention materials derived from nature. Root of Smilax china, in Liliaceae, is used detoxification and tumor treatments traditionally. However, studies on the inhibitory effect of DNA damage haven't progressed. In this study, antioxidant activity and protective effects on oxidative DNA damage of S. china root were confirmed, relationship between those activities and contents of phenolic compounds in plants were established. S. china root effectively removed 1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl radicals and 2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonic acid radicals. The quantification and identification of phenolic compounds were confirmed by high performance liquid chromatography analysis, its antioxidant activity was associated with some phenolic compounds. In addition, protective effects against hydroxyl radicals and ferrous ion-induced oxidative DNA damage were confirmed in plasmid DNA. In the cellular levels, S. china root suppressed the expression of ${\gamma}$-H2AX and p53 protein in NIH 3T3. Besides, S. china root suppressed H2AX and p53 mRNA levels. In conclusion, S. china root had the effect on DNA protection and antioxidant.
Catecholamines, serotonin and their metabolites were measured in the posterior hypothalamus of urethane-anesthetized normotensive Wistar Kyoto rats (WKY) and spontaneously hypertensive rats (SHR) using brain microdialysis which is a recently developed experimental method to measure the release of neurotransmitters and their metabolites at the localized brain area in vivo. Microdialysis probe was implanted stereotaxically to the rat posterior hypothalamus and perfused by Ringer's solution. Monoamines and their metabolites were quantified by reverse phase high performance liquid chromatography with electrochemical detection. In vitro recovery test of microdialysis showed that there exist inverse relationship between the perfusion flow rate and the relative recovery of neurochemical compounds. The estimated extracellular concentration of dopamine was about 32 nM, of norepinephrine 50 nM, of epinephrine 50 nM, of serotonin 73 nM, of 3, 4-dihydroxyphenylacetic acid (DOPAC) 281 nM, of homovanillic acid (HVA) 181 nM, and of 5-hydroxyindoleacetic acid (5HIAA) 3767 nM in the hypothalamic perfusate of the normotensive rat. There was no difference in the basal level of monoamines between the SHR and the WKY. In contrast, the level of DOPAC, HVA and 5HIAA in SHR was higher than that in the WKY, This study demonstrated that the microdialysis technique should be an applicable tool for in vivo measurement of central neurochemical substances.
This study was performed to investigate aflatoxin reduction resulting from the pre-treatment and the cooking and processing of corn. Aflatoxin was produced by Aspergillus parasiticus ATCC 15517 on a type of corn imported from the United States. The aflatoxin-produced com (AC) was pre-treated in three ways in order to reduce aflatoxin: exposure to sun light for 7 days (SC); ultraviolet irradiation for 56 hours (UC); and washing with water three times (WC). Four kinds of cooking and processing methods (boiling, steaming, baking, and popping) were used to reduce aflatoxin in the AC control, SC, UC, and WC. These treatments produced com gruel, com cakes, com bread and popcorn. The aflatoxin content in the samples was determined by high performance liquid chromatography. The total aflatoxin level of the AC was significantly decreased by sun light and UV (p<0.05), and decreased by washing. After cooking and processing the AC, SC, UC, and WC, and averaging the total aflatoxin levels in the final products, the greatest reduction was found in the com gruel, then the popcorn, then the corn cakes, and the least reduction in the com bread. These results indicate that sunlight and ultraviolet energy could be effective factors in aflatokin degradation in corn before cooking and processing. This study also indicates that boiling, steaming, baking and popping were helpful in reducing the aflatoxin level in the com and that the most helpful factors were exposure time to heat. More research is needed to reduce the aflatoxin level down to below the maximum tolerable level of aflatoxin in foods.
This study was perfonned to investigate the possible effect of Bacillus subtilis which is the predominant species of bacteria in Korean soy sauce, soy paste, and Meju (soybean cake) on the growth and aflatoxin production of Aspergillus parasiticus ATCC 15517. The microorganisms were grown in a modified APT broth and incubated at $30^{\circ}C$ for 12 days. Aflatoxins were determined using high performance liquid chromatography (HPLC). A remarkable inhibition of the growth of Aspergillus parasiticus was observed during the incubation period when in the presence of B. subtilis (mixed culture). Dry mycelial weight in the mixed culture was significantly reduced by 85.3% in comparison to the control at the end of the incubation period (p<0.01). Lower levels of aflatoxins were found in the mixed culture than in the monoculture. At the end of the incubation period aflatoxin production was significantly inhibited by more than 50% (p<0.05). These results indicate that B. subtilis mainly inhibites the growth and aflatoxin production of toxigenic Aspergillus in Meju, soy sauce and soy paste. Although its effect on aflatoxin production was less pronounced, we could expect more inhibition by another bacteria related with fermentation in Meju.
Deoxynivalenol (DON) and zearalenone (ZEN) are naturally occurring toxins produced by Fusarium species, which may grow on cereals. The aims of this study were to determine the incidence and contamination levels of DON and ZEN in cereal products. Seventy samples of cereal products were randomly selected from retail outlets during 2005 and 2006. DON and ZEN were analyzed by using high performance liquid chromatography with fluorescence and UV-detector, respectively. Detection limits were $4.4{\mu}g\;kg^{-1}$ for DON and $3.4{\mu}g\;kg^{-1}$ for ZEN. DON and ZEN were detected in 37 and 17, respectively, of the 70 samples, but the levels found were very low. In particular, out of 70 samples, 12 samples of corn and barley were co-contaminated with DON and ZEN, with levels ranging from 5.6 to $1842.3{\mu}g\;kg^{-1}$ for DON and 12.1 to $174.9{\mu}g\;kg^{-1}$ for ZEN, respectively. However, DON and ZEN were not detected in breakfast cereals and wheat flour. The highest level was found in dried corn kernel samples that confirmed by LC-MS. This study show that DON and ZEN co-contaminate with low levels in cereal products.
The triglyceride composition of Korean hazel nut (Corylus heterophylla Fisch. var. Japonica koidz) was determined by high performance liquid chromatography (HPLC) using a $C_{18}$ micro Bondapack column with acetonitril-chloroform-tetrahydrofuran(75 : 15 : 10, v/v/v) and acetonitril-tetrahydrofuran (70 : 30, v/v) solvent mixtures as mobile phase. The triglyceride consisted of 4.14% $C_{38}$, 5.23% $C_{40}$, 10.03% $C_{42}$, 24.02% $C_{44}$, 48.73% $C_{46}$ and 7.85% $C_{48}$ with acetonitril-chloroform-tetrahydrofuran (75 : 15 : 10, v/v/v) mobile phase and 4.51% $C_{38}$, 5.98% $C_{40}$, 11.45% $C_{42}$, 25.14% $C_{44}$ and 52.92% $C_{46}$ with acetonitril-tetrahydrofuran (70 : 30, v/v) mobile phase.
This study was aimed at investigating the natural occurrence of caffeine, theobromine, and theophylline in tea leaves. Sample clean-up was based on a simple solid phase extraction (SPE) treatment, and simultaneous analysis was performed by high performance liquid chromatography (HPLC). This method showed good results in terms of linearity, recovery, precision, limit of detection (LOD), and limit of quantitation (LOQ). The caffeine, theobromine, and theophylline contents of tea leaves (n = 228) ranged from 5.4 to 58.2 mg/g, from not detected to 11.2 mg/g, and from not detected to 0.7 mg/g, respectively. The results obtained in this study can be used as fundamental data of caffeine, theobromine, and theophylline contents in tea leaves.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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