Kim, Hyun-Lee;Shin, Eun-Kyoung;Kim, Hong-Man;Go, Ha-Young;Roh, Jae-Sook;Bae, Jee-Hyeon;Lee, Kang-Seok
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제17권10호
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pp.1708-1711
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2007
The Streptomyces coelicolor M145 genome harbors six copies of divergent rRNA operons that differ at ${\sim}0.2%$ and ${\sim}0.6%$ of the nucleotide positions in small subunit (SSU) and large subunit (LSD) rRNA genes, respectively. When these rRNA genes are expressed, a single cell may harbor three different kinds of SSU rRNA and five kinds of LSU rRNA. Primer extension analyses revealed that all of the heterogeneous rRNA molecules are expressed and assembled into ribosomes. This finding and the maintenance of the intragenomic variability of rRNA operons imply the existence of functional divergence of rRNA species in this developmentally complex microorgamsm.
Antisense transcripts were initially identified as transcriptional noise, but have since been reported to play an important role in the quality control of miRNA functions. In this report, we tested the hypothesis that heterogeneous nuclear ribonucleoprotein K (hnRNPK) regulates miRNA function via competitive endogenous RNAs, such as pseudogenes, long non-coding RNAs, and antisense transcripts. Based on analyses of RNA sequencing data, the knockdown of hnRNPK decreased the antisense PTOV1-AS1 transcript which harbors five binding sites for miR-1207-5p. We identified heme oxygenase-1 (HO-1) mRNA as a novel target of miR-1207-5p by western blotting and Ago2 immunoprecipitation. The knockdown of hnRNPK or PTOV1-AS1 suppressed HO-1 expression by increasing the enrichment of HO-1 mRNA in miR-1207-5p-mediated miRISC. Downregulation of HO-1 by a miR-1207-5p mimic or knockdown of hnRNPK and PTOV1-AS1 inhibited the proliferation and clonogenic ability of HeLa cells. Taken together, our results demonstrate that hnRNPK-regulated PTOV1-AS1 modulates HO-1 expression via miR-1207-5p.
Genetic diversity among Pseudomonas syringae pv. morsprunorum isolates from Prunus mume in Korea and Japan was investigated by comparative sequence analysis of the 16S rRNA gene. The strains included 24 field isolates recovered from P. mume in Korea along with seven Japanese strains. Two strains isolated from P. salicina in Japan, one strain from P. avium in the United Kingdom, and the pathotype strain were also used for comparison with their 16S rRNA gene sequences. Nearly complete 16S rRNA gene sequences were sequenced in all 35 strains, and three sequence types, designated types I, II and III, were identified. Eleven strains consisting of five Korean isolates, five Japanese strains, and one strain from the United Kingdom belonged to type I, whereas the pathotype strain and another 19 Korean isolates belonged to type III. Another four Japanese strains belonged to type II. Type I showed 98.9% sequence homology with type III. Type I and II had only two heterogeneous bases. The 16S rRNA sequence types were correlated with the races of P. syringae pv. morsprunorum. Type I and II strains belonged to race 1, whereas type III isolates were included in race 2. Sequence analyses of the 16S rRNA gene from P. syringae pv. morsprunorum were useful in identifying the races and can further be used for epidemiological surveillance of this pathogen.
Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein E1(hnRNP E1) is one of the primary pre-mRNA binding proteins in human cells. It consists of 356 amino acid residues and harbors three hnRNP K homology(KH) domains that mediate RNA-binding. The hnRNP E1 protein was shown to play important roles in mRNA stabilization and translational control. In order to enhance our understanding of the cellular functions of hnRNP E1, we searched for interacting proteins through a yeast two-hybrid screening while using HeLa cDNA library as target. One of the cDNA clones was found to be human ribosomal protein L18a cDNA(GenBank accession number BC071920). We demonstrated in this study that human ribosomal protein L18a, a constituent of ribosomal protein large subunit, interacts specifically with hnRNP E1 in the yeast two-hybrid system. Such an interaction was observed for the first time in this study, and was also verified by biochemical assay.
Background: Dysregulation of miRNA expression may be used as a biomarker for specific tumours because it may contribute to development of cancer. Circulating miRNA profiles have been highlighted for their potential as predictive markers in heterogeneous diseases such as breast cancer. In the literature, there is evidence that miR-195 levels are differentially expressed pre- and post-operative periods in breast cancer patients. At the same time, miRNA expression levels may vary because of ethnic origins. This study aimed to determine expression levels and potential roles of miR-195 in Turkish breast cancer patients. Materials and Methods: The expression patterns of miR-195 were initially examined in breast cancer tissues (luminal A and B type) (n=96). Subsequently, blood samples were prospectively collected from preoperative and postoperative Turkish breast cancer patients and disease free controls. Total RNA was isolated, and the expression level of miR-195 was quantified by real-time PCR. Results: We found that miR-195 level was altered in Turkish breast cancer patients, with down-regulation evident in breast cancer tissues compared to normal adjacent specimens. Furthermore, circulating levels of miR-195 was significantly decreased in post-operative blood samples compared with pre-operative levels (p=0.01 and <0.05). However, miR-195 was significantly increased in pre-operative blood samples of the luminal B type (p=0.04 and <0.05). Conclusions: This study represents the first report of a miR-195 expression profile in Turkish breast cancer patients. Our data suggests that miR-195 levels might be a clinically useful biomarker in the earliest stage of Turkish breast cancer patients.
Han, Hyun-Ja;Lee, Deok-Chan;Kim, Do-Hyung;Choi, Hye Sung;Jung, Sung Hee;Kim, Jin Woo
Fisheries and Aquatic Sciences
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제16권2호
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pp.125-129
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2013
Vibrio ichthyoenteri is a facultatively anaerobic gram-negative bacterium with straight or slightly curved rod morphology. The bacterium is an etiological agent of bacterial enteritis of Olive flounder Paralichthys olivaceus. Only a handful of studies, using a limited number of isolates, have investigated the phenotypic and genetic characteristics of V. ichthyoenteri. We isolated 40 V. ichthyoenteri strains, identified based on the 16S rRNA gene sequence, from the diseased flounder larvae and investigated the API 20E and ZYM profiles. The isolates exhibited highly divergent phenotypic characteristics regardless of sampling time point and location, and fish age. Essential enzymes produced by V. ichthyoenteri seemed to be alkaline phosphatase, leucine arylamidase, and N-acetyl-${\beta}$-glucosaminidase. This study reveals a much greater enzymatic and biochemical phenotype diversity than has been evident to date. These results suggest that a given population of V. ichthyoenteri could be heterogeneous in terms of its phenotypic characteristics.
Mico-Martinez, Pablo;Alminana-Pastor, Pedro J.;Alpiste-Illueca, Francisco;Lopez-Roldan, Andres
Journal of Periodontal and Implant Science
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제51권6호
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pp.386-397
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2021
Purpose: MicroRNAs (miRNAs) are epigenetic post-transcriptional regulators that modulate gene expression and have been identified as biomarkers for several diseases, including cancer. This study aimed to systematically review the relationship between miRNAs and periodontal disease in humans, and to evaluate the potential of miRNAs as diagnostic and prognostic biomarkers of disease. Methods: The review was conducted following the Preferred Reporting Items for Systematic Reviews and Meta-Analysis guidelines (reference number CRD42020180683). The MEDLINE, Scopus, Cochrane Library, Embase, Web of Science, and SciELO databases were searched for clinical studies conducted in humans investigating periodontal diseases and miRNAs. Expression levels of miRNAs across the different groups were analysed using the collected data. Results: A total of 1,299 references were identified in the initial literature search, and 23 articles were finally included in the review. The study designs were heterogeneous, which prevented a meta-analysis of the data. Most of the studies compared miRNA expression levels between patients with periodontitis and healthy controls. The most widely researched miRNA in periodontal diseases was miR-146a. Most studies reported higher expression levels of miR-146a in patients with periodontitis than in healthy controls. In addition, many studies also focused on identifying target genes of the differentially expressed miRNAs that were significantly related to periodontal inflammation. Conclusions: The results of the studies that we analysed are promising, but diagnostic tests are needed to confirm the use of miRNAs as biomarkers to monitor and aid in the early diagnosis of periodontitis in clinical practice.
A new method was developed for the rapid analysis of diverse bacterial species in the natural environment. Our method is based on PCR-single-strands-conformation polymorphism (PCR-SSCP) and selective isolation technique of single-stranded DNA. Variable V3 fragments of 16S rDNA were amplified by PCR with bacterial 16S rDNA primers, where one of the primers was biotinylated at the 5'-end. The biotinylated strands of the PCR products were selectively isolated by using streptavidin paramagnetic particles and a magnetic stand, to prevent SSCP analysis producing heteroduplexes from heterogeneous DNA samples. The selected strands were separated by electrophoresis on a polyacrylamide gel, and detected by silver staining. Analysis of PCR products from 8 bacterial strains demonstrated their characteristic DNA band patterns. In addition, changes in the structure of the bacterial community and species diversity in the microcosm treated with phenol could be monitored. After 3 weeks of incubation, phenol and its intermediate, 2-hydroxy-muconic-semialdehyde, were degraded by indigenous bacteria. These dominating bacterial populations were identified as strong bands on an SSCP gel. Therefore, this study provides useful tools for microbial community analysis of natural habitats.
hnRNP K 단백질은 hnRNP 복합체를 구성하는 핵단백질들 중의 하나이며 시토신이 많은 RNA/DNA sequence에 잘 결합한다. 이 단백질은 핵 내에서만 머무르지 않고 핵과 세포질을 왕복하는 특징을 지니고 있다. hnRNP K의 기능을 조사하기 위하여 우선 hnRNP K와 상호 결합하는 세포내 단백질을 찾아내고자 하였다. 이를 위하여 본 연구에서는 이스트 two-hybrid 시스템을 사용하여 HeLa CDNA librar를 탐색하였다. 그 결과 얻은 클론들 중에는 사람의 hnRNP E1 (poly(rC) binding protein 1) cDNA (GenBank accession number XM_031585) 클론이 포함되어 있었다. 본 논문에서는 이스트 two-hybrid 시스템과 in vitro에서의 생화학적 실험을 통하여 hnRNP E1은 hnRNP K와 특이적으로 상호 결합한다는 것을 밝혔다.
Acute myeloid leukemia (AML) is a heterogeneous disease caused by distinctive mutations in individual patients; therefore, each patient may display different cell-type compositions. Although most patients with AML achieve complete remission (CR) through intensive chemotherapy, the likelihood of relapse remains high. Several studies have attempted to characterize the genetic and cellular heterogeneity of AML; however, our understanding of the cellular heterogeneity of AML remains limited. In this study, we performed single-cell RNA sequencing (scRNAseq) of bone marrow-derived mononuclear cells obtained from same patients at different AML stages (diagnosis, CR, and relapse). We found that hematopoietic stem cells (HSCs) at diagnosis were abnormal compared to normal HSCs. By improving the detection of the DNMT3A R882 mutation with targeted scRNAseq, we identified that DNMT3A-mutant cells that mainly remained were granulocyte-monocyte progenitors (GMPs) or lymphoid-primed multipotential progenitors (LMPPs) from CR to relapse and that DNMT3A-mutant cells have gene signatures related to AML and leukemic cells. Copy number variation analysis at the single-cell level indicated that the cell type that possesses DNMT3A mutations is an important factor in AML relapse and that GMP and LMPP cells can affect relapse in patients with AML. This study advances our understanding of the role of DNMT3A in AML relapse and our approach can be applied to predict treatment outcomes.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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