Park, Cheol-beom;Seong, Je-kyung;Lee, In-se;Lee, Heungshik S.;Lee, Joon-sup;Yoon, Yeo-sung
Korean Journal of Veterinary Research
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v.41
no.3
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pp.281-285
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2001
This study was performed to investigate the gross anatomical features and microscopical structures of the hemal nodes and the hemolymph nodes in the sheep. The hemal nodes and hemolymph nodes were observed mainly in periphery of the thoracic and abdominal aortae of the animals. The size of hemal nodes was generally smaller than that of the hemolymph nodes, and the shape of the both organs was spherical or ovoid. The color of the hemal nodes was red, while that of the hemolymph nodes was grary with red bands. The hemal nodes were surrounded by a relatively thick connective tissue capsule and there were extensive subcapsular sinuses distended by a great number of erythrocytes. Although a few number of lymphatic nodules and small areas of diffuse lymphatic tissues were observed in the parenchyma, no typical cortex and medulla were defined in the hemal node. Small numbers of blood vessels were found at the connective tissue capsule but lymph vessel was not observed microscopically in this organ. The hemolymph nodes were covered by a relatively thick connective tissue capsule and there was a hilus in each node. The parenchyma was divided into cortex and medulla. The cortex was composed of a few numbers of lymphatic nodules and some diffuse lymphatic tissues. The medulla comprised medullary sinuses and cords. Afferent and efferent lymph vessels were observed at the periphery of the capsule adn the hilus, respectively. The subcapsular and medullary sinuses were not extensive but filled with small numbers of erythrocytes. The stroma of hemal node and hemolymph node was composed of reticular cells and fibers, and the capsule and trabecula consisted of collagenous fibers with smooth muscle fibers.
Insect cell culture system has been demonstrated the effective means of producing medical and agricultural products. Furthermore, Fetal bovine serum (FBS) is in wide use in insect cell culture. Silkworm hemolymph was tested to develop as a substitute for FBS and was effective in insect cell growth. Hemolymph is oxidized and darkens visibly during the collection from silkworms due to the activity of tyrosinase in it. Toxic quinones are produced by the oxidation and consequently inhibit the cell growth. Heat treatment can be used to prevent the oxidation; however, the oxidation may occur during the collection of hemolymph before it is heat-treated. Hemolymphs collected from 257 different strains of silkworms were examined to select the slowly oxidized hemolymphs. Hemolymphs collected from mutant strains such as $Y_4$, TBO and $wE^b$ showed relatively slow color changes. Oxidation rates of the hemolymphs were measured by the absorbance change using a spectrophotometer. The absorbance of mutant hemolymph reached the saturation value at $20^{\circ}C$ in each 330 min ($Y_4$), 360 min (TBO) and 450 min ($wE^b$) min, whereas the total oxidation time of the wild-type (Baekokjam) hemolymph at the same temperature was 120 min. The cell growth in the medium supplemented with mutant species hemolmph was more effective that in the medium supplemented with Baekokjam species hemolymph.
A blue biliprotein, insecticyanin (INS), has been purified from the last instar larval hemolymph of Agrius convolvuli by ultracentrifugation, Sephadex G-100 gel permeation chromatography, and preparative electrophoresis. The molecular mass of INS was estimated to be 26 kDa and the N-terminal sequence of INS revealed high similarity to that of Manduca sexta. Results of Western blotting and autoradiography indicated that INS is synthesized by the epidermis and released into the hemolymph. In contrast to the INS reported in other insects, Agrius convolvuli INS contained a small amount of lipid, predominately consisting of triacylglycerol. Subcellular localization of INS was determined using protein-A gold particles linked to secondary antibodies (anti-rabbit Ig). INS was heavily accumulated in the cytoplasmic inclusion body (CIB). CIBs showed a variety of shapes from rod to globule and generally surrounded the nucleus. They were mostly located near the basement membrane and especially abundant in the intersegmental membrane.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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v.5
no.2
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pp.189-194
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2002
Silkworm diseases are major constraint in silk cocoon production. Among silkworm diseases, white muscar-dine is highly contagious and most common in winter and rainy seasons. It is suggested that hemocytes involve in defense against invasion of Beauveria bassi-ana and systemic fungicide/chemicals prevent the proliferation of fungi in the hemolymph or preventing the growth of the fungi in the body cavity through enhancing the hemocyte mediated defense response. In the present study the influence of systemic fungicide on hematological changes in silkworms infected with Beauveria bassiana was reported. It is observed that the total hemocyte counts increased in the hemolymph up to 5 days post inoculation in systemic fungicide treated batches while in the inoculated control the increase was up to 3 days indicating the positive hemocyte mediated response in silkworm treated with systemic fungicide. After 2 days in the inoculated control as the multiplication and growth of mycelia increased, defense capacity of the silkworm was decreased. The biochemical changes were also observed in the hemolymph of silkworm infected with B. bassiana. In silkworm infected with Beauveria bassi-ana, the total protein content increased whereas total carbohydrate and total lipids decreased as the infection progresses. In the case of systemic fungicide treated batches the increase in total protein content was comparatively higher and decrease in total carbohydrate and lipids were comparatively lower than the inoculated control.
In order to enhance the repair of defects in articular cartilage via cell therapy with autologous chondrocytes, as well as with periosteum-derived progenitor cells (PDPCs), silkworm hemolymph (SH) and a variety of cartilage-specific extracellular matrices (ECMs) including type II collagen, proline, chondroitin 4-sulfate, and chondroitin 6-sulfate were assessed with regard to their efficacy as media supplements. SH, a known anti-apoptotic agent, was found to enhance cell growth, as was shown by the results of a 3-(4,5-dimethylthiazol-2yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay. According to the results of reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) analyses, the cartilage-specific ECMs were found to stimulate the expression of hyaline cartilage-specific genes, most notably type II collagen and Sox9, in monolayer cultures of PDPCs.
We have previously shown that the addition of silkworm hemolymph to a culture medium increases the longevity of insect and mammalian cells by inhibiting apoptosis. This indicates that the component which inhibits apoptosis is contained in the silkworm hemolymph, The apoptosis-inhibiting component was isolated from silkwonn hemolymph and characterized in our previous study. A database search using the N-terminal amino acid sequence of this component as a template resulted in a 95% homology with a low molecular weight lipoprotein, the so called ’30K protein' of unknown function. In this study, the 30K protein gene was expressed in mammalian and insect cells to confirm the apoptosis-inhibiting effect. The overexpression of 30K protein in mammalian cell inhibited the staurosporin-induced apoptosis by the prevention of the activation of caspase 3. Using an Autographa californicanuclear polyhedrosis virus (AcNPV) system, the 30K protein was overexpressed also in insect cells. The expression of the 30K protein increased the longevity of baculovirus-infected insect cells by inhibiting apoptosis. These results suggest that the 30K protein is a novel anti-apoptotic protein.
Lipophorin of Lymuntrn'adispor L. has been purified by KBr density gradient ultracentrifugation. The properties and synthetic site of lipophorin and quantitative change of lipophorin during development have been determined using electrophoresis and immunological analysis. Lipophorin is composed of ho subunits. apo-Lpl (230.000), ago-Lpll (49,000). ann contains carbohydrates and lipids. Anti-lipophorin showed positive reactions with fat body extract and ovary extract but not with gut extract. The concentration of lipophorin in hemolymph showed gradual decrease during larval and pupal stages. Also. fat body released lipophorin into medium. Immunological test showed some partial identity between lipophorin of Lymantpia dispar and hemolymph proteins (probably lipophorin) of Hyphontria cuneo and Galleria metlonefla.
Purpose: Obesity, a worldwide epidemic, is associated with insulin resistance, hyperlipidemia, hypertension, cardiovascular disease, and certain cancers. Many strategies, including natural alternative anti-obesity agents, are used widely to prevent obesity. This study examined the effects of silkworm hemolymph on the weight control of C57BL/6N mice fed with a high-fat diet. Methods: The mice were divided into five groups: normal group (N), high-fat diet group (HFC), high-fat diet and silkworm hemolymph (at dose of 1 mL/kg BW (HFS-1), 5 mL/kg BW (HFS-5) and 10 mL/kg (HFS-10) for 12 weeks. Results: After 12 weeks treatment, the administration of silkworm hemolymph decreased the final body weight significantly along with a decrease in the weights of epididymal fat and total fat. The plasma LDL-cholesterol concentration was significantly lower in the HFS-1, HFS-5, and HFS-10 groups than in the HFC group. In addition, the leptin level of the HFS groups was significantly lower than those of the HFC group without a change in the plasma insulin concentration. Conclusion: These findings suggest that the silkworm hemolymph may have the potential to prevent obesity.
This study was conducted to examine the effects of alterations in water temperature (WT) on biochemical and immunological factors in the hemolymph of the abalones, Haliotis gigantea and H. discus discus. The abalone were exposed to various WT; 18, 20, 22, 24, 26 and $28^{\circ}C$ for 96 hours. In biochemical factors, total-protein (TP), glucose, magnesium (Mg), aspartate aminotransferase (AST) and alanine aminotransferase (ALT) were not significant changes in hemolymph of H. gigantea and H. discus discus. But calcium was significantly increased by high WT (${\geq}24^{\circ}C$). In immunological factor, The phenoloxidase (PO) activity was decreased in hemolymph of H. gigantea and H. discus discus exposed to high temperature (${\geq}22^{\circ}C$) compared to the control (P < 0.05). Whereas alkaline phosphatase (ALP) was not significantly changed. These results suggested that high temperature adversely affects the immunity of H. gigantea and H. discus discus.
Hemolymph protein patterns of silkworms in terms of short and long life span were analyzed by native- and SDS-polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) with the developmental stages. From the native-PAGE patterns of silkworm major hemolymph proteins there were varietal differences on the first day of the pupal stage and were classified into there groups MHP-a, b and c SA 10, JAM109 and J037 were grouped into MHP-Ⅰ, Hangang, Chungmun and Daizo(sdi) into MHP-Ⅱ and NTZN, Sulak, Qoichuk and PR varieties into MHP-Ⅲ group. It was found that the MHP in each group revealed similar patterns and changes with development of pupal stage. In the first day of adult, MHP-c was clearly detected in both female and male of the Daizo(sdi), but not in the J037, indicating that there was significantly varietal differences in electrophoretical protein pattern. In addition, the results of protein pattern of hemolymph by SDS-PAGE showed also varietal differences in the concentration of hemolymph protein.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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