담수산과 해수에 적응된 guppy 아가미 상피내 점액세포의 미세구조를 주사 및 투과 전자현미경으로 관찰하고, 점액질 조성의 변화를 조직화학적으로 분석하여 다음의 결과를 얻었다. 점액세포는 아가미궁에서 돌출되어 형성된 일차층판상피에 주로 위치하였다. 미성숙점액 세포에는 과립형질내세망과 Golgi 복합체가 잘 발달되어 있었으며, 성숙 점액세포는 거의 점액과립들로 가득 채워져 있었다. 담수산 guppy 아가미 상피내 점액세포의 점액질은 중성점액질과, 산성점액질인 sialomucin 및 sulfomucin을 다량 포함하고 있었으며, 바닷물에 적응시킨 경우에서는 sialomucin과 sulfomucin이 약간 감소하였다. 바닷물에 적응된 guppy의 아가미 상피내 점액세포의 수는 담수산과 비교하여 3배이상 감소하였다. 이는 서식환경을 해수로 옮긴 결과, 변화된 삼투적 스트레스에 대응한 결과일 뿐 아니라 담수보다는 높은 염분농도인 해수환경의 감소된 감염기회와도 연관된 결과라고 생각된다.
서식수 염분농도의 변화에 따른 guppy(Poecilia reticulotus) 아가미 상피내 염소세포(chloride cell)의 미세구조적 변화를 전자현미경으로 관찰하고, 특히 증가하는 염분농도에 따라 주요변화를 보여주는 염소세포내 미토콘드리아와 tubular system의 면적을 영상 분석기로 측정하여 다음의 결과를 얻었다. 염소세포는 주로 guppy 아가미궁의 일차 총판상피에 위치하는데 담수에서는 하나씩 독립적으로 존재하며 자유면이 apical pit를 형성하여 외부환경에 노출되는 반면. 서식수의 염분농도가 증가하면 여러개의 염소세포들이 다세포복합체를 형성하고 이 세포들의 자유면이 함께 하나의 apical pit를 구성하게 된다. 서식수의 염분농도가 증가함에 따라 염소세포내의 미토콘드리아와 tubular system은 점점 더 조밀하게 분포하는 것으로 관찰되었다 염소세포의 단위면적당 미토콘드리아가 차지하는 면적은 서식수가 담수(0%의 염분농도)인 경우는 24$\pm$5%였고, 1%에서는 26$\pm$5%, 2%에서는 33$\pm$7% 그리고 해수(3.2% 염분농도)에 적응된 경우는 42$\pm$7%로 담수환경의 것과 비교하여 약 18%까지 증가하였다 또한 염소세포의 측면과 기저측 세포막 함입의 결과로 형성되는 tubular system은 세포의 단위면적당 차지하는 면적이 담수에 적응된 개체들에서 38$\pm$9%였고 서식환경의 염분농도에 따라 점차 증가하다가 해수에서는 61$\pm$9%로 약 16%까지 높아졌다.
The epidermis of scales in the abdominal parts from freshwater- and seawater-adapted guppies(Poecilia reticulatus) were studied respectively by scanning- and transmission- electronmicroscope. In the seawater adapted group, the surface area of pavement cells is increased nearly twice as much as that of freshwater-adapted group, and the pavement cells are relatively flattened. Adaptatoin to seawater causes the increment of the density of glycocalyx in the surface of the microridge of pavement cells, as well as the well developed intercellular junctional complex(desmosome) between neighbouring filament-containing cells. Also, intercellular space between adjacent filament-containing cells is more frequently observed in the epidermis of seawater adapted guppy.
Guppy fry were treated for the first 40 days of life with 0, 20, 40, 60 & 100$\mu\textrm{g}$ of estradiol per gram of food in order to change the sex of normal males to functional females(genetic male). The present investigation deals with the effects of steroid hormones, such as $\beta$-estradiol and testosterone, on the sex differentiation in guppy and tilapia. The results obtained were summarized as follows. 1. In B (20$\mu\textrm{g}$/g diet) group 17$\beta$-estradiol-treated, 67.8% of male offsprings were produced. 2. In D (60$\mu\textrm{g}$/g diet) group 17$\beta$-treated, 67% of female offsprings were produced. 3. B, D groups of genetic male brooders had significantly different effects (P<0.01) upon sex ratios of their progeny. 4. This strongly indicates that sex direction has been achieved and that the male is the heterogametic sex. 5. The group that produced the highest percentage of male offspring(male percentage of observed number to expected number was 91%) contained only full-sibling male brooders to the sex-reversed female brooders. 6. After 7 months following treatment, the sex-reversed males had ovarian portion in the anterior region and a testicular portion in the posterior region of the same intersexual gonad, respectively. 7. At 7 months after treatment, the ovareis revealed a complete arrest of the ovarian formation, and appearances of spermatogenetic cell cysts among surviving auxocytes. 8. In most of sex-reversed fish, anterior portion of test is was devoid of sperm ducts including the seminal vesicle and vas deferens. 9. The male transferrin showed two strong bands, while the female transferrin showed a single weak band. 10. One of the two bands of male transferrin showed the same mobility with band of female transferrin.
Wha Sun Kang;Young Wha Moon;Ji Won Han;No Gi Park;Han Hwa Kim
Animal cells and systems
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제2권4호
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pp.521-527
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1998
The turnover of epidermal cells after seawater adaptation of the freshwater fishwas studied in the guppy (Poecilia reticulata) by means of Proliferating cell nucleus antigen (PCNA) immunocytochemistry and transmission electron microscopy. The number of PCNA-immunoreactive cells in the epidermis of the seawater-adapted guppies, which becomes thinner than that in the fresh-water, generally increases four times as much. Degeneration of filament-containing cells by necrosis or apoptosis occurs mainly in epidermal cells. Apoptotic filament-containing cells seem to be shed into the water in the environment instead of phagocytosis by adjacent macrophages. The apoptotic chloride cell has a highly condensed cytoplasm and the lumen of tubular system is distended. The apoptotic mucous cell, which has an electron-dense cytoplasm, is characterized by the presence of a large multivesicular body of different electron densities. Macrophages contain many electron-dense lysosomal bodies and large vesicles filled with cellular debris. It is concluded that mitosis and apoptosis of epidermal cells are greatly stimulated when fish are adapting to seawater. This result reflects an increase in epidermal cell turnover by change of environmental salinity.
The aim of the present study was to determine the acute and subacute potential of trichlorfon in guppies (Poecilia reticulatus). We first defined the 24 h median tolerance limit ($TLm_{24h}$) of the fish to trichlorfon. Guppies were then treated with $TLm_{24h}$ and 1/10 $TLm_{24h}$ trichlorfon concentrations to evaluate if any histological alterations occurred. The $TLm_{24h}$ value of trichlorfon was 11 ppm. This concentration resulted in acute toxicity to the gills and kidneys with edema, hyperplasia of the gill lamellae, and vacuolated degeneration and necrosis of renal tubular cells. In the case of subacute toxicity using a 10-fold dilution of the $TLm_{24h}$ value (1.1 ppm), no behavioral changes, external lesions or histopathological changes were observed. Therefore, safe concentration of trichlorfon might be 1.1 ppm in guppy for controlling parasitic infections.
Different with other fishes, the guppies (Poecilia reticulata) is ovoviviparity, which retain their fertilized eggs within the follicle throughout gestation. The synchronously growing diplotene oocytes store nutrients in droplets and yolk, before their maturation and fertilization. The lecithotrophic strategy of development entails the provisioning of embryos with resources from the maternal yolk deposit rather than from a placenta, it allows the extracorporeal culture of guppy embryo. Studies on their early development of live bearers like the guppy including lineage tracing and genetic manipulations, have been limited. Therefore, to optimize conditions of embryo in vitro culture, explanted embryos from pregnant females were incubated in embryo medium (L-15 medium, supplemented with 5, 10, 15, 20% fetal bovine serum, respectively). We investigated whether the contents of FBS in vitro culture medium impact the development of embryos, and whether they would hatch in vitro. Our study found that in 5% of FBS of the medium, although embryos developed significantly slower in vitro than in the ovary, it was impossible to exactly quantify the developmental delay in culture, due to the obvious spread in developmental stage within each batch of eggs, and embryos can only be maintained until the early-eyed. And although in culture with 20% FBS the embryos can sustain rapid development of early stage, but cannot be cultured for the entire period of their embryonic development and ultimately died. In the medium with 10% and 15% FBS, the embryos seems well developed, even some can continue to grow after follicle ruptures until it can be fed. We also observed that embryonic in these two culture conditions were significantly different in development speed, in 15% it is faster than 10%. But 10% FBS appears to be more optimizing condition than 15% one on development process of embryos and survival rate to larvae stage.
본 연구는 구피(Poecilia reticulata)에서 oxolinic acid (OA), neomycin-oxytetracycline 복합제(NEO-OTC) 및 florfenicol (FF)의 급성독성을 96시간 동안 약욕투여하여 96h-LC50으로 평가하였다. 또한 활성성분 함량이 2-4%로 낮은 상업용 제제의 급성독성을 평가하여 표준품과 비교하고, 에로모나스병에 대한 치료 효능을 평가하였다. 구피에서의 급성독성은 NEO-OTC이 126.08 mg/L로 가장 높았다. OA는 염의 형태에 따라서 급성독성의 결과가 크게 상이하였다. Oxolinic acid 형태는 최고 농도인 1,000 mg/L에서도 모든 개체가 생존한 반면, 수산용의약품으로 사용되는 sodium염 형태는 96h-LC50이 504.61 mg/L로 도출되었다. 특히 모든 폐사는 OA가 용출되기 전인 24시간 이내에 발생하였다. FF의 급성독성은 매우 낮아 96h-LC50이 1,000 mg/L 이상으로 도출되었다. 본 연구에서 평가한 OA 및 NEO-OTC 상업용 제제는 산제 형태로, FF 상업용 제제는 액제 형태로 사용되었다. 부형제는 산제의 경우 glucose 및 lactose hydrate가 함량의 대부분을 차지하며, powdered corn syrup이 소량 첨가되었다. 액제의 경우 propylene glycol이 함량의 대부분을 차지하며, N-methylpyrrolidone, polysorbate 80, butylated hydroxy toluene이 소량 첨가되었다. OA 및 NEO-OTC 상업용 제제의 급성독성은 표준품과 큰 차이를 보이지 않았지만, FF 상업용 제제는 현저하게 급성독성이 증가하였고, 그 이유는 아마도 상업용 제제에 함유된 유기용매나 용해보조제가 독성을 강화시키는 것으로 추측된다. OA, NEO-OTC 및 FF 약욕투여는 단시간(2시간) 약욕투여시 각각 50 mg/L, 100 mg/L 및 15 mg/L 농도로, 장시간(24시간) 약욕투여시 각각 25 mg/L, 50 mg/L 및 7.5 mg/L 농도로 에로모나스병을 유의미하게 방어하였다. 이 결과는 급성독성이 발견되지 않는 용량 범위에서 에로모나스병 치료를 위한 용량 및 시간을 제시하였으며, 낮은 농도의 항생제를 포함한 액상제제가 부분적으로 독성을 증가시키기는 하지만 효과적으로 관상어의 질병을 치료하기에는 문제가 없음을 의미한다.
A scanning electron microscopic study on the glochidium and glchidial encystment of Anodonta grandis on the guppy was conducted. The shape of the glochidium is apparently triangular and its averge size is 0.45mm X0.4mm when closed, The two glochidial shell valves are of the same size, kept together by a ligament of 120${\mu}{\textrm}{m}$ in length and 7 ${\mu}{\textrm}{m}$ in width. Each of the glochidial shell valves has a 16 ${\mu}{\textrm}{m}$ long hook sitdded with many spines on the superior face. A large area to the apex of the valve surrounding the base of the hook is provided with numerous small spines which become progressively smaller towards the periphery of the area, The external surface of the glochidial shell valve is covered with numerous small processes showing successive change in the shape and the pattern of destribution by part. Besides the processes, there are a number of niches scattered all over the exterior surface. The glochidial shell valve has two layers. One is the outer thin membrane bearing the processes and the niches and the others is the inner layer bearing numerous holes which any accessory structure and 2.65 ${\mu}{\textrm}{m}$ in diameter, emerges from a canal located at center of ventral plate of the mamtle, A total of three types of the hair cells are observed. In present artificial infection of the glochidium to the guppy, it took about three to four hours to complete an early cysts, During the period of encystment, The epithelial cells of the host fish actively migrated toward the attached glochidium and covered it.
TBTCl(0.1, 0.32, 1, 3.2, 10, 25, 32, 50, 75 및 100 $\mug/l$)을 구피에게 144시간 동안 노출시켜 TBTCl의 구피 생체 내 축적정도 및 구피의 번식과 행동에 미치는 영향에 대해서 조사하였다. 0.1 $\mug/l$ 이상의 모든 TBTCl 실험군에서 $\SigmaBTs\; (TBT:\SigmaBTs)$가 67% 이상으로 매우 높았고, 고농도 실험군일수록 이 비율이 높아져, 고농도의 TBTCl에 노출될수록 구피의 대사능력이 저해됨을 알 수 있었다. 또한 TBTCl은 구피의 번식력을 약화시키고 행동이상을 유발함이 밝혀졌다. 즉, 0.1$\mug/l$의 실험군부터 수컷의 구애행동과 수출관 내 정포의 수가 감소되었고, 0.32∼10 $\mug/l$의 실험군에서는 정소 내 전체 생식세포낭에 대한 정포낭의 수도 점차 감소하여 TBTCl이 정자변태 과정에 영향을 미치는 내분비계 장애물질로서 작용하고 있음이 시사되었다. 더욱이 25 $\mug/l$이상의 고농도군에서는 단기간 내에 치사율이 증가하고, 생식세포가 괴사되고, 정소의 지지세포와 수출관 내의 상피세포가 상해되고, 유영행동 이상이 급증하고, 섭식이 중단되는 등 급성독성이 관찰되어, TBTCl이 구피의 번식 뿐 아니라 생존을 저해하고 있음이 시사되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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