Oxidative stress is associated with many kinds of chronic diseases. Antioxidants such as polyphenols are compounds that protect cells against the damaging effects of reactive oxygen species. Grape seeds are considered good resources of polyphenols, and grape seed extracts have a very strong antioxidant effect. In the present study, we established a simple gradient reverse-phase high performance liquid chromatography method to determine polyphenol content from three different grape seed resources. An ODS (2), $150\;{\times}\;3.2\;mm$ column has been employed, and six polyphenols have been determined: gallic acid, protochatechuic acid, (+)-catechin, (-)-epicatechin, procyanidin B2, and epicatechin gallate. Catechin and epicatechin were the main polyphenol compounds in all three extracts. The amount of procyanidin B2 was higher in Extract 1 (from a company of China), while Extract 2 (extracted in our lab) and Extract 3 (from a company of USA) contained higher proportions of epicatechin gallate. For the total polyphenol content, Extract 1 was much higher than that of Extract 2 and 3. The results suggest that the dietary dose of grape seed extracts from different resources should be adjusted according to polyphenol content.
본 연구에서는 높은 불포화지방산 함유율로 말미암아 항산화 성분을 함유하고 있음에도 불구하고 산패에 대한 위험성을 내포하고 있는 포도씨유에 다량의 항산화 성분을 함유한 것으로 알려진 포도씨추출물을 첨가하여 포도씨추출물 함유 포도씨유의 90일 동안의 저장 중 산화 안정성을 측정하였고, 갈색화, 비타민 E, 지방산 조성 및 폴리페놀 함량 변화를 조사해 보았다. 포도씨추출물을 첨가한 포도씨유의 경우 무첨가 포도씨유보다 저장기간 동안 과산화물가, 산가 및 공액이중결합가가 모두 낮아 포도씨추출물이 포도씨유의 산화 안정성에 기여하는 것으로 나타났다. 저장 중 흡광도 증가량 역시 포도씨추출물 첨가 포도씨유가 무첨가 포도씨유에서보다 적게 나타났고, 비타민 E 이성체의 감소량 또한 무첨가 포도씨유에서보다 포도씨추출물 첨가 포도씨유에서 적게 나타났으며, 지방산 조성 변화 역시 무첨가 포도씨유에서보다 포도씨추출물 첨가 포도씨유에서 적게 나타났다. 한편 저장 중 폴리페놀 함량 감소량은 포도씨추출물 함유 포도씨유에서 가장 크게 나타났다. 따라서 포도씨추출물은 저장 중 포도씨유의 산화 안정성에 기여하는 것으로 확인되었으며, 다만 그 능력은 합성항산화제인 butylated hydroxytoluene보다는 낮은 것으로 조사되었다.
본 연구는 포도 거봉종의 종자와 과피 추출물의 지질과산화 억제 효과와 암세포들에 대한 세포 독성을 살펴보았다. 추출 온도를 달리하여 추출한 종자와 과피의 에탄올 추출물과 추출물에 대한 분획물들을 이용하여 지질과산화물의 억제효과를 측정한 결과, 종자 및 과피 에탄올 추출물 모두 온도변화에 따른 영향은 없는 것으로 나타났으며, 추출물의 농도가 증가할수록 지질과산화물의 감소효과가 증가하였다. 종자 추출물의 경우, 3$0^{\circ}C$에서 추출한 에탄올추출물이 20 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ 농도에서 60.1%, 분획물 중에서는 ethyl acetate 분획물이 71.2%의 지질과산화를 억제하였다. 과피 에탄올 추출물의 경우, 5$0^{\circ}C$에서 추출한 추출물이 20 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ 농도에서 48.1%, 분획물 중에서는 hexane 분획물이 44.4%의 지질과산화를 각각 억제하였다. 암세포 생육 억제 효과에서는 모든 암세포(MCF-7, Hep3B 및 A549)에서 포도 종자 및 과피 에탄올 추출물 및 분획물들이 1.00 $\mu\textrm{g}$/ML 농도에서 대부분 50% 이상의 생육 억제율을 보였으며, 암세포에 대한 생육 억제와 정상 세포에 대한 selectivity에서는 종자 에탄올 추출물과 과피 에탄을 추출물간의 유의적인 차이는 나타나지 않았다. 본 연구 결과, 거봉포도종자 및 과피의 에탄올 추출물들과 각 분획물은 지질과산화 억제 효과와 암세포들에 세포 독성이 캠벨종의 포도종자 및 과피에 비하여 낮은 활성을 나타내었다.
본 연구는 머루 종실의 용매별 추출물을 이용하여 항산화 효과를 살펴봄으로서 머루 종실의 천연 항산화제로서의 가치를 확인하고 이용 가능성에 대한 기초자료를 제시하고자 하였다. 머루 종실의 ethanol 조추출물을 얻은 후 hexane, chloroform, ethyl acetate, butnol을 순차적으로 분획하였다. 머루 종실의 용매별 추출물의 총 페놀 화합물함량은 64.9 mg/100 g으로 ethyl acetate 추출물에서 가장 높은 함량을 보였으며, 전자공여능도 $100\;{\mu}L$/mL에서 90.0%로 대조구인 BHT 및 Ascorbic acid보다 활성이 높았으며, 농도가 증가함에 따라 전자공여능 역시 증가하는 경향을 보였다. 환원력 역시 농도가 $1,000\;{\mu}L$/mL일 때 ethyl acetate 추출물에서 2.83로 가장 뛰어난 활성을 보였다. $H_2O_2$, $FeCl_2$ 및 $CuSO_4$에 대한 항산화 활성도 머루 종실 용매별 추출물의 농도가 높 짐에 따라 유의적으로 활성이 증가하는 경향을 보였으며, ethyl acetate 추출물에서 가장 활성이 높았다. 아질산염 소거능은 pH 1.2의 반응조건에서 $1,000\;{\mu}L$/mL의 농도 첨가 시 ethyl acetate 추출물이 76.9%의 소거능을 나타내었다.
Central composite design was applied for the ultrasound-assisted extraction from peel and seed of Campbell Early grapes and the extraction processes were optimized for the antiradical activities of the extracts by using response surface methodology. Optimal conditions were 53.45% of ethanol concentration, 45.99${^{\circ}C}$ of extraction temperature and 23.93 min of extraction time for the maximum antiradical activity of grape peel extract (54.98%) and 53.14% of ethanol 56.03${^{\circ}C}$ of temperature and 29.03 min of time for maximum antiradical activity of grape seed extract (90.60%).
현재 식품공전 및 식품첨가물 공전에서 포도씨유 및 추출물의 catechin 함량 측정방법으로 널리 사용되고 있는 바닐린비색법을 polyamide cartridge를 사용함으로써 개선하였고 보다 정확하며 재현성 있게 catechin 함량을 측정할 수 있는 HPLC 방법을 개발하였다. 포도씨유 및 용매(열수, 에탄올, 메탄올 및 아세톤)추출물의 catechin 함량을 바닐린비색법으로 측정한 결과 각각 $30{\sim}40\;mg%$ (g/포도씨유 100g) 및 $17{\sim}43%$(g/추출물 100g) 범위를 차지하였다. 반면, polyamide cartridge를 사용한 개량 바닐린비색법으로 위의 포도씨유 및 추출물의 catechin 함량을 측정한 결과 각각 미량($1{\sim}5ppm$) 및 $4.0{\sim}7.5%$ 차지하였다. 한편, HPLC 방법으로 포도씨유의 catechin 함량을 측정한 결과 포도씨의 주된 4가지 catechin 성분[(+)-catechin, procyanidin $B_2$, (-)-epicatechin 및 (-)-epicatechin gallate]은 거의 확인할 수 없었다. 그러나 포도씨 용매추출물의 catechin 함량을 측정한 결과 4가지 주된 catechin 성분을 확인할 수 있었으며, 그 중 (+)-catechin 및 (-)-epicatechin 함량이 각각 $1.35{\sim}2.60%$ 및 $2.35{\sim}4.59%$ 범위로서 상당히 높은 반면, procyanidin $B_2$ 및 (-)-epicatechin gallate 함량은 각각 $0.77{\sim}1.36%$ 및 0.06${\sim}0.30%$ 범위로서 상대적으로 낮았다 또한, HPLC에 의해 국내의 포도 품종별 및 산지별 포도씨의 catechin 조성 함량을 측정하였다. 이와같이 위에서 정립된 HPLC 방법에 의한 포도씨의 4가지 주된 catechin 성분의 회수율은 95% 이상으로 높았으며, 재현율은 모두 5% 미만의 편차를 나타내어 분리효율이 우수하였다. 그리고 4가지 catechin 성분의 검출한계는 $1{\sim}5\;ppm$ 범위를 나타내었다.
This study was conducted to develop functional muffin in which grape seed extract(GSE) was added at 0, 0.5, 1 or 2% levels and to evaluate the quality characteristics. The volume of muffin decreased with the increasing GSE content, but no significant differences were observed. The weight and height of muffins increased with the increasing GSE content. The incorporation of GSE in the product lowered lightness (L value) and increased redness(a value). The mechanical texture parameters including hardness, springiness, gumminess and brittleness increased with the increasing GSE levels. Sensory analysis showed that muffin prepared with 0.5% GSE was considered to be as acceptable as control, based on hedonic scale ratings given by untrained taste panel.
Effect of grape seed extract (GSE) against Candida albicans was examined under in-vitro and in-vivo conditions. The GSE was extracted in ethanol. In-vitro results from an agar diffusion susceptibility assay showed the GSE inhibited C. albicans growth. This anticandidal effect was at dose-dependency. In experiments with animals, mice that received the GSE (0.5 mg per mice), intravenously (i.v.), before i.v.-infection wish viable C. albicans yeast cells survived longer than diluent (buffer)-received control mice. In contrast, when GSE was given to mice after the mice were infected with the yeast cells, these mice showed a similar survival rate as compared to control mice that received no treatment with the GSE. Taken together, these data indicate that GSE has prophylactic effect but not therapeutic effect against disseminated candidiasis.
The antioxidative activity and antimutagenic activity of the ethanol extracts from pericarp and seeds of wild grape (Vitis coignetiea) were analyzed in this study. The antioxidative activity of the extracts from wild grape was determined using 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) assay and 2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) (ABTS) assay. The antimutagenic activity of the extracts was evaluated on Salmonella typhimurium TA98 and TA100 by Ames test using 4-nitroquinoline 1-oxide (4-NQO) and sodium azide as mutagens. In the antioxidative activity determination, $IC_{50}$ values of the DPPH radical scavenging activity of the extracts from pericarp and seeds were 27.16 ppm and 7.61 ppm, respectively. Additionally, ABTS radical scavenging activities of pericarp and seed extract were 99.75% and 98.87% at 200 ppm, respectively. In the antimutagenic activity determination, pericarp extract at 5 mg/plate inhibited 72.6% and 74.3% of mutagenicity of S. typhimurium TA98 induced by 4-NQO and sodium azaid, respectively. Also, the mutagenicity inhibition rates of seed extract at 5 mg/plate were 77.8% and 74.5% in S. typhimurium TA100 induced by 4-NQO and sodium azaid, respectively. These results demonstrate that the ethanol extract from wild grape has remarkable antioxidant activity and antimutagenicity.
This study was a quantitative HPLC analysis of four anthocyanins and five phenolic compounds contained in the skins, vines and seeds of the Campbell Early, Muscat Bailey A and Neo Muscat grape varieties. In the phenolic analysis, the seeds of the Campbell Early were found to contain 1.9, 1.8 and 1.6 times higher quantities of gallic acid, catechin and epicatechin relative to other grape seeds. Three anthocyanins, cyanidin, peonidin and pelargonidin, were also found to be higher in the skins of the Campbell Early relative to other grape skins. Therefore, the Campbell Early is the most useful grape variety with regard to the extraction of these six compounds from these grape seeds and skins. The free radical scavenging effects of grape seeds were also compared, and the results indicated that the Campbell Early seeds were most effective among them.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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