dTDP-D-glucose 4,6-dehydratase (TDPDH) catalyzes the conversion of dTDP-D-glucose to dTDP-4-keto-6-deoxy-D-glucose, and requires $NAD^+$ as a coenzyme for its catalytic activity. The dTDP-D-glucose 4,6-dehydratase from Streptomyces antibioticus $Tu{\ddot}99$ tightly binds $NAD^+$ [19]. In order to determine the role of lysine-148 in the $NAD^+$ binding, the lysine of the dTDP-D-glucose 4,6-dehydratase from Streptomyces antibioticus $Tu{\ddot}99$ was mutated to various amino acids by site-directed mutagenesis. The catalytic activity of the four mutated enzymes of TDPDH did not recover after addition of $NAD^+$ . However, the activity of K159A, the mutated enzyme of UDP-D-glucose 4-epimerase (UDPE), recovered after the addition of $NAD^+$ [15]. Although dTDP-glucose 4,6-dehydratase, and UDP-galactose (glucose) 4-epimerase are members of the short-chain dehydrogenase/reductase SDR family and the lysine-148 of TDPDH was highly conserved as in UDPE (Lys-159), the function of the lysine-148 of TDPDH was different from that of UDPE. The mutated enzymes showed that the lysine-148 of the dTDP-D-glucose 4,6-dehydratase played no role in the $NAD^+$ binding. Accordingly, it is suggested that the lysine-148 of the dTDP-D-glucose 4,6-dehydratase is involved in the folding of TDPDH.
Model melanoidin으로서 glucose-glycine, glucose-lysine, xylose-arginine melanoidin을 색도가 동일하게 되도록 조제하여 항산화효과 및 항산화효과와 관련된 특성을 살펴보았다. 실험에 사용한 melanoidin들은 대조군에 비해 강력한 항산화 효과를 나타내었으며 melanoidin들의 갈색도의 정도를 동일하게 하여도 당과 아미노산의 종류에 따라 항산화 효과가 다르게 나타나서 xylose-arginine melanoidin의 항산화 효과가 가장 큰 것으로 나타났다. Xylose-arginine melanoidin의 경우 DPPH에 의한 전자공여성도 실험에 사용한 세 model melanoidin중 가장 커서 xylose-arginine melanoidin의 항산화성과 전자공여성이 관계있음을 알 수 있었다. Melanoidin의 항산화 효과 관련 물질의 특성을 알기위하여 melanoidin을 Sephadex G-50에서 분리하여 그 특성을 조사한 결과 melanoidin의 종류에 따라 다른 분리 패턴을 나타내었다. 분획별 항산화효과를 비교한 결과 xylose-arginine melanoidin이 가장 강한 항산화효과를 나타내었고 다음이 glucose-lysine melanoidin이었으며 glucose-glycine melanoidin이 가장 낮은 항산화효과를 나타내어 당의 경우 glucose보다 xylose에서, 아미노산의 경우 glysine보다 lysine에서 항산화 효과가 큰 것을 알 수 있었다. 분획물의 특성 중 melanoidin의 항산화 효과가 큰 물질은 갈색도가 높으면서 ninhydrin 양성반응을 나타내고 환원성이 강한 특성을 나타내었다. Xylose-arginine melanoidin의 경우 fraction 50에서 65사이의 광범위한 영역에서, glucose-lysine melanoidin의 경우 fraction 65에서, glucose-glycine melanoidin의 경우 fraction 60에서 각각 강한 항산화 효과물질이 검출되었다. Xylose-arginine melanoidin의 경우 광범위한 갈색물질의 용출범위에서 환원작용을 나타내어 앞에서 model melanoidin 중 가장 강한 항산화 효과 및 DPPH에 의한 전자공여성을 나타낸 성질과 일치함을 알 수 있었다.
To determine the quality of heated protein, in vitro method, invluding lysine, lysionalanine, and fructose-lysine as well as homoarginine by guanidination of lysine, was assessed using heated casein with of without glucose. In vivo methods such as PER, digestibility and BV were also tried on homoarginine, lysinoalanine, fructoselysine, and lysine. The nonreactive lysine for huanidination was hardly digestive, while the non heat damaged lysine side chanis in the protein were accessible for guanidination as well as for the digestion. A linear correlation(${\gamma}$=0.80) was obstained between PER and digestibility of the analysed lysine. Digestibility of homoarginine was higher that of true protein. However, in the guanidinated heated casein with glucose, digestibility of homoarginine was significantly reduced. It is suggested that the homoarginine method may mislead to over- or underestimation of the damaged protein quality.
培養 HeLa 細胞의 酸素消費量과 Lysine 吸收에 미치는 X-線 照射의 영향을 측정하였다. 1. 200r의 X-線 照射는 酸素消費量에 아무러한 영향이 없다. 酸素消費量은 succinate, citrate, 및 $\\alpha$-ketoglutarate에 의하여 增大되며 X-線 照射群에서도 이 傾向은 同一하다. 2. 酸素消費量에 미치는 sodium azide 와 2,4-dinitrophenol 의 영향은 X-線 照射에 의하여 상당히 변화된다. 3. Lysine의 初期吸收率은 X-線 照射에 의하여 甚히 低下되며, 또한 飽和吸收量도 減少된다. 4. Glucose는 lysine의 吸收를 促進시키고, succinate는 아무러한 영향이 없으며 citrate와 $\\alpha$-ketoglutarate는 억제한다. X-線 照射는 이러한 傾向에 아무런 변화를 초래하지 않는다. 5. Lysine의 吸收에 미치는 sodium azide와 2,4-dinitrophenol의 영향은 酸素消費量에 미치는 이들의 영향과 判異하다. 이러한 傾向은 X-線 照射群에서도 대체로 동일하다.
This study was conducted in an effort to investigate the effect of Maillard reaction products (MRPs) on enzymatic browning of burdock and their anti-oxidant activity. The MRPs were prepared by heating glucose and amino acids at $90^{\circ}C$, which served to produce a strong inhibitory effect on burdock polyphenol oxidase. As the reaction time of the solution containing glucose and amino acid increased at $90^{\circ}C$, the production of MRPs increased and intensity of the brown color deepened. When MRPs were prepared by heating at $90^{\circ}C$ for five hours, the absorbance of MRPs from glucose and lysine was 6.44, while those of glucose and glycine was 1.95. The MRPs synthesized from the glucose and lysine also reduced the pH of MRPs from 5.60 to 4.51, but those from glucose and glycine decreased slightly from 5.57 to 5.33. The Michealis-Menten constant value ($K_m$) of burdock PPO with pyrocatechol as a substrate was 16.0 mM, and MRPs were a non-competitive inhibitor against burdock PPO. The anti-oxidant activity of MRPs was measured by evaluating its radical scavenging activities of DPPH radicals, ABTS radicals and reducing power. The color intensity of MRPs produced by lysine and glucose were deeper than that produced by glucose and glycine. It was also found that MRPs produced from glucose and lysine exhibited stronger anti-oxidant properties than those produced by glucose and glycine.
This article focuses on the effects of glycine betaine on preventing caramelization, and increasing DCW and $\small{L}$-lysine production. The additional glycine betaine not only decreased the browning intensity (decreased 4 times), and the concentrations of 5-hydroxymethylfurfural (decreased 7.8 times) and furfural (decreased 12 times), but also increased the availability of glucose (increased 17.5%) for $\small{L}$-lysine production. The DCW and $\small{L}$-lysine production were increased by adding no more than 20 mM glycine betaine, whereas the DCW and $\small{L}$-lysine production were decreased with the reduction of pH values, although pH had a better response to prevent caramelization than did glycine betaine. For $\small{L}$-lysine production, the highest increase (40%) was observed on the media with 20 mM glycine betaine. The crucial enzymes in glycolysis and $\small{L}$-lysine biosynthesis pathway were investigated. The results indicated that additional glycine betaine increases the activity of enzymes in glycolysis, in contrast to the effect of pH. All the results indicated that glycine betaine can be used to prevent caramelization and increase the $\small{L}$-lysine production. By applying this strategy, glucose would not be have to be separated from the culture media during autoclaving so that factories can save production costs and shorten the fermentation period.
We conducted a series of investigations in order to elucidate role of nutritional status in regulating GLUT expression and energy metabolism in porcine muscle. Firstly, the role of mild undernutrition in regulating muscle GLUT gene expression and function was studied in growing pigs (3 wk of age) on a high (H) or low (L) food intake (H = 2L) at $35^{\circ}C$ or $26^{\circ}C$. Low food intake selectively upregulates GLUT1 and GLUT4 gene expression; mRNA levels were elevated in longissimus dorsi (L. dorsi) and rhomboideus muscles but not in diaphragm or cardiac muscles. Our next step was to determine whether dietary lysine, a major primary limiting amino acid in diets for pigs, affects muscle GLUT4 expression. Pigs of 6 wk of age were pair-fed a control or low lysine (LL) diet. The control diet contained optimal amounts of all essential amino acids, including 1.15% lysine. The LL diet was similar but contained only 0.70% lysine. GLUT4 mRNA expression was upregulated by the LL diet in L. dorsi and rhomboideus muscles, whereas that in cardiac muscle was unaffected. GLUT4 protein abundance was also higher in rhomboideus muscle of animals on the LL diet. We conducted another investigation in order to elucidate effects of the LL diet on post-GLUT4 glucose metabolism. Activity of hexokinase was unaffected by dietary lysine levels while that of citrate synthase was higher both in L. dorsi and rhomboideus muscles of pigs fed on the LL diet. Glucose 6-phosphate content was higher in L. dorsi msucle in the LL group. Glycogen content was higher both in L. dorsi and rhomboideus muscles in the LL group. Further, we determined the effects of dietary lysine levels on accumulation of intramuscular fat (IMF) in L. dorsi muscle of finishing pigs. A low lysine diet (lysine content was 0.40%) meeting approximately 70% of the requirement of lysine was given to finishing pigs for two months. IMF contents in L. dorsi of the pigs given the low lysine diet were twice higher than those of the pigs fed on a control diet (lysine content was 0.65%). Finally, we proved that a well known effect of breadcrumbs feeding to enhance IMF of finishing pigs could be attributed to shortage of amino acids in diets including breadcrumbs.
국내외에서 구입한 42개의 식초 시료에 대해 비휘발성 유기산, 당, 아미노산, 휘발성 성분들을 종합적으로 분석하여 화학 성분에 의한 양조, 사과, 현미식초의 차별화 가능성을 검토하였다. 비휘발성 유기산으로는 malic, succinic 및 lactic acid, 당 성분으로는 fructose와 glucose, 아미노산으로는 lysine, serine, leucine, valine 및 alanine, 휘발성 성분으로는 1-hexanol, acetaldehyde, 3-methyl-1-butanol, 2-methylpropanoic acid, isopropyl butanoate 및 ethanol이 식초의 종류별 차별화에 유용한 성분으로 밝혀졌다. 이러한 열 여섯 종의 성분들 중에서도 malic acid, lysine, succinic acid, glucose, lactic acid 및 1-hexanol을 식초의 차별화에 가장 크게 기여하는 화학 성분으로 정의할 수 있었다. 양조식초는 특징적인 성분이 없었으며, 사과식초는 malic acid와 1-hexanol이, 현미식초는 lysine과 lactic acid의 함량이 다른 종류의 식초에 비해 많은 것이 특징이었다.
본 연구는 유화형 소시지와 유사한 향미 특성을 갖는 저지방 소시지를 개발하기 위해 오일, 당(glucose, fructose), 아미노산(alanine, aspartic acid, cysteine, glycine, lysine) 및 지방산(oleic/linoleic acid)의 효과를 조사하기 위해 실시하였다. 등 지방 오일의 도포는 저지방 소시지의 향미 특성에 큰 영향을 주지 못하였다. 저지방 대조구에 당을 단독으로 첨가한 경우와 당과 아미노산을 혼합한 경우에 몇몇 향미물질에서 유화형 대조구와 차이를 보인 반면 지방산을 혼합 첨가한 경우에는 유화형 대조구와 유사한 향미를 가질 수 있었다. 특히, glucose에 지방산을 첨가하고 glycine과 alanine을 각각 첨가한 경우에 유화형 대조구에서 동정된 향미 화합물과 동일한 농도를 보였다. Lysine의 농도별 첨가에 따른 휘발성 향미 화합물의 특성에서 유화형 대조구에 비해 저지방 대조구에서 높은 농도를 보였던 myristicine은 lysine의 농도를 증가시켜도 유화형 대조구에서 정량된 양과 동일하지 못했다. 유화형 대조구와 가장 유사한 농도를 보인 처리구는 glucose와 지방산에 glycine과 alanine을 각각 첨가한 처리구였다. 결론으로, 저지방 대조구에 당을 단독으로 첨가하거나 당과 아미노산을 혼합한 경우보다 당과 아미노산에 지방산을 복합적으로 혼합하여 첨가하면 유화형 대조구와 더 유사한 향미를 생성할 수 있었다.
Casein과 포도당간의 갈변반응시 전분 및 자당 첨가에 의한 갈변반응 저지효과를 흰쥐를 이용하여 검토한 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 체중 및 단백질소화율은 비갈변식이를 섭취한 경우가 갈변식이를 섭취한 경우보다 높았으나 갈변식이의 경우 전분 보호효과는 없었다. 2. 질소균형 및 혈청 yrea-N의 농도는 처리간 유의차가 없었다. 3. Fructosyl-lysine은 분보다 뇨를 통한 배설량이 비갈변식이 섭취시 1.7배, 갈변식이 섭취시 10~18배 가량 높았다. 분과 뇨를 통한 총 배설량은 비갈변식이를 섭취한 경우보다 갈변식이 섭취시 훨씬 높았다. 뇨를 통한 배설량은 비보호갈변식이를 섭취한 경우에 비하여 자당첨가동시보호갈변식이를 섭취했을때 낮았고 분을 통한 배설량은 전분보호 갈변식이를 섭취했을 때 보호방법에 관계없이 비보호갈변식이를 섭취한 경우보다 낮았다. 4. 개별 필수유리아미노산의 분을 통한 배설량은 비갈변식이에 비하여 갈변식이를 섭취한 경우가 높았고 뇨를 통한 배설량은 HIs을 제외하고는 비갈변식이를 섭취한 경우가 오히려 높거나 비슷한 수준이었다. 5. lysine의 분을 통한 배설량은 비갈변식이에 비하여 갈변식이를 섭취한 경우가 3.3~4.3배 높았고 비보호갈변식이에 비하여 전분 보호갈변식이를 섭취한 경우가 23~2*% 정도 낮았다. 6. 혈청, 간 및 소장내용물중 fructosyl-lysine 함량은 비갈변식이에 비하여 갈변식이를 섭취한 경우 혈청내에서는 1.7~2.7배, 간에소는 11.1~22.1%, 소장내용물중에서는 자당첨가동시보호갈변식이를 제외하고는 7.3~11.7배 정도 높았다. 전분보호효과를 보면 비보호갈변식이에 비하여 전분보호갈변식이를 섭취한 경우가 혈청에서는 26~37%, 소장내용물에서는 14.3~82.9% 정도 낮았다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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