The gellan was produced by Pseudomonas elodea ATCC 31461 under aerobic condition. Gellan provides various functionalities such as gelling, suspending, stabilizing, emulsifying and binding properties in aqueous systems. In this study, the effect of glucose concentration and nitrogen sources concentration, bacto peptone and $NH_4NO_3$, on the cell growth and the production of gellan were evaluated. The maximum specific yield (g gellan/g cell) of 2.22 was obtained at 1.0% of glucose. Bacto peptone increased cell growth. And nitrogen limitation was essential for higher production of gellan. The highest cell and gellan production were abtained at 0.5 g/${\ell}$ of bacto peptone without $NH_4NO_3$.
For the production of digoxin by using biotransformation in suspension-cultured Digita- lis lanata cells, a two-stage culture process was optimized. Modified Murashige and Skoog medium was used for growth in the first stage and the cells were transferred to glucose solution for the production of digoxin from digitoxin via biotransformation in the second stage. When the cells were cultivated for 10 days in the growth period, 12$\beta$-hydroxylation capacity was the best. It was found that the optimum amount of digitoxin as substrate was 400 mg/l with initial cell density of 21%. Maximum productivity was achieved 5 days after transfer of cells to production medium. Sucrose and fructose provided similar digoxin yield as that in glucose, and 6% was proved to be the best glucose solution. Most of the components of modified MS medium except phosphate reduced the efficiency of digoxin formation. Besides, peptone and beef extracts inhibited 12$\beta$-hydroxylation, while promoting glucosylation. Finally, it was apparent that light enhanced the formation of digoxin significantly.
The effects of glucose concentration on the production of PHB by fed-batch culture of Ralstonia eutropha were investigated. In the range of glucose concentration of $2.5\;{\sim}\;40\;g/l$, it was found that the high glucose concentration was not favorable for the PHB formation after the phosphate limitation. It was further confirmed by the specific PHB synthesis rates and yields. The PHB concentration decreased much with the increase of glucose concentration. But if the glucose concentration was very low, e.g. 2.5 g/l, the cell growth and PHB synthesis also could be limited because of inadequate glucose supply. Itwould be better to maintain the glucose concentration at about 9.0 g/l to obtain high DCW, PHB concentration and productivity.
To investigate the effect of salts on the production of erythritol by Torula sp., cells were grown on the media containing various concentrations of KCl or NaCl. Cell growth and glucose consumption rates decreased when KCl or NaCl concentration increased from 0.0 to 0.5M. The production of erythritol, however, was maximal at 0.3M aCl. The erythritol concentration of 54.3g/l in the medium containing 0.3M NaCl and 200g/l glucose was obtained after 120h. The production of erythritol decreased in cultures above 0.3M NaCl or 0.4M KCl due to the inhibition of cell growth. To elucidate the effect of salts more quantitatively, KCl and NaCl concentrations were converted to osmotic pressure. As the osmotic pressure increased, the yield of erythritol from glucose increased regardless of the kinds of salts and the yield of erythritol was approximately 49% at the osmolality of 2.4Os/kg. When the osmotic pressure increased to 2.5Os/kg, the specific growth rate of cells decreased but the production rate of erythritol increased. For the effective production of erythritol, osmotic pressure must be adjusted not to inhibit markedly the growth rate of cells and to stimulate the production rate of erythritol by supplementing salt.
To investigate the metabolism of various substrates in preimplantation bovine embryos, uptake of glucose and pyruvate, and lactate production were measured in single IVF-derived bovine embryos by a non-invasive method. When the embryos were incubated for 5 h in culture medium supplemented with 1 mM glucose and 0.4mM pyruvate as substrates at each developmental stage, glucose uptake was increased with more advanced developmental stages while pyruvate uptake was decreased. Total lactate producton of 2-cell embryos was significantly higher than that of blastocysts (p<0.05). Both of glucose uptake and lactate production in normal morulae produced in vitro was significantly high compared to the degenerated embryos(p<0.05). The results obtained in the study suggest that pyruvate as an exogenous substrate may be support in bovine embryos until 8-cell stage, whereas glucose may be effective as an energy source after morula stage. In addition, it was proven thatlactate was not effective as an energy source in preimplantation development of IVF-derived bovine embryos.
To improve the growth of mouse hybridoma 2c3.1 secreting anti-Hepatitis B surface antigen monoclonal antibody (anti-HBsAg MAb), we had constructed an enriched medium and observed the effects of fetal bovine serum and serum-free supplements including human serum albumin, 'insulin and transferrin', and monoethanolamine. For further enhancement of growth, the concentrations of two major energy sources, glucose and glutamine, were strengthened with various ratios in the enriched medium. Maximum cell growth and monoclonal antibody production obtained in various ratios of glucose/glutamine with an inoculation concentration of 2$\times$105 cells/ml were 0.73$\times$106-4.62$\times$106 cells/ml and 65.1-422.6 $\mu\textrm{g}$/ml, respectively. Glutamine was round to be a major energy source and a limiting nutrient in comparison to glucose for 2c3.1 cell cultivation in enriched media with low serum.
토양에서 분리, 동정한 Steptomyces sp. GI 32의 glucose isomerase 생산은 sorbitol 1%, yeast extract 0.4%, tryptore 0.6%, 1 mM Fe$_2$(SO$_4$)$_3$의 조성을 가진 배지에서 초기 pH 7.0으로 조절하여 35$^{\circ}C$에서 약 18시간 진탕배양시 효소생산량이 최고로 240 units/mg이었다. 효소는 ammonium sulfate 분획, DEAE cellulose chromatography 등의 과정을 거쳐 부분정제한 결과 3배정도 효소 비활성이 증가하였다. 효소활성의 치적온도는 7$0^{\circ}C$이며, 최적 pH는 8.0이었다. 특히 효소의 열안정성이 7$0^{\circ}C$에서 1시간 가열하여도 전혀 실활되지 않았다.
수소생산을 최적화하기 위하여 Enterobacter cloacae YJ-1을 이용해 생산성에 미치는 탄소원 농도, 질소원 농도, 금속이온 농도, 아미노산 효과로서 회분식 배양을 통하여 실험을 수행하였다. 각종 탄소원의 종류에 따라 수소생산을 검토한 결과 glucose 첨가시에 가장 양호하였다. 따라서 glucose 농도를 변화시켜 수소생산량을 조사한 결과 $2\%$(w/v) 농도에서 최대를 보여 975.4 mL/L를 생산하였다. 각종 질소원 중에서 가장 효과적인 질소원은 yeast extract이었으며, 최대 수소생산량은 $1.5\%$(w/v) 농도에서 1651.5mL/L이었다. 금속이온으로는 $Na_2MoO_4$가 가장 효과적으로 나타나 $0.04\%$(w/v) 농도에서 1753.3 mL/L를 생산하였다. 아미노산은 cystein에서 가장 생산량이 많았으며, 다음은 proline, histidine, alanine 등 순이었다. 회분식 배양의 최적 조건하에 수소를 연속적으로 생산하기 위하여 반연속배양을 행한 결과 $3\%$ (w/v) 농도에서 2215.4 mL/L로 가장 높았다. 생산균주의 대사에 관한 물질을 보다 세밀히 조사하고 연속적인 수소생산을 살펴 산업적인 공정개발도 가능하리라 생각된다.
Increasing levels of ammonia-N in the rumen fluid used for in vitro incubation were achieved by supplementation of the ration of the donor cows with urea and by addition of urea either with or without glucose to the rumen fluid after collection. The ration of the donor animals consisted of wheat straw (80%) and maize silage (20%). During the second half of the experiment the basal ration was supplemented with a mineral mixture. Wheat straw, Guinea grass and two rice straw varieties were incubated with the various kinds of rumen fluid. Parameters studied were: solubility, apparent organic matter disappearance after 48 hours of incubation ($OMD_{48}$), rate of organic matter degradation from 0 to 24 hours of incubation ($k_1$) and from 24 to 95 hours ($k_2$). The concentration of ammonia-N in the rumen fluid at which 95% of the maximal $OMD_{48}$ and k1 were reached (88.2 and 100.0 mg/l) were independent of the feed. With regard to the $k_2$ the required ammonia-N concentration to reach 95% of the maximal $k_2$ differed per feed. Mineral supplementation increased the OMD48 and $k_1$, but not the solubility and $k_2$. Glucose addition in combination with urea had no beneficial effect compared to urea supplementation alone.
Heteropolysaccharide-7 (PS-7) was produced by Beijerinckia indica HS-2001 under aerobic condition. Production of PS-7 was investigated under various ratios of glucose as carbon source to ammonium nitrate as nitrogen source. Maximal production of PS-7 was 7.13 g/l when concentrations of glucose and ammonium nitrate were 10 g/l and 0.3 g/l, respectively. But its conversion rate from glucose was as low as 7 %. The highest conversion rate of PS-7 was 46% when those of glucose and ammonium nitrate were 1.0 g/l and 0.3 g/l, respectively.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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