방사선 조사에 의한 발아 억제기작을 살펴보기 위하여 $4^{\circ}C$ 에서 저온 처리 한 감자에 0.12 kGy 감마선을 조사한 후 5주 동안 $20{\pm}2^{\circ}C$, 상대습도 $70{\sim}90%$에서 저장하였다. 이 기간 중 발아에 관여된다고 생각되는 ${\alpha}-amylase$, peroxidase, indole acetic acid (IAA) oxidase, IAA synthesizing enzyme의 활성 변화를 추적하였다. 시판 ${\alpha}-amylase$와 peroxidase의 방사선 감수성은 0.94와 0.36 kGy의 감마선 조사하여 $D_{37}$ 값을 얻었다. 감마선 조사를 행한 감자의 IAA oxidase 역가는 조사후 급격히 증가됐고 IAA 합성 효소의 역가는 조사직후 조금 증가하였으나 저장 기간에 따라 크게 감소하였다. 형태적인 변화에서 조사된 감자에서는 성장점의 고사와 변형된 눈이 관찰되었고 IAA 흑은 gibberellin 등의 처리에 의해 이들 자체로는 회복되지 않았고 그 주위로 새로운 눈의 성장이 관찰되었다. 결론으로 방사선 조사에 의해 야기된 감자의 호흡은 탄수화물이 ${\alpha}-amylase$등의 효소에 의한 분해로 이루어져 ATP를 공급하며 뒤이은 peroxidase 역가의 증가와 같은 효소의 합성은 방사선에 의한 손상을 치유하려는 과정에 속한다 할 수 있다. 또한 눈의 생장점에서의 고사 현상은 손상에 대한 방어 작용의 일종이라 해석되며 이로인한 발아 억제 현상을 페놀 대사와 관련지어 추측할 수 있었고 증가된 IAA oxidase와 IAA 합성계의 파괴에 의한 IAA의 고갈 역시 방사선 조사에 의한 발아 억제 현상의 원인이 됨을 알 수 있었다.
Gibberellins (GAs) play an important role in plant growth and development. Fifteen fungi were isolated from Physalis alkekengi var francheti plant roots, and among them, four isolates showed GA-production activity. A bioassay using waito-c rice was carried out with the culture fluid of the GA-producing fungi. The GA-producing fungi were cultured for 7 days in Czapek's liquid medium at $30^{\circ}C$, 120 rpm, under dark conditions. The culture broth was concentrated 30-fold and 10 ${\mu}l$ of that concentrate was applied to 2-leaf rice sprouts. The height of the rice seedlings treated with the culture fluid of isolate PA08 was 26 cm high, while that of the seedlings treated with the wild-type Gibberella fujikuroi was 13 cm high. As such, the plant growth-promoting activity exhibited by isolate PA08 was 2 times stronger than that exhibited by the wild-type G fujikuroi. The amounts of $GA_l,\;GA_3,\;GA_4,\;GA_7,\;GA_9,\;GA_{20}$, and $GA_{24}$ in the medium were measured using gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS), and the quantities produced by isolate PA08 were 4.85 ng/ml, 4.79 ng/ml, 17.30 ng/ml, 6.01 ng/ml, 16.61 ng/ ml, 0.08 ng/ml, and 17.30 ng/ml, respectively. Isolate PA08 was also identified as Fusarium proliferatum KGL0401 by a genetic analysis of the nucleotide sequences of the internal transcribed spacer region of the ribosomal DNA.
편백의 개화촉진 방법을 강구하기 위하여 제주도 남제주군 임목육종연구소 남부육종장 채종원 및 클론보존원에서 지베레린을 처리한 후 개화량을 조사하고 종자생산량을 추정하였다. $GA_3$ 300ppm 및 $GA_{4/7}$ 300ppm의 수관산포와, $GA_{4/7}$ 1.5cc와 수간매입을 시기별(3시기)로 시행하였으며, 클론보존원에서는 $GA_3$ 300ppm을 수관산포하고, $GA_{4/7}$ 1.5cc와 $GA_3$ 20mg을 수간매입 하였다. 각 처리에 대한 주요 분석결과는 다음과 같다. 1. 모든 지베레린 처리구에서의 자화개화량이 무처리구에 비해 증가하였는데, $GA_{4/7}$ 1.5cc 수간매입 처리구의 효과가 가장 우수하였으며, $GA_3$ 300ppm 수관산포 처리구에서 효과가 좋았다. 한편 웅화의 경우에도 지베레린 처리구가 무처리구에 비해 개화촉진 효과가 우수하였다. 2. 처리시기별 비교에서는 웅화(雄花)의 경우, 8월 15일 처리한 시험구에서의 8월 31일 및 9월 11일 처리한 시험구에 비해 우수하였으며, 웅화(雄花)에서는 뚜렷한 차이를 발견할 수 없었다. 3. 개화촉진 효과가 가장 좋았던 $GA_{4/7}$ 1.5cc 8월 15일 처리구에서 ha 당 22.12kg의 종자생산이 가능할 것으로 추정되었다. 4. 클론별 지베레린 처리결과 클론간 자화 및 웅화 개화량은 통계적으로 유의한 차이가 있었다. 5. 개화특성의 경우, 특히 자화개화량은 유전적 요인에 의해 어느 정도 지배되어짐을 추정할 수 있었다.
We isolated nine endophytic fungi from the roots of salt-stressed soybean cultivar Daewonkong and screened them for growth-promoting secondary metabolites. Of all fungal isolates, P-4-3 induced maximum growth promotion of waito-c rice and soybean. Analysis of the culture filtrate of P-4-3 showed the presence of physiologically active gibberellins $GA_1$, $GA_3$, $GA_4$, and $GA_7$, along with physiologically inactive $GA_{15}$ and $GA_{24}$. The plant growth promotion and gibberellin-producing capacity of P-4-3 was much higher than wild-type Gibberella fujikuroi, which was taken as the control during the present study. The fungal isolate P-4-3 was identified as a new strain of Scolecobasidium tshawytschae through the morphological characteristics and phylogenetic analysis of 18S rDNA sequence. Gibberellins production and plant growth promoting ability of genus Scolecobasidium was reported for the first time in the present study.
독도에 자생하는 번행초의 뿌리로부터 순수 분리하여 형태적으로 상이한 17개의 내생균류를 선별하였다. 또한 분리된 균류들에 대하여 각각의 염농도와 pH 농도 구배에 따라 생장 시험을 확인하였다. 내생균류에 대해 각각 난장이벼의 유묘에 식물생장활성시험을 진행하였고, 그 결과 YH103 균주가 가장 높은 활성을 나타내었다. 계통분석은 Maximum likelihood 방법을 활용하여 결합된 ITS영역, beta-tubulin 및 calmodulin 유전자 염기서열을 분석하여 분리된 균주의 유연관계를 분석하였다. YH103 균주의 배양여과액을 HPLC와 GC/MS SIM을 이용하여 분석한 결과 식물호르몬인 지베렐린 $GA_4$, $GA_7$, $GA_8$ 및 $GA_{19}$가 확인되었다. 최종적으로 YH103 균주의 형태학적 관찰 및 결합된 유전자 염기서열의 분자적 분석을 통해 GA를 생산하는 새로운 Aspergillus tubingensis로 동정되었다.
Plant growth promoting fungi (PGPF) are well known for the production of useful secondary metabolites. However, limited information is available on the gibberellin (GA) production capacity of PGPF of endophytic origin. In the current study, 15 fungal endophytes were isolated from the roots of Crown daisy, and then screened on Waito-c rice, in order to identify plant growth promoting fungi. The fungal isolate MH7 significantly increased the shoot length (12.1 cm) of Waito-c in comparison with control treatment (7.9 cm). In a separate experiment, the culture filtrate (CF) of MH7 significantly promoted the growth attributes of Crown daisy. The MH7 CF was analyzed for gibberellins and it contained all physiologically active gibberellins ($GA_1$, 1.37 ng/ml; $GA_3$, 5.88 ng/ml; $GA_4$, 8.62 ng/ml; and $GA_7$, 2.05 ng/ml) in conjunction with physiologically inactive $GA_9$ (0.83 ng/ml), $GA_{12}$ (0.44 ng/ml), $GA_{15}$ (0.74 ng/ml), $GA_{19}$ (1.16 ng/ml), and $GA_{20}$ (0.98 ng/ml). The CF of MH7 produced higher amounts of $GA_3$, $GA_4$, $GA_7$, $GA_9$, and $GA_{12}$ than wild-type Fusarium fujikuroi, which was used as a control for GA production. The fungal isolate MH7 was later identified as a new strain of Penicillium on the basis of its morphological characteristics and phylogenetic analysis of the 188 rDNA sequence.
강낭콩 두 품종(정상종인 Kentucky Wonder와 왜성종인 Masterpiece)의 미성숙종자로부터 부분 정제한 GA 수산화효소를 사용하여 $[^{14}C]GA_{12}$으로부터$\;GA_{15}$의 효소활성의 변화를 조사하였다. 메탄올 침전과 소수성크로마토그래피에 의해 부분 정제된 GA 수산화효소 활성분획은 효율적으로 $GA_{20}$을 $GA_{1}$ 과 $GA_{5}$을 경유하여 $GA_{6}$으로, $GA_{12}$을 $GA_{15},GA_{24}, GA_{9}$을 거쳐 $GA_{4}$로 변환시켰다. 두 품종의 종자성분에 따른 $GA_{12}$로부터 $GA_{15}$의 C-20 수산화효소 활성의 변화와 강약에는 차이가 없었다. 단위 단백질 C-20 수산화효소 활성은 종자가 성숙함에 따라 현저히 감소하였다. 한편 단위 종자당 효소활성은 개화 후 21일 전후에서 최대치를 나타내었는데 이는 $GA_{20}$의 $3{\beta}$-수산화효소활성의 변화와 유사하였다.
안성지방에서 8월말경 마령서의 추작을 할때 남작을 2pm의 Gibberellin 용액에 10분간 침적해서 파종할 경우 종서의 취급방식이 파종후의 종서부패와 발아생육에 미치는 영향에 관해서 실험한 성적을 요약하면 다음과 같다. (1) 절단종서의 절단면을 직사일광에 조사하면 파종후의 종서부패와 발아생육의 지연을 초래하였는데 조사시간이 3시간이상 되면 피해는 막심하다. (2) 토양수분이 넉넉하고 직사일광에 오래 쏘이지만 ?\ulcorner으면 직파를 해도 최아정식하는 것 보다 종서부패가 많지 않다. (3) 종서부패가 적으면 직파하는 것이 최아정식하는 것보다 본포에서의 호착기간이 필요없기 때문에 생육이 빠르다. (4) 종서절편을 파종전 3일간 독속에 넣고 대하여 절구의 유상조직형성을 촉진해보려는 시도는 실해하였는데 이는 독속의 고습도유지가 안되었기 때문이라고 추측된다. (5) 처리 및 파종작업이 단기간에 끝인다면 일기의 영향은 청천이나 담천이나 다름이 없다. (6) 포장수분이 부족하지 않으면 관수를 해도 부패경감이나 발아촉진의 효과가 나타나지 않았다.
Background: Cytochrome P450 enzymes catalyze a wide range of reactions in plant metabolism. Besides their physiological functions on primary and secondary metabolites, P450s are also involved in herbicide detoxification via hydroxylation or dealkylation. Ginseng as a perennial plant offers more sustainable solutions to herbicide resistance. Methods: Tissue-specific gene expression and differentially modulated transcripts were monitored by quantitative real-time polymerase chain reaction. As a tool to evaluate the function of PgCYP736A12, the 35S promoter was used to overexpress the gene in Arabidopsis. Protein localization was visualized using confocal microscopy by tagging the fluorescent protein. Tolerance to herbicides was analyzed by growing seeds and seedlings on Murashige and Skoog medium containing chlorotoluron. Results: The expression of PgCYP736A12 was three-fold more in leaves compared with other tissues from two-year-old ginseng plants. Transcript levels were similarly upregulated by treatment with abscisic acid, hydrogen peroxide, and NaCl, the highest being with salicylic acid. Jasmonic acid treatment did not alter the mRNA levels of PgCYP736A12. Transgenic lines displayed slightly reduced plant height and were able to tolerate the herbicide chlorotoluron. Reduced stem elongation might be correlated with increased expression of genes involved in bioconversion of gibberellin to inactive forms. PgCYP736A12 protein localized to the cytoplasm and nucleus. Conclusion: PgCYP736A12 does not respond to the well-known secondary metabolite elicitor jasmonic acid, which suggests that it may not function in ginsenoside biosynthesis. Heterologous overexpression of PgCYP736A12 reveals that this gene is actually involved in herbicide metabolism.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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