The interaction of chemoattractant receptors and $G{\alpha}_{16}$ was studied to provide the molecular basis to elucidate the interaction of chemoattractant receptors with $G{\alpha}_{16}$ subunit, thereby possibly contributing to finding novel targets for designing new type of G protein antagonists with anti-inflammatory effects. Experiments were performed to characterize the $G{\alpha}_{16}$ subunit domains responsible for efficient coupling to chemoattractant receptors. Thus, a series of chimeric $G{\alpha}_{11}G{\alpha}_{16}$ and $G{\alpha}_{16}G{\alpha}_{11}$ cDNA constructs were expressed, and the ability of chimeric proteins to mediate C5a, IL-8, and fMLP-induced release of inositol phosphate in transfected Cos-7 cells was tested. The results showed that short stretches of residues 154 to residue 167 and from residue 174 to residue 195 of $G{\alpha}_{16}$ contribute to efficient coupling to the C5a receptor. On the other hand, a stretch of amino acid residues 220-240 of $G{\alpha}_{16}$ that is necessary for interacting with C5a receptor did not play any role in the interaction with IL-8 receptor. However, a stretch from residue 155 to residue 195 of $G{\alpha}_{16}$ was found to be crucial for efficient coupling to IL-8 receptor in concert with C-terminal 30 amino acid residues of this ${\alpha}$ subunit. Coupling profiles of a variety of chimeras, composed of $G{\alpha}_{11}G{\alpha}_{16}$ to fMLP receptor indicate that the C-terminal 30 amino acids are most critical for the coupling of $G{\alpha}_{16}$ to fMLP receptor. Taken together, $G{\alpha}_{16}$ subunit recruits multiple and distinctive coupling regions, depending on the type of receptors, to interact.
The present study intends to find a proper solution for the estimation of the physical behaviors of enlarged piles through a combination of small-scale laboratory tests and a hybrid computational predictive intelligence process. In the first step, experimental program is completed considering various critical influential factors. The results of the best multilayer perceptron (MLP)-based predictive network was implemented through three mathematical-based solutions of dragonfly algorithm (DA), whale optimization algorithm (WOA), and ant lion optimization (ALO). Three proposed models, after convergence analysis, suggested excellent performance. These analyses varied based on neurons number (e.g., in the basis MLP hidden layer) and of course, the level of its complexity. The training R2 results of the best hybrid structure of DA-MLP, WOA-MLP, and ALO-MLP were 0.996, 0.996, and 0.998 where the testing R2 was 0.995, 0.985, and 0.998, respectively. Similarly, the training RMSE of 0.046, 0.051, and 0.034 were obtained for the training and testing datasets of DA-MLP, WOA-MLP, and ALO-MLP techniques, while the testing RMSE of 0.088, 0.053, and 0.053, respectively. This obtained result demonstrates the excellent prediction from the optimized structure of the proposed models if only population sensitivity analysis performs. Indeed, the ALO-MLP was slightly better than WOA-MLP and DA-MLP methods.
화학주성인자를 선택하기 위하여 chemotactic factor로 영지추출액(靈芝抽出液), 대장균 배양액, N-fMLP 및 TC-199 medium을 사용하였으며 modified Boyden chamber와 Nuclepore membrane filter를 이용하여 백혈구의 유주능을 측정한 바 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 화학주성인자로 TC-199 medium과 N-fMLP 그리고 대장균 배양액을 사용하였을때, N-fMLP에서 백혈구의 유주능이 우수하었으나 대장균 배양액도 그에 못지않게 우수하였다. 2. 영지추출액(靈芝抽出液)을 PBS로 1.00%, 0.10%, 0.01%로 희석 조제하여 화학주성인자로 사용하였을때 비교적 저농도인 0.01%에서 우수하였다. 3. 영지추출액(靈芝抽出液)의 각 희석액 (1.00%, 0.10%, 0.01%)로 백혈구를 처리한 후 유주능을 실험(實驗)한 결과 0.01%에서 매우 우수하였다. 따라서 영지(靈芝) 추출액(抽出液)은 0.01%에서 우수한 유주능을 나타낸다는 사실을 알았다.
기존의 자기지도 학습 기반의 CutPaste 기법은 정상 이미지에서 특정 패치를 자르고 붙이는 방법으로 합성 데이터를 생성한 뒤 이상탐지를 수행하였다. 그러나 이런 방식으로 생성된 합성데이터는 패치의 경계에 뚜렷한 차이가 나타나는 문제가 발생된다. 이러한 문제를 해결하기 위한 NSA 기법은 Poisson Blending을 통해 자연스러운 합성 데이터를 생성하여 더 높은 이상탐지 성능을 달성하였다. 그러나 NSA 기법은 클래스마다 조정해야하는 하이퍼 파라미터가 많은 단점을 가지고 있다. 본 논문에서는 합성 패치의 크기를 매우 작게 하는 단순한 방법으로 정상과 유사한 합성 데이터를 생성하였다. 이 때 패치가 매우 지역적으로 합성되기 때문에, 지역적인 특징을 학습하는 모델을 사용하면 합성 데이터에 쉽게 과적합 될 수 있다. 따라서 전역적인 특징을 학습하는 gMLP를 사용하여 이상탐지를 수행하였고, 단순한 합성 방법으로도 기존 자기 지도 학습 기법보다 더 높은 성능을 달성할 수 있었다.
In this study, a comparative removal of chlorine from aqueous solutions of mulberry leaf powder(MLP) and activated carbon(AC) was investigated. The chlorine removal capacities of MLP and AC were shown as a function of contact time, pH and initial chlorine concentration. Optimum contact time and removal pH value of MLP were determined as 2 hr and pH 10, respectively. Chlorine removal increased with increasing initial chlorine concentration up to 1.3g/L. Both Langmuir and Freundlich adsorption models were suitable for describing the short-term removal of chlorine by MLP and AC. According to Freundlich adsorption isotherms, the maximum removal capacity of MLP(0.264 mg Cl$_2$/mg) was nearly two times greater than that of AC(0.56 mg Cl$_2$/mg). These results suggested that MLP might potentially be used as an alternative to traditional water treatment materials for removal of residual chlorine in drinking water or process wastewater.
Phosphipase D(PLD)는 호중구의 활성에서 중요한 신호전달 인자로 작용한다. 본 연구에서는 호중구에서 PLD의 활성화에 대한 nitric oxide(NO)와 cGMP의 영향을 조사하였다. 세포 내 NO의 생성을 증가시키는 물질인 sodium nitroprusside (SNP)를 단독으로 처리하였을 때 SNP를 처리하지 않은 세포에 비교하여 PLD 활성은 0.5 mM 농도에서 2배 이상 증가하였다. 세포 내 cAMP의 농도를 증가시키는 물질인 dibutyryl-cAMP를 처리하였을 때 formyl-Met-Leu-Phe(fMLP)에 의한 PLD활성은 억제되었으나 cGMP를 증가시키는 물질인 8-bromo-cGMP(300 $\mu$M)를 단독으로나 fMLP와 같이 처리하였을 때 PLD의 활성은 큰 영향이 없었다. NO에 의한 PLD의 활성은 cGMP-의존형 인산화 효소인 protein kinase G(PKG)의 억제제인 KT 5823에 의하여 억제되지 않았는데 이러한 결과는 PKG 이외의 경로를 통하여 일어남을 제시한다. NO를 처리한 호중구에서 p38 mitogen activated protein kinase(MAPK)가 활성화되어 인산화된 p38 MAPK가 Western blot에서 증가되었다. NO에 의한 p38 MAPK의 인산화는 KT 5823에 의하여 억제되지 않았고 PLD 억제제인 n-butanol에 의하여도 영향을 받지 않았다. PLD 활성의 인자인 RhoA는 fMLP나 phorbol myristate acetate(PMA)의 자극에 의하여 세포질로부터 세포막으로 전이가 되었으나 cGMP의 전처리에 의하여 fMLP에 의한 RhoA의 전이는 억제되었으나 PMA에 의한 전이는 영향을 받지 않았다. 이들 결과들은 호중구 내 증가된 cGMP가 RhoA를 억제하였으나 세포 내 증가된 NO는 cGMP 이외의 인자를 통하여 PLD의 활성화를 일으킨다는 것을 제시하고 있다.
본 연구에서는 머핀의 품질향상을 위한 기능성 천연소재의 개발을 위해 당뇨병과 고혈압 예방, 항산화 작용 및 해독작용이 있는 것으로 알려진 모링가 잎 분말을 0%, 1%, 3%, 5% 및 7%를 첨가한 머핀의 이화학적 및 관능적 특성과 생리활성을 탐색하였다. 머핀의 중량은 64.69~65.81 g으로 모링가 잎 분말의 첨가량이 증가할수록 증가하는 경향이었고, 높이는 5.58~6.08 cm로 첨가량이 증가할수록 유의적으로 감소하였으며(P<0.05), 굽기 손실률은 첨가량이 증가할수록 감소하는 경향이었다. 머핀의 pH는 첨가량이 증가함에 따라 유의적으로 감소하였으며(P<0.05), 수분함량은 3% 첨가군에서 30.48%로 가장 높았으나 첨가군들 사이에서는 유의적인 차이가 없었다. 머핀의 기계적 특성에서 경도는 무첨가군에서 가장 높게 나타났으나 1% 첨가군과는 유의적인 차이가 없었고, 응집성은 첨가량이 증가함에 따라 감소하였다. 탄력성은 무첨가군이 가장 높게 나타났으나 모든 시료간에 유의적인 차이는 없었고, 씹힘성과 파쇄성은 무첨가군에서 가장 높게 나타나 1~5% 첨가군들과는 유의적인 차이가 있었다(P<0.05). 모링가 잎 분말을 첨가한 머핀의 총페놀 함량은 첨가량이 증가함에 따라 유의적으로 증가하였고(P<0.05), DPPH 라디칼 소거능 또한 첨가량이 증가할수록 유의적으로 증가하였다(P<0.05). 모링가 잎 분말을 첨가한 머핀의 알코올 분해 활성을 측정한 결과 ADH 및 ALDH 활성 모두 첨가량이 증가할수록 유의적으로 증가하였다(P<0.05). 머핀의 관능적 특성을 측정한 결과 외관에 대한 기호도는 7% 첨가군에 가장 높게 나타났고, 내부 색과 맛에 대한 기호도는 무첨가군, 향은 5% 첨가군, 조직감은 1% 첨가군에서 가장 높게 나타났다. 전반적인 기호도는 3% 첨가군에서 5.43으로 가장 높게 나타났고 7% 첨가군에서 4.70으로 가장 낮게 나타났지만, 시료 간에 유의적인 차이는 없었다. 이상의 결과를 종합해보면 모링가 잎 분말을 3% 수준까지 첨가하여 머핀을 제조한다면 관능적 특성에 긍정적인 영향을 줄 뿐만 아니라 생리활성이 향상된 머핀을 제조할 수 있을 것으로 판단되며, 이는 모링가 잎을 이용한 식품개발의 기초자료로 제공될 수 있을 것으로 생각한다.
본 연구의 목적은 반응표면분석법을 통해 최적화한 뽕잎과 오디 혼합비율을 기본 녹두죽에 첨가하여 고혈압 개선에 도움을 줄 수 있는 기능성 죽을 개발하는 것이다. 뽕잎분말과 오디분말을 독립변수로 하였고, 칼륨, 나트륨, GABA, C3G, rutin 및 flavonoid를 종속변수로 하여 뽕잎분말과 오디분말의 최적 혼합비율을 모니터링 하고자 하였다. 반응표면분석법을 이용하여 산출된 뽕잎분말과 오디분말의 최적 혼합비율 함량은 뽕잎분말 함량 5.41 g, 오디분말 함량 2.65 g이었다. 이때 종속변수들의 최적 함량은 칼륨 함량이 1,844.22 mg/100 g, 나트륨 함량이 52.74 mg/100 g, GABA 함량은 139.98 mg/100 g, C3G 함량은 1,134.89 mg/100 g, rutin 함량은 101.56 mg/100 g 및 flavonoid 함량은 201.28 mg/100 g으로 나타났다. 최적 혼합비율의 뽕잎분말(5.41 g)과 오디분말(2.65 g)을 첨가한 기능성 죽을 제조하여 일반 성분과 무기질 함량 분석을 한 결과 수분 함량은 88.54 g, 탄수화물 함량은 8.77 g, 단백질 함량은 2.24 g, 지방 함량은 0.04 g, 조회분 함량은 0.41 g으로, 최적 혼합비율의 뽕잎분말과 오디분말을 첨가한 녹두죽의 탄수화물, 단백질, 지방, 조회분 및 무기질 함량이 뽕잎과 오디의 혼합분말이 첨가되지 않은 기본 녹두죽보다 모두 높았다. 결론적으로 최적 혼합비율의 뽕잎분말과 오디분말이 첨가된 기능성 죽은 고혈압 개선에 도움을 줄 수 있는 칼륨, 나트륨, GABA, C3G, rutin 및 flavonoid와 같은 기능성 성분이 우수하여 고혈압 환자의 혈압개선에 도움을 줄 수 있을 것이다.
한국산 도롱뇽 유생의 다리재생에 미치는 retinoic acid의 효과를 알아보았다. 도롱뇽 유생의 다리를 distal zeugopodium 또는 distal stylopodium 부위에서 절단하고 절단 후 4일째에 복강내 주사방법으로 RA를 처리한 결과 근원위 축상에서 재생된 골격이 복제되어 근위부화한 형태를 나타내었다. RA처리에 따른 골격 재생이 평균 근위 부화정도는 처리량이 증가와 더불어 증가하였으며 또한 절단부위를 달리하였을 경우에도 영향을 받았다. 근원위 축상에서 평균 근위부화정도의 최대치에 근접한 값은 처리량을 150 $\mu$ g/g body wt.로 했을 때 얻어졌으며 이 처리량을 넘어서는 경우에는 재생의 저해 혹은 주변으로부터의 골격복제 현상이 나타났으며 그 빈도 역시 처리량의 증가와 함께 상승하였다. 이러한 실험결과는 RA처리에 의하여 유발되리라고 보여지는 positional value의 변화가 근원위축을 비롯한 3개의 주요 축상에서 점진적으로 일어남을 시사하며, zeugopodium의 복제가 stylopodium의 복제보다 쉽게 일어난다는 사실은 근원위축상에서 세포들의 RA에 대한 민감성이 동이하지 않거나 혹은 positional value의 배열양상이 직선적이 아님을 시사하고 있다.
식세포인 호중구나 단핵세포는 생체외실험에 사용하기 위한 세포분리법인 플라스틱 표면부착만으로도 세포활성화가 일어나 이후의 실험결과에 영향을 주고 이 과정에 부착분자가 연관되어 있는 것으로 알려져 있다. 폐의 주된 면역세포인 폐포대식세포도 대부분 플라스틱 표면부착에 의해 세포를 분리하므로 사람의 폐포대식세포가 표면부착 자체에 의해 활성화되는지 알아보고 세포활성회에 부착분자와 같은 기전이 관여하는지 밝히기 위해 적어도 한 쪽 폐가 정상인 사람에서 기관지폐포세척술을 통해 얻은 폐포대식세포를 대상으로 표면 부착이 미치는 영향을 과산화수소 분비량 측정으로 분석하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1) 폐포대식세포는 플라스틱 표면에 부착되면 부착 자체에 의해 과산화수소 분비능이 증가하고 이런 상태에서는 PMA나 fMLP와 같은 추가적인 화학자극물질에 의해 과산화수소 분비가 증가되지 않았다. 2) 여러가지 표면중 A549세포단층에 부착될 경우에만 이후의 PMA와 fMLP자극 모두에 의해 과산회수소 분비가 증가하였다. 3) PMA는 세포 부착여부에 관계없이 과산화수소 분비를 자극하지만 fMLP는 폐포대식세포가 표면에 부착된 상태에서만 자극효과가 나타났고 이런 부착세포에서의 fMLP에 의한 과산회수소 분비 효과는 단백합성억제제인 cycloheximide, G단백차 단제인 일해독소와 $\beta_2$ integrin 부착분자에 대한 항체인 항CD18 단세포항체 3가지 모두의 의해 차단되었다. 이상의 결과로 사람의 폐포대식세포는 플라스틱 부착자체에 의해 활성화되므로 부착 이후의 자극물질에 대한 효과가 반감되지만 폐포상피세포와 같은 생물학적 표면에 부착될 경우에는 이후의 세포자극에 민감하게 반응한다는 것을 알 수 있었고, PMA는 세포 부착여부에 관계없이 세포를 자극하는 반면 fMLP는 세포 부착상태에서만 자극효과가 나타나며 이런 부착세포에서의 fMLP에 의한 산소유리기 자극효과는 G단백결합 수용체를 통한 새로운 단백합성 과정으로 이루워지면서 $\beta_2$ integrin을 통한 폐포대식세포와 폐포상피세포의 부착에 의존하는 것으로 사료된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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