최근 몇몇 버섯의 바이러스가 보고되었으며, Lentinula edodes Spherical Virus (LeSV) 역시 보고되었다. 곰팡이 바이러스는 종균에 의해 전파되기 때문에 농장에서 버섯 바이러스병을 근절하기 위해서는 건전 종균을 사용하는 것이 중요하다. 이에 표고버섯 바이러스인 LeSV의 RdRp 유전자에 특이적인 primer 및 RT-PCR 조건을 이용하여 해외에서 도입한 표고종균을 대상으로 LeSV 감염도를 조사하였다. 분석결과 해외도입 종균의 99%가 LeSV에 감염된 것으로 나타났다.
Double-stranded RNA (dsRNA) viruses and single-stranded RNA(ssRNA) viruses were detected in a strain of Pleurotus mushroom cultivated in a farm. Those fungal virsus were purified in the pH 6.0 or pH 7.2 using CsCI or Cs$_{2}$SO$_{4}$ buoyant density centrifugation. Each viral particles were not completely separated at any trials. However, mushroom bacili-form virus contains a single major nucleic acid with 0.7 Kb ssRNA, which might code for 20 Kd viral capsid protein. The dsRNAs are encapsidatred into spherical-form viruses, whereas ssRNA viral genomes are encapsidated into two different sizes of bacili-form particles. A healthy-looking mushroom also contained some spherical-form viruses with dsRNAs. Laboratory strains of Pleurotus ostreatus and a cultivated strain of P. sajor-caju did not show any viral particles. Mushrooms with specific disease symptoms. however, contained at least four different sizes of spherical-form viruses. Thus, we concluded that a bacilli-form virus case a severe disease symptoms of adnormal on mushroom development.
A double-stranded RNA (dsRNA) mycovirus was detected in malformed fruiting bodies of Pleurotus ostreatus strain ASI2792, one of bottle cultivated commercial strains of the edible oyster mushroom. The partial RNA-dependent RNA polymerase (RdRp) gene of the P. ostreatus ASI2792 mycovirus (PoV-ASI2792) was cloned, and a cDNA sequences alignment revealed that the sequence was identical to the RdRp gene of a known PoSV found in the P. ostreatus strain. To investigate the symptoms of PoV-ASI2792 infection by comparing the isogenic virus-free P. ostreatus strains with a virus-infected strain, isogenic virus-cured P. ostreatus strains were obtained by the mycelial fragmentation method for virus curing. The absence of virus was verified with gel electrophoresis after dsRNA-specific virus purification and Northern blot analysis using a partial RdRp cDNA of PoV-ASI2792. The growth rate and mycelial dry weight of virus-infected P. ostreatus strain with PoV-ASI2792 mycovirus were compared to those of three virus-free isogenic strains on 10 different media. The virus-cured strains showed distinctly higher mycelial growth rates and dry weights on all kinds of experimental culture media, with at least a 2.2-fold higher mycelial growth rate on mushroom complete media (MCM) and Hamada media, and a 2.7-fold higher mycelial dry weight on MCM and yeast-malt-glucose agar media than those of the virus-infected strain. These results suggest that the infection of PoV mycovirus has a deleterious effect on the vegetative growth of P. ostreatus.
Kim, Jung-Mi;Yun, Suk-Hyun;Park, Seung-Moon;Ko, Han-Gyu;Kim, Dae-Hyuk
The Plant Pathology Journal
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제29권4호
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pp.460-464
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2013
dsRNA was found in malformed cultures of Lentinula edodes strain FMRI0339, one of the three most popular sawdust cultivated commercial strains of shiitake, and was also found in healthy-looking fruiting bodies and actively growing mycelia. Cloning of the partial genome of the dsRNA revealed the presence of the RdRp sequence of a novel L. edodes mycovirus (LeV), and sequence comparison of the cloned amplicon showed identical sequences sequence to known RNA-dependent RNA polymerase genes of LeV found in strain HKA. The meiotic stability of dsRNA was examined by measuring the ratio of the presence of dsRNA among sexual monokaryotic progeny. More than 40% of the monokaryotic progeny still contained the dsRNA, indicating the persistence of dsRNA during sexual reproduction. Comparing the mycelia growth of monokaryotic progeny suggested that there appeared to be a tendency toward a lower frequency of virus incidence in actively growing progeny.
Mycoviruses have been found in many fungal species including mushrooms. Double-stranded (ds) RNA genomes were common type in mycoviruses, but single-stranded (ss) RNA mycoviruses were also reported in some fungal species. Sequencing analysis using cDNA cloning experiments revealed that mycoviruses can be classified into several different virus families such as Totiviridae, Hypoviridae, Partitiviridae and Barnaviridae etc. Because the nucleotide sequence data that are available in these days are very limited in a number of mycoviruses, the existence of more diverse viral groups in fungi are currently expected. In this review, we selected four different fungal groups, which were considered as the model systems for mycovirus related studies in both plant pathogenic fungi and edible mushroom species, and discussed about their molecular characteristics of diverse mycoviruses. The plant pathogenic fungi introduced here were Cryphonectria parasitica and Helminthosporium victoriae and the edible mushroom species were Agaricus bisporus and Pleurotus ostreatus.
SH-14, a novel killer strain of Ustilago maydis was isolated in Korea. It has been reported in other papers that the toxin specificity and double-stranded RNA pattern of SH-14 strain were different from other laboratory strains. In this paper, we analyzed the biochemical characteristics of U. maydis SH-14 virus. Three distinctive peaks were isolated from CsCl density gradient, designated as top (T), intermediate (I) and bottom (B) components. We found that the densities of each components, 1.285, 1.408 g/cm$\^$3/, respectively, are very similar to those of other strains. As previously reported by the analysis of dsRNA in each component, the dsRNA segments are separately encapsidated. Capsid protein of SH-14 virus consists of two proteins about 70 Kd shown by SDS-PAGE analysis. Electron microscopic examination of the virus particles revealed that UmV particles are very similar in size and morphology to all isolates as well as all lab-strains. In order to test immunological cross reactivity of UmV, werstern bolt analysis was carriedout with antiserum against A8 virus. All capsid protein had positive reaction against A8 antibody which indicated that UmV are immunologically cross-reactive with all isolates from Korea. The results presented in this paper may show that UmV isolated from SH-14 strain has very similar biochemical characteristics to those of other UmV. However, the difference in the toxin specificity and the molecular weight of toxin protein from the SH-14 strain has us to conclude that U. maydis SH-14 strain is a new killer type.
In response to fungal invasion and other signals, plants accumulate a number of proteins that are involved in defense against pathogens. Osmotin is a 24 kDa protein belonging to the pathogenesis-related (PR) protein, a component of the hypersensitive response in leaves of tobacco plants exposed to tobacco mosaic virus.(omitted)
Peyambari, Mahtab;Habibi, Mina Koohi;Fotouhifar, Khalil-Berdi;Dizadji, Akbar;Roossinck, Marilyn J.
The Plant Pathology Journal
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제30권2호
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pp.151-158
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2014
Three double-stranded RNAs (dsRNAs), approximately 1.85, 1.65 and 1.27 kb in size, were detected in an isolate of Cytospora sacchari from Iran. Partial nucleotide sequence revealed a 1,284 bp segment containing one ORF that potentially encodes a 405 aa protein. This protein contains conserved motifs related to RNA dependent RNA polymerases (RdRp) that showed similarity to RdRps of partitiviruses. The results indicate that these dsRNAs represent a novel Partitivirus that we tentatively designate Cytospora sacchari partitivirus (CsPV). Treatment of the fungal strain by cyclohexamide and also hyphal tip culture had no effect on removing the putative virus. Phylogenetic analysis of putative RdRp of CsPV and other partitiviruses places CsPV as a member of the genus Partitivirus in the family Partitiviridae, and clustering with Aspergillus ochraceous virus 1.
This study investigated the occurrence of honeybee diseases in Incheon area, at the point of great widespread of sacbrood disease in the country. Sixteen resident beekeeping apiaries; 3 native honeybee and 13 European honeybee apiaries were selected for this research. Over 20 adult bees were evenly collected from the most colonies of each apiary three times (March, June, November) within a year. In this work, 13 honeybee diseases including 7 viral diseases, 2 bacterial diseases, 2 fungal diseases, and 2 parasitic diseases were detected by preliminary inspections and PCR. As a result, viral infections were confirmed at 34 among 48 apiaries (70.8%) over the entire examination period. Parasitic diseases showed the highest detection rate of 45.8%, which are detected in 44 among 96 cases. In the seasonal prevalence, 30 cases (15.6%) of 7 pathogens were detected from 14 apiaries in March, 50 cases (24.0%) of 9 pathogens and 56 cases (26.9%) of 9 pathogens were detected from all apiaries in June and November, respectively. Nosema was shown to be the most prevalent pathogen from March to November, followed by sacbrood virus (SBV) and stonebrood. The spread of SBV infection in Incheon would be under-estimated by the increasing of detection rate over the time. Especially, Chinese sacbrood virus was detected from 4 European honybee apiaries, but clinical symptoms were not found. No chalkbrood, acute bee paralysis virus, and chronic bee paralysis virus were detected in this study. The effective therapy and preventive measures should be prepared for beekeeping industry.
보리누른모자이크병은 토양전염성 곰팡이인 Polymyxa graminis (P. graminis)에 의해 매개된다. 본 연구에서는 BaYMV 이병토양 및 이병주 뿌리로부터 P. graminis의 PCR 검정방법을 확립하였다. P. graminis type I (P. graminis f.sp. temperata) Internal Transcribed Spacer (ITS) 영역의 염기서열 특이적인 primer를 제작하고, 이병토양 및 이병주의 뿌리와 잎으로부터 DNA를 추출하여 PCR 검정을 실시하였다. 결과 P. graminis는 이병토양 및 이병주 뿌리로부터 검출되었다. 남부지역의 대표적인 보리 재배지역 8개 지역으로부터 이병토양을 채집하여 PCR 검정에 의해 P. graminis의 분포상황을 조사하였다. 결과 조사한 지역 전체에서 P. graminis의 분포가 확인되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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