Ha, Young Ran;Hwang, Bae-Geun;Hong, Yeonchul;Yang, Hye-Won;Lee, Sang Joon
Parasites, Hosts and Diseases
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제53권4호
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pp.421-430
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2015
The parasite Plasmodium falciparum causes severe malaria and is the most dangerous to humans. However, it exhibits resistance to their drugs. Farnesyltransferase has been identified in pathogenic protozoa of the genera Plasmodium and the target of farnesyltransferase includes Ras family. Therefore, the inhibition of farnesyltransferase has been suggested as a new strategy for the treatment of malaria. However, the exact functional mechanism of this agent is still unknown. In addition, the effect of farnesyltransferase inhibitor (FTIs) on mitochondrial level of malaria parasites is not fully understood. In this study, therefore, the effect of a FTI R115777 on the function of mitochondria of P. falciparum was investigated experimentally. As a result, FTI R115777 was found to suppress the infection rate of malaria parasites under in vitro condition. It also reduces the copy number of mtDNA-encoded cytochrome c oxidase III. In addition, the mitochondrial membrane potential (${\Delta}{\Psi}m$) and the green fluorescence intensity of MitoTracker were decreased by FTI R115777. Chloroquine and atovaquone were measured by the mtDNA copy number as mitochondrial non-specific or specific inhibitor, respectively. Chloroquine did not affect the copy number of mtDNA-encoded cytochrome c oxidase III, while atovaquone induced to change the mtDNA copy number. These results suggest that FTI R115777 has strong influence on the mitochondrial function of P. falciparum. It may have therapeutic potential for malaria by targeting the mitochondria of parasites.
한국생명과학회 2005년도 국제학술심포지움 The 44th Annual Meeting of Korean Society for Life Science
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pp.23-36
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2005
Bax, a mammalian pro-apoptotic member of the Bcl-2 family, induces cell death when expressed In yeast. To investigate whether .Bax expression can induce cell death in plant, we produced transgenic Arabidopsis plants that contained murine Bax cDNA under control of a glucocorticoid-inducible promoter. Transgenic plants treated with dexamethasone, a strong synthetic glucocorticoid, induced Bax accumulation and cell death, suggesting that some elements of cell death mechanism by Bax may be conserved among various orgarusms. Therefore, we developed novel yeast genetic system, and cloned several Plant Bax Inhibitors (PBIs). Here, we report the function of two PBIs In detail. PBIl is ascorbate peroxidase (sAPX). Fluorescence method of dihydrorhodamine123 oxidation revealed that expression of Bax in yeast cells generated reactive oxygen species (ROS), and which was greatly reduced by co-expression with sAPX. These results suggest that sAPX inhibits the generation of ROS by Bax, which in turn suppresses Bax-induced cell death in yeast. PBI2 encodes nucleoside diphosphate kinase (NDPK). ROS stress strongly induces the expression of the NDPK2 gene in Arabidopsis thaliana (AtNDPK2). Transgenic plants overexpressing AtNDPK2 have lower lovels of ROS than wildtype plants. Mutants lacking AtNDPK2 had higher levels of ROS than wildtype. H$_{2O2}$ treatment induced the phosphorylation of two endogenous proteins whose molecular weights suggested they are AtMPK3 and AtMPK6. In the absence of H2O2 treatment, phosphorylation of these proteins was slightly elevated in plants overexpressing AtNDPK2 but markedly decreased In the AtNDPK2 deletion mutant. Yeast two-hybrid and in vitro protein pull-down assays revealed that AtNDPK2 specifically interacts with AtMPK3 and AtMPK6. Furthermore, AtNDPK2 also enhances the MBP phosphorylation activity of AtMPK3 i'n vitro. Finally, constitutive overexpression of AtNDPK2 in Arabidopsis plants conferred an enhanced tolerance to multiple environmental stresses that elicit ROS accumulation In situ. Thus, AtNDPK2 appears to play a novel regulatory role in H2O2-mediated MAPK signaling in plants.
Allium hookeri, a member of the onion family, has long been mainly cultivated for food and medicinal use in Southeast Asian countries, owing to its various biological properties. However, no studies of the anti-oxidative effects of fermented A. hookeri root extracts have been conducted to date. Therefore, this study investigated the effect of different starter cultures on the antioxidant activities of hot water extract of A. hookeri root by using the following five strains: Lactobacillus acidophilus, Bifidobacterum longum, Enterococcus faecium, Streptococcus thermophilus, and Saccharomyces cerevisiae. DPPH and ABTS radical scavenging activity, total phenolic acid contents, and total antioxidant capacity were higher in the hot water extract of A. hookeri root fermented with starter cultures than those of A. hookeri root. Among hot water extract of A. hookeri root fermented with starter cultures, fementing with S. cerevisiae showed the highest antioxidant activities. The results of this study provide new evidence of the anti-oxidative properties of A. hookeri root with starter cultures, indicating that it may be highly valuable as a natural product owing to its high-quality functional components.
한국응용약물학회 2007년도 Proceedings of The Convention of The Korean Society of Applied Pharmacology
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pp.147-153
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2007
Central to developing new treatment strategies for late onset sporadic Parkinson's disease (PD) and early onset familial PD is resolving the enigma of the specific vulnerability exhibited by substantia nigra dopamine (DA) neurons despite multiple risk factors. Neuropathological evidence from both human and experimental models of PD firmly supports a significant role for oxidative stress (OS) and mitochondrial dysfunction in the death of nigral DA neurons. Largely unknown are the genes underlying selective susceptibility of nigral DA neuron to OS and mitochondrial dysfunction and how they effect nigral DA cell death. To overcome the paucity of nigral DA neurons as well as the dilution effect of non-DA cells in brain tissues, we have developed wild type DA cell line model, SN4741 and mutant DJ-1 (-/-) DA cells, appropriate for microarray analysis and differential mitochondrial proteomics. Mutations in the DJ-1 gene (PARK7), localized in cytoplasm and mitochondria, cause autosomal recessive early onset PD. Through microarray analysis using SN4741 cells followed by validation tests, we have identified a novel phylogenically conserved neuroprotective gene, Oxi-a, which is specifically expressed in DA neurons. The knockdown of the gene dramatically increased vulnerability to as. Importantly as down-regulated the expression level of the gene and recovery of its expression via transient transfection exerted significant neuroprotection against as insult. We also have identified altered expression of mitochondrial proteins and other familial PD genes in DJ-1 (-/-) mutant cells by differential mitochondrial proteomics. In DJ-1 (-/-) cells the knockdown of the other familial PD genes (Parkin and PINK1) dramatically increased susceptibility to as. Thus, further functional characterization of the Oxi-$\alpha$ gene family and the mitochondrial alteration in the DJ-1 (-/-) cell model will provide the rationale for the neuroprotective therapy against both sporadic and familial PD.
Glycosyltransferases are enzymes (EC 2.4) that catalyze the transfer of monosaccharide moieties from activated nucleotide sugar to a glycosyl acceptor molecule which can be a carbohydrate, glycoside, oligosaccharide, or a polysaccharide. In this study, a UDP-glucosyltransferase cDNA was isolated from Brassica rapa using a rapid amplification of cDNA ends (RACE) and subsequently named BrUGT. It has a full-length cDNA of 1,236 bp with 119 bp 5'-untranslated region (UTR), a complete ORF of 834 bp encoding a polypeptide of 277 amino acids (31.19 kDa) and a 3'-UTR of 283 bp. BLASTX analysis hits a catalytic domain of Glycos_transf_1 super family (cl12012) that belongs to the Glycosyltransferases group 1 with tetratricopeptide (TPR) regions located between 165 to 350 bp. Expression analysis showed high mRNA transcripts in pistil, followed by petal, seed and calyx of flower. Moreover, expression analysis of BrUGT in Chinese cabbage seedlings under stresses of cold, salt, PEG, $H_2O_2$, drought and ABA showed elevated mRNA transcript. Furthermore, when BrUGT gene was transformed into rice using pUbi-1 promoter, overexpression was evident among the $T_1$ plants. This study provides insights into the function of BrUGT in plants.
Invertase (${\beta}$-D-fructofuranosidase; EC 3.2.1.26) catalyzes the conversion of sucrose into glucose and fructose and is involved in an array of important processes, including phloem unloading, carbon partitioning, the response to pathogens, and the control of cell differentiation and development. Its importance may have caused the invertases to evolve into a multigene family whose members are regulated by a variety of different mechanisms, such as pH, sucrose levels, and inhibitor proteins. Although putative invertase inhibitors in the Arabidopsis genome are easy to locate, few studies have been conducted to elucidate their individual functions in vivo in plant growth and development because of their high redundancy. In this study we assessed the functional role of the putative invertase inhibitors in Arabidopsis by generating transgenic plants harboring a putative invertase inhibitor gene under the control of the CaMV35S promoter. A transgenic plant that expressed high levels of the putative invertase inhibitor transcript when grown under normal conditions was chosen for the current study. To our surprise, the stability of the invertase inhibitor transcripts was shown to be down-regulated by the phytohormone ABA (abscisic acid). It is well established that ABA enhances invertase activity in vivo but the underlying mechanisms are still poorly understood. Our results thus suggest that one way ABA regulates invertase activity is by down-regulating its inhibitor.
Objectives: The purpose of this study was to examine the subjective oral health awareness, oral health knowledge, oral health behavior and OHIP-14 in industrial workers. Methods: A self-reported questionnaire was filled out by 243 workers in Jeonbuk May 7 to June 10, 2014. Except incomplete answers, 230 data were analyzed. The questionnaire consisted of general characteristics of the subjects(sex, age, career, marital status, abd family), oral health recognition characteristics(oral health attention, subjective oral health status, and oral health concern), oral health knowledge, oral health behavior, and oral health related quality of life. The instrument was 14 questions od OHIP-14 including functional restriction(2 questions), physical pain(2 questions), psychological discomfort(2 questions), physical ability decease(2 questions), psychological function decease(2 questions), social activity decrease (2 questions), and social discomfort(2 questions). Cronbach's alpha was 0.949 in this study and it was reliable. Results: Oral health interests showed that 57.8% of the workers had concern for oral health interests and 50.4% perceived that their subjective oral health was moderate status. 55.6% of the workers answered that their oral health status was very worried. Women had more knowledge about the oral health. Those who were in fifties tended to have more knowledge of oral health than the other age groups. Those who had more concern for oral health included female workers, married workers, and workers above 21 years. The concern for oral health made the workers keep good oral health. Higher score of OHIP-14 means good oral health. Conclusions: Good oral health-related quality of life is proportional to continuous management of oral health and subjective oral health status. It is necessary to develop the tailored oral health education program for the workers.
본 실험은 electron spin/paramagnetic resonance(ESR/EPR)를 이용하여 기존의 DPPH free radical 소거 활성을 측정하였고, 이를 해조류 유래 천연자원으로부터 새로운 항산화물질을 탐색하는데 적용해 보았다. 연구 결과, 녹조류 추출물에서는 참홑파래, 납작파래 및 청각의 고온 메탄올 추출물에서만 약간의 라디칼 소거활성을 나타내었고, 이 외의 추출물에서는 소거활성이 거의 보이지 않았다. 갈조류는 총 71개의 추출물 중 37개의 추출물에서 80% 이상의 소거율을 보여 아주 우수한 항산화 물질을 가진 family로 여겨지며, 특히 모자반류 (Sargassum spp.)는 수용성과 메탄올, 고온과 상온의 모든 추출물에서 높은 라디칼 소거 활성을 보여 앞으로의 신소재 물질 후보로 선별되었다. 홍조류에서는 수용성보다는 메탄올 추출물에서 대체적으로 높은 소거활성이 검색되어, 나중에는 유기용매 분획물을 제조하여 라디칼 소거능을 측정 할 수 있을 것이다. 이처럼 해조류는 라키칼 소거 능력을 가지는 성분을 여러 형태로 다량으로 함유 하고 있는 것으로 사료 되며 앞으로의 연구에 기대가치를 더해 줄 것으로 사료된다.
본 연구에서 루꼴라(Eruca sativa)에 대한 다양한 생리활성을 조사하여 기능성소재 응용가능성을 검토하였다. 루꼴라 추출물은 B. subtilis, E. coli, C. albicans에 대한 항균활성이 매우 우수하게 나타났으며 특히 그람양성세균 B. subtilis에 대한 항균활성이 높았다. 또한, 인볼루크린 발현에 대한 면역조직화학 분석을 인공피부를 이용하여 분석한 결과 루꼴라 추출물을 처리(50 mg/L)한 경우에 0.1% DMSO로 처리한 대조군에 비하여 인볼루크린 발현이 뚜렷하게 증가하였으며 동일농도로 처리된 합성물질 WY14643과 비교하였을 때에도 비슷한 발현양상을 보여 주었다. 이와 같은 결과로 미루어 볼 때 루꼴라 추출물은 피부염 개선 및 피부장벽 기능을 향상할 수 있는 천연물 기반의 소재로 활용하기 위한 매우 효과적인 재료가 될 수 있다고 사료된다.
Park, Seong-Hwan;Park, Hyun-Ho;Lim, Young-Jun;Kang, Min-Suk;Lim, Byung-Kook;Seong, Ihn-Sik;Jimin Wang;Chung, Chin-Ha;Eom, Soo-Hyun
한국결정학회:학술대회논문집
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한국결정학회 2002년도 정기총회 및 추계학술연구발표회
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pp.25-25
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2002
CodWX, encoded by the cod operon in Bacillus subtilis, is a member of the ATP-dependent protease complex family, and is homologous to the eukaryotic 26S proteasome. It consists of two multimeric complexes: two hexameric ATPase caps of CodX and a protease chamber consisting of CodW dodecamer. Prior structural studies have shown that the N-terminal threonine residue is solely functional as a proteolytic nucleophile in ATP-dependent proteases such as HslV and certain β-type subunits of 20S proteasome, which have a primary sequence similarity of -50% and -20% with CodW respectively. Here we present a 3.0 Å resolution crystal structure of CodW, which is the first N-terminal serine protease among the known proteolytic enzymes. In spite of the same fold and the conserved contacts between subunits with HslV in E. coli and H. influenza, this structure shows the five additional residues extending from conserved Thr1 among the other ATP-dependent pretense and extraordinary basic proteolytic chamber.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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