This experiment was conducted on the fowl pox embryo vaccine for the production immunity, and stability, using an attenuated fowl pox virus (Nakano strin). Burnet's window method was applied, that is, 0.1 ml. of seed virus was inoculated on the chorioallantoic membrane of 12-day old chicken embryos, and incubated for 5 to 6 day, and then the result were read. Four kinds of suspensions of different embyo tissue were prepared and tested for the infectivity in chickens. Finally the suspension of chorioallantoic membrane was used as the vaccine throughout the experiment. Results obtained in this experiment are summarized as follows: (1) Of embryo tissue infected with the vaccine virus, chorioallantoic membrane had the highest virus titer of $10^{-5.4}$$EID_{50}$, and albumen the lowest titer of $10^{-0.7}$$EID_{50}$. (2) Suspensions of infected whole embryo with or without saline, and de-embryonated whole egg had about the same virus titer of $10^{-4.4}$$EID_{50}$, whereas the chorioallantoic membrane had $10^{-5.7}$ EID 50 or higher. The virus titer droped one log from $EID_{50}$ when inoculated into chickens. Takes were observed 35.6% of 500 chickens by stick method and 89% of 500 chickens by brush method. (3) The chorioallantoic membrane conferred almost perfect immunity for chickens by 10 days after vaccination. (4) Satisfactory immunity was observed in the chickens when eruption in a single follicle. (5) Eight of 10 vaccinated chickens revealed durable immunity for 307 days following vaccination. (6) The vacuum-dried vaccine maintained its infectiviy for 899 days at $5^{\circ}C$ or below and maintained the vius titer of $10^{-3.6}$$EID_{50}$. On the other hand, non-desiccated wet vaccine maintained the titer of $10^{-3.0}$$EID_{50}$ for 50 days of preservation period at $5^{\circ}$. However, in 50% glycerin-saline the infectivtiy of the same wet vaccine dropped to $10^{-1.5}$$EID_{50}$ (7) The vartation of virus titer of the vaccine before and after desiccation was $10^{-0.5}$$EID_{50}$ on the average. (8) As suspending media, 0.85 per cent saline and distilled water showed nearly the same effect on the infectivity of the vaccine by retaining the titer $10^{-3.0}$$EID_{50}$ after 50 days of preservation both at $5^{\circ}C$ and $20^{\circ}C$, while 50 percent cent glycerine-saline dropped the titer to $10^{-2.5}$ EID and $10^{-1.5}$$EID_{50}$ respectively at $5^{\circ}C$ and $2^{\circ}C$ after the same period.
Han, Jeung Hi;Song, Ji Hoon;Kim, Young Eun;Lee, Yu Hee;Lee, Jung Min;Lee, Ji Ean
Journal of the Society of Cosmetic Scientists of Korea
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v.44
no.1
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pp.49-57
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2018
In this study, we investigated the anti-aging effect of Rosa damascena extract containing low molecular glycoprotein (RELG) converted from the high molecular glycoprotein by bioconversion. Free radical scavenging activities were performed by 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) assay. Antioxidant activities ($IC_{50}$) of RELG and the positive control ascorbic acid were $22.6{\mu}g/mL$ and $21.1{\mu}g/mL$, respectively. For skin cells, $15{\mu}g/mL$ RELG showed 28% antioxidant activity by inhibiting the production of active oxygen species induced by ultraviolet ray and hydrogen peroxide. $15{\mu}g/mL$ RELG prevented 10% the cell death caused by stress in human hair follicle dermal papilla cells (HDPC) and reduced 90% the production of active oxygen species. In addition, the glycoprotein showed not only anti-wrinkle effect but also moisturizing effect by 48% inhibition of matrix metallo proteinase-1 (MMP-1) production by ultraviolet stress and $10{\mu}g/mL$ RELG enhanced 10% neutral lipid synthesis with 44% aquaporin 3 (AQP3) expression, which is moisture factor. In conclusion, the RELG can be used as an anti-aging cosmetic material.
The role of amino acids in culture media for IVF-ET was examined in a total of 76 cycles. Patients received clomiphene citrate (CC) followed by hMG or GnRH-a combined with gonadotropins (FSH/hMG) for controlled ovarian hyperstimulation. Severe male (<$4{\times}10^6$ motile sperm) or age factor (>39 y) patients were excluded in this study. Pregnancy was classified as clinical if a gestational sac or fetal cardiac activity was seen on ultrasound. No significant differences were found in age, duration of infertility, follicle size, the level of $E_2$ on the day of hCG injection, the mean number of oocytes retrieved, total motile sperm count, fertilization rate and the mean number of embryos transferred between bHTF (without amino acids) and mHTF (with amino acids) groups. However, total ampules of gonadotropins were higher (p<0.01) in mHTF group than bHTF group. Significantly (p<0.05) more clinical pregnancies were recorded in mHTF group (13/30) compared with bHTF group (9/46). The multiple pregnancy rates were 11.1% in bHTF group and 7.7% in mHTF group. There were one ectopic pregnancy in mHTF group and one heterotopic pregnancy in bHTF group. Abortion rates were 22.2% in bHTF group and 7.7% in mHTF, respectively. The ongoing pregnancy or livebirth rate was significantly (p<0.05) higher in mHTF group (12/30) than bHTF group (7/46). These results suggest that the addition of amino acids in culture media is essential for culture of zygotes in vitro and adjustment of energy substrates in phosphate-free culture media appears to be beneficial for human IVF-ET procedure.
Park, Jung-Won;Park, Byung-Ki;Kim, Sang-Mok;Kim, Byung-Ock;Park, Joo-Cheol
Journal of Periodontal and Implant Science
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v.32
no.1
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pp.1-12
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2002
The periodontal ligament(PDL) is a unique tissue that is crucial for tooth function. However, little is known of the molecular mechanisms controlling PDL function. PDL-specific protein;PDLs22 had been previously identified as a novel protein isolated from cultured human PDL fibroblasts using subtraction hybridization between human gingival fibroblasts and PDL fibroblasts. The aim of this study was to examine the expression pattern and tissue localization of PDLs22 protein in embryonic and various postnatal stages of developing mouse using immunohistochemical staining. Embryos (E18) and postnatal (P1, P4, P5, P15, P18) were decapitated and the heads were fixed overnight in a freshly prepared solution of 4% paraformaldehyde. Some specimens were decalcified for $2{\sim}4$ weeks in a solution containing 10% of the disodium salt of ethylenediamine-tetraacetic acid (EDTA). Next, tissues were dehydrated, embedded in paraffin and sectioned serially at $6{\mu}m$ in thickness. Polyclonal antiserum raised against PDLs22 peptides, ISNKYLVKRQSRD, were made. The localization of PDLs22 in tissues was detected by polyclonal antibody against PDLs22 by means of immunohistochemical staining. The results were as follows; 1. Expression of PDLs22 protein was not detected in the tooth germ of bud and cap stage. 2. At the late bell stage and root formation stage, strong expression of PDLs22 protein was observed in developing tooth follicle, osteoblast-like cells, and subodontoblastic cells in the tooth pulp, but not in gingival fibroblasts, ameloblasts and odontoblasts of tooth germ 3. In erupted tooth, PDLs22 protein was intensely expressed in PDL and osteoblast-like cells of alveolar bone, but not in gingival fibroblasts, mature osteocytes and adjacent salivary glands. 4. In the developing alveolar bone and mid-palatal suture, expression of PDLs22 protein was seen in undifferentiated mesenchymal cells and osteoblast-like cells of developing mid-palatal suture, but not in mature osteocytes and chondrocytes. These results suggest that PDLs22 protein may play an important role in the differentiation of undifferentiated mesenchymal cells in the bone marrow and PDL cells, which can differentiate into multiple cell types including osteoblasts, cementoblasts, and PDL fibroblasts. However, more researches should be performed to gain a better understanding of the exact function of PDLs22 protein which related to the PDL cell differentiation.
Journal of the korean academy of Pediatric Dentistry
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v.33
no.1
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pp.116-121
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2006
Familial hypophosphatemia is the most common hereditary rickets which occur hypophosphatemia as the calcium concentration in the blood serum is normal but the phosphate concentration in the blood serum decreases by dysfunction of renaltubular phosphorus reabsorption. In spite of the low concentration of phosphate in the blood serum discharge of phosphate by urine and alkaline phosphatase increases remarkably. It is a sex-linked and normally male show severe clinical symptoms than female. This kind of familial hypophosphatemia patients show frontal bossing, square head, short of status for general finding, and for dental finding, thinning of limina dura and dental follicle, thin and hypoplastic enamel, enlarged pulp chamber and canal, high occurance rate of periapical and periodontal abscess and unknown cause of rarefying osteitis. This case is to report about the clinical finging and dental treatment of a child patient, who came to the hospital for treatment of deciduous teeth caries but was refered to pediatrics because the child showed clinically short of status, bow-leg and radiographically enlarged pulp chamber and canal, there as diagnosed as familial hypophosphatemia.
Journal of the korean academy of Pediatric Dentistry
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v.29
no.3
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pp.345-353
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2002
Bone morphogenetic proteins(BMPs) are secretory signal molecules which have a variety of regulatory functions during morphogenesis and cell differentiation. To evaluate roles of BMPs and their receptors on mouse sagittal suture development, we have examined their expression patterns in serial sections of sagittal sutures by in situ hybridization during embryonic stages(E15-E18). BMP-2 and BMP-3 were expressed in the osteogenic front and parietal bone on embryonic 15day, from E16 in hair follicle. BMP-4 was strongly expressed in the osteogenic front and weakly expressed in the mesenchyme and parietal bone. BMP-S was expressed in the hair follicles. BMP-6 was not expressed in this study. BMP-7 was expressed in parietal bone during embryonic stage. BMPR-IB was expressed in the osteogenic front, but BMPR-IA was not. From these datas, we suggest that the BMP-4 regulates the early commitment of mesenchymal cells to the osteogenic lineages, the BMP-2 and BMP-3 may be involved in regulating the differentiation of osteoblast precursor cells. BMP-7 was involved in maintenance of differentiated osteoblasts. BMPs were key signaling molecules that regulate early calvarial bone morphogenesis, mediated by BMPR-IB.
Lee, Yong-Soek;Jung, Byeong-Jun;Lee, Sang-Hoon;Hur, Min
Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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v.26
no.3
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pp.355-362
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1999
Objective: This study was performed to compare the clinical response to controlled ovarian hyperstimulation (COH) of in vitro fertilization and embryo transfer (IVF-ET) according to the size of baseline ovarian cyst. Method: From February 1992 to March 1999, a retrospective analysis was done of 272 cases who underwent COH using mid-luteal phase long protocol of gonadotropin-releasing hormone agonist (GnRH-a) for IVF-ET. These cases were divided into four group; group 1 (n=63) had cysts with mean diameters between 20.0 and 29.0 mm on their baseline ultrasound on cycle day 3, group 2 (n=57, $30.0{\sim}49.0mm$), group 3 (n=68, >50.0 mm) and control group (n=84). Cases were excluded according to the following criteria; pure male factor infertility, the presence of only one ovary, high CA-125 level and previous endometriosis. Results: There were no statistically significant differences between cases with baseline ovarian cyst <50.0 mm in diameter and control group in any of the parameters. However, cases with baseline ovarian cyst>50.0 mm in mean diameter needed more amount of human menopausal gonadotropin (hMG), showed significantly lower estradiol ($E_2$) level, the number of follicle >15.0 mm on the day of human chorionic gonadotropin (hCG) administration, the number of oocytes retrieved, the number of mature oocytes, and pregnancy rate compared with control group. Conclusion: This study suggests that cases with baseline ovarian cyst <50.0 mm in diameter do not adversely impact on IVF-ET outcome. However, cases with baseline ovarian cyst >50.0 mm in diameter had adverse effects on various parameters. Therefore, to improve the outcome of IVF-ET in these cases, ovarian cyst aspiration prior to initiating COH may be required.
Objective: This study was designed to evaluate the effects of endogenous LH surge, GnRH agonist (GnRH-a) or human chorionic gonadotropin (hCG) as ovulation trigger on pregnancy rate by intrauterine insemination (IUI). Method: Patients received daily 100 mg of clomiphene citrate (CC) for 5 days starting on the third day of the menstrual cycle followed by human menopausal gonadotropin (hMG) for ovulation induction. Follicles larger than >16 mm in diameter were present in the ovary, frequent LH tests in urine were introduced to detect an endogenous LH surge. Final follicular maturation and ovulation were induced by GnRH-a 0.1 mg (s.c.) or hCG $5,000{\sim}10,000$ IU (i.m.) administration except natural ovulation. Pregnancy was classified as clinical if a gestational sac or fetal cardiac activity was seen on ultrasound. Results: There were no differences in age, duration of infertility and follicle size, but more ampules of hMG were used in GnRH-a group compared to hCG 10,000 IU treated group (p<0.05). Lower level of estradiol ($E_2$) on the day of hCG or GnRH-a injection was observed in hCG 10,000 IU group than other treatment groups (p<0.01). The overall clinical pregnancy rate was 19.8% per cycle (32/162) and 22.2% per patient (32/144). Pregnancy rate was higher in natural-endogenous LH surge group (37.5%, 9/24) than GnRH-a (18.8%) or hCG treated group (20.9% & 13.9%), but this difference was not statistically significant. No patient developed ovarian hyperstimulation. Abortion rate was 22.2% (2/9) in hCG 5,000 IU group. Delivery or ongoing pregnancy rate was 37.5% (9/24), 18.8% (3/16), 16.3% (7/43) and 13.9% (11/79) in endogenous LH surge, GnRH-a, hCG 5,000 IU and hCG 10,000 IU treatment groups, respectively. Conclusion: These results support the concept that use of natural-endogenous LH surge in stimulated cycles may be more effective to obtain pregnancies by IUI than GnRH-a or hCG administration.
Lee, Sun Hwa;Lee, Jung Im;Kim, Yoo-Ri;Lee, Bum Chun;Kang, Min Ji;Choi, Kwang Seong;Moon, Tae Kee
Journal of the Society of Cosmetic Scientists of Korea
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v.39
no.3
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pp.215-224
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2013
It has been reported that certain ingredients added to cosmetics clog the skin pores and this can cause outbreaks of comedones which are the primary sign of acne leading to inflammatory acne. This research aims to establish objective evaluation criteria for non-comedogenic cosmetics suitable for acne prone skin. The research has been carried out to examine non-comedogenic test performed in foreign clinical institutions and to establish the evaluation method for detecting comedones outbreaks through repetitive closed back-patch test, Also, usability evaluation on face skin is performed additionally to the same subjects. The analysis of the comedones collected through repetitive closed back-patch test confirmed that the test products, moisturizer and sunscreen product, did not cause comedones. These results had no correlation with the analysis result of the comedones collected from face skin or visual evaluation of acne by Global Acne Grading System (GAGS) in face usability test. Additionally, Oil red O staining was performed on the collected comedones specimen for easy distinction of comedones from hair follicle in image analysis. The analysis result of stained specimen showed higher precision than that of non-stained specimen. This study established a new version of non-comedogenic test for cosmetics, whose objectivity and reliability were improved by inclusion of comedones staining step.
목 적:본 연구에서는 생쥐 난소 주기에 따른Dazla 유전자의 발현 조절 양상을 관찰하고자 하였다. 연구재료 및 방법: 생후 27일된 암컷 미성숙 생쥐 (total 33EA; each 3 EA)로 부터 Pregnant Mare Serum Globulin (PMSG) 투여전, PMSG 투여 3시간, 6시간, 12시간, 24시간, 48시간 후 난소 조직과 hCG 투여 3시간, 6시간, 12시간, 24시간, 48시간 후 난소 조직을 획득하였다. 암컷 성숙 생쥐 난소와 (n=3) 수컷 성숙 생쥐 (n=3)로부터 고환 조직을 획득하여 대조군으로 사용하였다. 각각의 획득된 조직에서 Dazla mRNA 의 발현 여부를 RT-PCR과 in situ hybridization (ISH) 방법으로 확인하였다. 호르몬 투여 시기에 따른 Dazla 유전자의 발현 강도를 ISH 방법으로 비교하여 정상 난소주기에서 PMSG와 PMSG+hCG 에 의한 Dazla 유전자의 발현 조절 양상을 관찰하였다. 결 과: 미성숙 생쥐, 성숙 생쥐 난소 내 난자 모두에서Dazla 유전자의 발현이 관찰되었다. 성숙 생쥐 고환 내 정자에서도 Dazla 유전자의 발현이 관찰되었다. 미성숙 및 성숙 생쥐의 난포에서는 난포의 성장에 따라 Dazla 유전자의 발현 강도가 강하게 관찰되었다. 미성숙 생쥐에 투여된 PMSG와 PMSG+hCG에 의한 유전자의 발현 강도는 난포의 크기가 같을 경우 호르몬 투여전과 비교하여 차이가 없었다. 결 론: Dazla 유전자는 난소내 난자에서 특이하게 발현되며, 난포의 크기에 따라 난자에서의 dazla유전자 발현의 강도도 증가한다. 그러나 PMSG와 PMSG+hCG에 의하여 유전자 발현이 조절되지 않은 것으로 보아 난소의 배란주기에 따른 유전자의 발현 양상에 변화가 없는 것으로 생각된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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