15세기 말과 16세기 초에 철화분청을 생산했던 곳으로 잘 알려진 공주 학봉리에서 수습된 12 도편의 분청사기를 과학적으로 분석하였다. 태토와 유약의 성분은 각각 X선 형광분석기와 전자현미분석장치로 분석하였고, 미세구조분석은 광학현미경, 편광현미경, 전자현미분석장치, 그리고 X선회절분석기를 이용하였다. 태토와 유약의 성분은 학봉리에서 지리적으로 가까운 곳에 위치한 보령 용수리분청과 비교하여 통계분석을 하였으며, SPSS프로그램을 사용하였다 태토는 보령 송수리 분청에 비해 실리카와 용융제는 높게 나타났으나, 알루미나는 낮은 수치를 보였고, 유약은 실리카, 소다. 철산화물은 높은 반면, 알루미나와 칼슘산화물의 양은 낮게 나타났다. 학봉리 분청 자체도 두 그룹으로 나뉘었다. 유약은 라임계열이었으며, 태토내에는 석영, 둘레가 일부 녹은 큰 장석덩어리, 사장석, 흑운모와 철산화물과 같은 결정들이 많이 남아있음을 관찰할 수 있었다. 이러한 미세구조로 보아 원료의 수비상태가 좋지 않았고, 번조온도도 비교적 낮았음을 예측할 수 있다. 철화안료의 원료는 성분과 X선 회절분석에 의해 Mg/Fe/Al 스피넬로 확인되었다.
인공 우식 용액으로 72개의 건전한 치아에 백색 병소를 형성을 유도하고 $CavityShield^{TM}$(Group I), $FluroDose^{TM}$(Group II) 그리고 $Flor-Opal^{(R)}$ Varnish(Group III)를 2주 간격으로 1, 2, 3회 도포하였다. 마지막 불소 바니쉬 도포 2주 후 QLF-D 영상을 촬영하여 광도 변화량(${\Delta}L$)을 측정하였고, 편광 현미경으로 법랑질 탈회 깊이 변화량(${\Delta}D$)을 측정하여 통계적으로 비교하였다. 1. Group I, II, III에서 QLF-D로 관찰한 결과, 1회 도포군보다 2주 간격으로 2, 3회 도포군에서 유의하게 ${\Delta}L$ 값이 증가하였고, 각 불소 바니쉬에서 도포 횟수에 따라 회귀 분석 결과, y = 3.878x + 90.612, y = 3.133x + 37.168, y = 3.509x + 82.322의 회귀 방정식이 산출되었다(p < 0.05). 2. Group I, II, III에서 편광 현미경으로 관찰한 결과, 1회 도포군보다 2주 간격으로 2, 3회 도포군에서 유의하게 ${\Delta}D$ 값이 감소하였고, 각 불소 바니쉬에서 도포 횟수에 따라 회귀 분석 결과, y = -2.336x + 107.235, y = -2.158x + 101.620, y = -1.940x + 94.806의 회귀 방정식이 산출되었다(p < 0.05). 3. 불소 바니쉬 적용하고 편광 현미경으로 관찰한 인공 우식의 깊이 변화량과 QLF-D로 관찰한 광도 변화량 사이의 피어슨 상관 계수는 Group I에서 -0.673, Group II에서 -0.574, 그리고 Group III에서 -0.431이었다(p < 0.05).
수중미생물(水中微生物)의 계수방법(計數方法)은 크게 둘로 나누인다. 첫째 방법(方法)은 replicon개염(槪念)에 기초(基礎)를 둔 것으로 살아있는균(菌)과 죽은 균(菌)을 구별할 수 있으나 사용(使用)되는 배지(培地)가 생리적(生理的)으로 다른 다양(多樣)한 세균(細菌)들로 구성된 수중세균(水中細菌)의 생육(生育)에 적합하지 않아서 전(全) 세균수(細菌數)를 계수(計數)할 수 없다. 둘째 방법(方法)은 직접 검경하여 계수(計數)하는 방법(方法)으로 살아있는 균(菌)과 죽은균(菌), 세균(細菌)과 particle의 구별(區別)이 곤란하다. 그러나 최근 세균염색수(細菌染色術)의 발달(發達)로 수중세균(水中細菌)을 육안(肉眼)으로 쉽게 구별(區別)하여 계수(計數)할 수 있는 방법(方法)이 가능(可能)하게 되었다. 이 방법(方法)은 형광현징경(螢光顯徵鏡)을 사용(使用)하여 acridine orange로 염색(染色)된 수중(水中)의 전세균수(全細菌數)를 측정(測定)하는 방법(方法)이다. 따라서 본(本) 연구(硏究)는 상수도원(上水道源)의 세균오염도(細菌汚染度)를 측정(測定)하는데 새로운 방법(方法)으로서 epifluorcscence microscopy를 제시(提示)하는데 있으며 이의 사용성가능여부(使用性可能與否)를 진단(診斷)하기 위해 chlorine과 chloramine을 시료수(試料水)에 처리(處理)하여 경시적으로 세균수(細菌數)를 조사(調査)하여 평판법(平板法)과 비교(比較)하였다. 시료수(試料水)(sample water)의 전세균수(全細菌數)는 형광검경법(螢光檢鏡法)에 의(依)해 정확(正確)히 측정(測定)되었으며 분리능력(分離能力)(resolution)에 있어서 탁월(卓越)하였고 또한 경제적(經濟的)이고도 간편하였다. 그리고 소독살균제(消毒殺菌劑)로는 chloramine이 감소(監素)보다 수중세균(水中細菌)에 미치는 영향(影響)은 훨씬 컸다.
Purpose: Ionizing radiations have been reported as an apoptosis initiating stimulus in various cells and it has established that sustained elevations in [Ca/sup 2+/] can lead to DNA fragmentation by Ca/sup 2+/-dependent endonucleases, ultimately resulting in apoptotic cell death. The previous experiments have been reported by using primarily thymocytes and lymphocytes and the change of [Ca/sup 2+/] was measured only by minutes or hours respectively. We need to evaluate [Ca/sup 2+/] in both several minutes and hours after irradiation of radiation of radiation therapy and verify the apoptotic cells. Materials and Methods: We have measured [Ca/sup 2+/] in human gingival epitheloid cancer cell with 10Gy irradiation, at minutely intervals and hourly intervals using digitized video-intensified fluorescence microscopy and the fluorescent Ca/sup 2+/ indicator dye, fura-2. In order to find out that the transient rise in [Ca/sup 2+/] could induced apoptosis, cells were incubated for 1 hour at 37℃ with TdT enzyme, rinsed and resuspended containing fluorescence and observed under a confocal fluorescence microscope. MTT assay was done to determine cell activity and LDH assay was done to determine the amount of necrotic cells. Results: After irradiation, the transient and temporal increasing of [Ca/sup 2+/] in the KB cells was founded. Though, there was no change in the intracellular [Ca/sup 2+/] at 30 minutes and 2 hours after irradiation. We could detect of DNA fragmented cells at 4 hours after 10Gy irradiated cells. There were no significant differences between 4 hour, 1 day, 3 day cells. There were no significant differences in MTT and LDH assay between the irradiated group and the control group after 4 hours and 1 day. Though after 3 days there were differences in MTT and LDH assay between the irradiated group was significantly decreased than the control group, in LDH assay the number of necrotic cell death of the irradiated was higher than the control group. Conclusion: In KB cells there were incipient and temporal increasing of the [Ca/sup 2+/] with 10Gy irradiation and the apoptosis was founded from 4 hours later which was earlier than seeing of the change of the amount of the cellular ability and necrosis.
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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제31권6호
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pp.461-467
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2005
Background. 5-(and-6)-carboxy-2',7'-dichlorofluorescein diacetate, succinimidyl ester mixed (CFSE) is the fluorescent labelling agent of living cells and used to trace the cells in vivo after transplatnation of various cells. The CFSE labelled cells can maintain fluorescence for up to 7 days after labelling. The MC3T3-E1 cell line (MC3T3) has been used for many studies about osteoblast, which is well known as a mouse preosteoblast. So the CFSE would be used to trace the transplanted MC3T3. However there are few reports about CFSE labelling of MC3T3. This study is aimed to know about adequate concenturation and incubation time of CFSE to MC3T3. Materials and methods. The MC3T3 was incubated in a humidified atmosphere of 95% air with 5% $CO_2$ at $37^{\circ}C$ using ${\alpha}$-minimal essential medium (${alpha}$-MEM) containing10% FBS and gentamycin. Ten mM CFSE solution in dimethylsulphoxide (DMSO: 1%) was diluted with phosphate buffered saline (PBS) and final concentration of culture medium was, respectively, 5, 10, 15, 20, 25 and 30 ${{\mu}M$. Then the MC3T3 was incubated with CFSE in a humidified atmosphere of 95% air with 5% $CO_2$ at $37^{\circ}C$ for 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40 and 45 minutes in each concentration. The fluorescence of CFSE labelled cells was analysed with a inverted fluorescence microscope. The duration of cell labelling was also studied. Trypan blue dye exclusion test was done for cell viability. Results. For concentration between 5 and 10 ${\mu}M$, CFSE did not significantly label the MC3T3 in vitro. The destruction of MC3T3 was observed at the concentration of 20 ${\mu}M$. In the concentration of 15 ${\mu}M$, the best labelling was obtained at an incubation period between 15 and 30 minutes. The MC3T3 labelled with an incubation period of 15 minutes at 15 ${\mu}M$ was still fluorescent 7 days after CFSE labelling. The mean cell viability was 95.93%. Conclusion. These results suggests an incubation period of 15 minutes at 15 ${\mu}M$ of CFSE provides best labelling of MC3T3 in vitro.
Kim, Sung-Woo;Park, Jin-Ki;Park, Chun-Gyu;Lee, Ju-Young;Han, Joo-hee;Lee, Seung-Eun;Baek, Kyung-Nye;Chang, Won-Kyung
한국동물번식학회:학술대회논문집
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한국동물번식학회 2004년도 춘계학술발표대회
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pp.260-260
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2004
The calcium ionophore (A23187) has been used for activation of porcine oocytes from in vitro maturation by many researches. The signaling of calcium was known to be a primary factor of activation of MII oocyte by calcium ionophore. The calcium level was measured by an intensity of fluo 4 fluorescence and confocal microscope. The level was increased by 7% ethanol or 70 μM calcium ionophore but oscillation was not found. (omitted)
This study was carried out to assess the effect of vitamin E against the reactive oxygen species (ROS) on chemical activation of in vitro matured oocytes. Bovine oocytes were aspirated from slaughtered ovaries and transferred to maturation medium with or without vitamin E ($100\;{\mu}M$). After 22 hours of culture, oocytes with polar bodies were selected and submitted to activation treatments with or without vitamin E. After activation, oocytes were cultured in mSOF medium and rate of development was monitored. For ROS ($H_2O_2$) detection, in vitro matured and activated oocytes were selected and stained with DCFDA and observed under fluorescence microscope. The ROS contents were not significant differences in IVM rate, activation process and embryonic development to blastocysts with or without vitamin E. The cell number of blastocyst showed significant difference (p<0.05) in embryos matured and activated with vitamin E. The results of the present study demonstrated that the exposure of vitamin E in IVM and activation process improved the quality of embryos evaluated by the cell number of blastocysts.
The baculovirus/insect cell expression system is of great value for the large-scale production of normal and mutant mammalian passive glucose-transport proteins heterologously for structural and functional studies. In most mammalian cells that express HepG2, this transporter isoform is predominantly located at the cell surface. However, it had been reported that heterologous expression of other membrane proteins using the baculovirus system induced highly vacuolated cytoplasmic membranes. Therefore, how a cell responds to the synthesis of large amounts of a glycoprotein could be an interesting area for investigation. In order to examine the subcellular location of the human HepG2 transport proteins when expressed in insect cells, immunofluorescence studies were carried out. Insect cells were infected with the recombinant baculovirus AcNPVHIS-GT or with wild-type virus at a MOI of 5, or were not exposed to viral infection. A high level of fluorescence displayed in cells infected with the recombinant virus indicated that transporters are expressed abundantly and present on the surface of infected Sf21 cells. The evidence for the specificity of the immunostaining was strengthened by the negative results shown in the negative controls. Distribution of the transporter protein expressed in insect cells was further revealed by making a series of optical sections through an AcNPVHIS-GT-infected cell using a confocal microscope, which permits optical sectioning of cell sample. These sections displayed intense cytoplasmic immunofluorecence surrounding the region occupied by the enlarged nucleus, indicating that the expressed protein was present not only at the cell surface but also throughout the cytoplasmic membranous structures.
소양호에서 여름에 출현하는 동물 플랑크톤의 포식 작용을 형광 현미경으로 관찰하였다. 형광 bead 와 형광 염색한 세균을 bacterivore 로 보았으며 장내에서 엽록소의 autofluorescence 가 발견되는 것은 algavore 로 보았다. Copepoda 의 유츙과, Thermocyclops, Pleosoma 등은 algavore 였으며, Daphnia, Bosmina, Keratella, Hexathra 등은 bacteriovore 였다. 개체수로는 65.7% 가 algavore 였으며, 34.4% 가 bacteriovore 였다. Bacteriovore 인 동물 플랑크톤은 직경이 0.5 $\mu$m 이상인 입자를 선호하였으며, 형광 bead 와 형광 엽색 세균은 섭취율에 큰차이가 없었다.
Objective: Oocyte-specific homeobox 4 (Obox4) is preferentially expressed in oocytes and plays an important role in the completion of meiosis of oocytes. However, the Obox4 expression pattern has not been reported yet. In this study, we investigated the subcellular localization of Obox4 using a green fluorescent protein (GFP) fusion expression system. Methods: Three regions of Obox4 were divided and fused to the GFP expression vector. The partly deleted homeodomain (HD) regions of Obox4 were also fused to the GFP expression vector. The recombinant vectors were transfected into HEK-293T cells plated onto coated glass coverslips. The transfected cells were stained with 4',6-diamidino-2-phenylindol and photographed using a fluorescence microscope. Results: Mutants containing the HD region as well as full-length Obox4 were clearly localized to the nucleus. In contrast, the other mutants of either the N-terminal or C-terminal region without HD had impaired nuclear localization. We also found that the N-terminal and C-terminal of the Obox HD contributed to nuclear localization and the entire HD was necessary for nuclear localization of Obox4. Conclusion: Based on the results of the present study, we demonstrated that the intact HD region of Obox4 is responsible for the nuclear localization of Obox4 protein in cells.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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