In vitro IgE class switching could be induced through co-culture of CD40L-expressing KU812 cells and CD40-expressing B cells in the presence of IL-4 or IL-13. It has been generated several B cell lines, which produce rice allergen (RA)-specific IgM antibody by in witγo immunization (IVI) using peripheral blood lymphocyte (PBL). In this study, induction of RA-specific IgE antibody by KU812 cells was attempted. Before co-culture, we determined the CD40 expression in RA-specific B cell lines, RA9G11 and the CD40 ligand (CD40L) expression in activated KU812 cells by treatments with phorbol myristate acetate (PMA) and ionomycin for 6 hrs. Flow cytometric analysis shown that RA9G11 and activated KU812 cells expressed high level of CD40 and CD40L, respectively. RA9G11 cells were cultured with activated KU812 cells for 12 days in the presence of IL-4 for IgE class switching. Mature $C{\varepsilon}$ mRNA level and RA-specific IgE spot forming cells (SFC) were observed in all culture condition, and especially, high level of RA-specific IgE synthesis was determined the same ratio of RA9G11 and activated KU812 cells in the presence of 50U IL-4. Therefore, induction of RA-specific IgE synthesis by activated KU812 cells can be contributed in the application for allergic therapy and prevention.
We investigated the effects of sodium butyrate, a histone deacetylase inhibitor, on the cell cycle progression in human monocytic leukemia U937 cells. Exposure of U937 cells to sodium butyrate resulted in growth inhibition, G1 arrest of the cell cycle and induction of apoptosis in a dose-dependent manner as measured by MTT assay and flow cytometry analysis. The increase in G1 arrest was associated with the down-regulation in cyclin D1, E, A, cyclin-dependent kinase (Cdk) 4 and 6 expression, and up-regulation of Cdk inhibitors such as p21 and p27. Sodium butyrate treatment also inhibited the phosphorylation of retinoblastoma protein (pRB) and p130, however, the levels of transcription factors E2F-1 and E2F-4 were not markedly modulated. Furthermore, the down-regulation of phosphorylation of pRB and p130 by this compound was associated with enhanced binding of pRB and E2F-1, as well as p130 and E2F-4, respectively. Overall, the present results demonstrate a combined mechanism involving the inhibition of pRBjp130 phosphorylation and induction of Cdk inhibitors as targets for sodium butyrate that may explain some of its anti-cancer effects in U937 cells.
Shin, Dong Yeok;Kang, Ho Sung;Bae, Song-Ja;Jung, Jee H.;Choi, Yung Hyun
Journal of Marine Bioscience and Biotechnology
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v.1
no.2
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pp.63-70
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2006
Natural product compounds are the source of numerous therapeutic agents. The marine environment produces natural products from a variety of structural classes exhibiting activity against numerous disease targets including anticancer agents. Among these, pectenotoxin-2 (PTX-2), which was first identified as a cytotoxic entity in marine sponges, which depolymerizes actin filaments, was found to be highly effective and more potent to activate an intrinsic pathway of apoptosis in p53-deficient tumor cells compared to those with functional p53 both in vitro and in vivo. However, the anti-proliferative mechanism of the compound at non-cytotoxic concentrations has not yet been explored. In the current study, we sought to investigate anti-proliferation and apoptosis of PTX-2 against U937 human leukemic cells and its underlying molecular mechanism. Exposure of U937 cells to PTX-2 resulted in growth inhibition and induction of apoptosis in dose- and time-dependent manner as measured by MTT assay, fluorescent microscopy and flow cytometric analysis. The anti-proliferative effect of PTX-2 was associated with a marked increase in the expression of cyclin-dependent kinase p21 (WAF1/CIP1) mRNA which was tumor suppressor p53-independent. The increase in apoptosis was connected with a time-dependent down-regulation of anti-apoptotic Bcl-XL and inhibitor of apoptosis proteins (IAPs) family such as XIAP and cIAP-2. Though additional studies are needed, these findings suggested that PTX-2-induced inhibition of U937 cells was associated with the induction of apoptotic cell death and the results provided important new insights into the possible molecular mechanisms of the anti-cancer activity of PTX-2.
This study aimed to investigate the efficiency of colchicine and oryzalin in inducing polyploidy in two Cymbidium hybrids [Showgirl 'Silky' and Mystery Island 'Silk Road' (Silk Road-4)]. Colchicine was used at concentrations ranging from 50 to $500mg{\cdot}L^{-1}$, with treatments lasting 1 to 3 weeks. Oryzalin was used at concentrations ranging from 3 to $20mg{\cdot}L^{-1}$, with treatments lasting 3 to 6 days or 1 to 3 weeks. The survival rate of PLBs was better in colchicine than in oryzalin solutions. The ploidy levels were screened using flow cytometry. In C. Showgirl 'Silky', the highest chromosome doubling efficiencies were obtained with the 1-week treatment in $50mg{\cdot}L^{-1}$ colchicine (60%) and the 2-week treatment in $5mg{\cdot}L^{-1}$ oryzalin (46.7%). In C. Mystery Island 'Silk Road' (Silk Road-4), the highest chromosome doubling efficiencies were obtained with the 1-week treatment in $50mg{\cdot}L^{-1}$ colchicine (16.7%) and the 3-day treatment in $10mg{\cdot}L^{-1}$ oryzalin (6.7%). Colchicine was more efficient than oryzalin in terms of polyploidy induction. Furthermore, pre-treatment, which entailed poking 10 times with forceps, improved the efficiency of chromosome doubling.
Journal of the korean Society of Automotive Engineers
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v.14
no.6
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pp.39-47
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1992
The engine combustion is one of the most important process affecting performance and emissions. One effective way to improve the engine combustion is to control motion of the charge inside a cylinder by means of optimum induction system design, because the flame speed is mainly determined by the turbulence in a gasoline engine. This paper describes the measurement and characterization of mean velocity and turbulence intensity inside the cylinder of a 4-valve gasoline engine using laser Doppler velocimeter(LDV) under motoring(non-firing) conditions. Since the measured LDV data in each cycle show small cycle variation during compression stroke in the tested engine, the mean velocity and turbulence intensity are calculated by ensemble averaging method neglecting cycle variation effects. In the ensemble averaging method, the effects of the calculation window, in which velocities are assumed as the same crank angle, on mean velocity and turbulence intensity are fully investigated. In addition, the effects of measuring point on the flow characteristics are studied. With large calculation window, the mean velocity is shown to be less sensitive with respect to crank angle and turbulence intensity decrease in its absolute amplitude. When the piston approch to the top dead center of compression, the turbulence intensity is found to be homogeneous in the cylinder.
In order to examine the possibility of incineration of inderstrial by-product and wastes which contains a large percentage of chlorine by the cement kiln, measured heat of hydration, setting time, flow, change of length, compressive strength of OPC by the amount of KCl. The result was that a shorter setting time, a lower flow, a increasing the degree of initial shrinkage, a increasing of compressive strength before 3 days and decrease after 7 days by the induction period is shorter as promote the hydration with KCl.
Bone marrow derived mesenchymal stem cells (BMSCs) are largely studied for their potential clinical use. But it is hard to get enough number of those cells for clinical trials and give serious pain to the patients. Adipose tissue is derived from the embryonic mesenchyme and contains a stroma that is easily isolated with large amount. This cell population (adipose derived stem cells: ADSCs) can be isolated from human lipoaspirates and like MSCs, differentiate toward the osteogenic, adipogenic, myogenic and chondrogenic lineages. To confirm whether adipose tissue contains stem cells, the ADSCs extracted from omental or subcutaneous fat tissue were expanded during third to fifth passages. The phenotype of the ADSCs was identified by the conventional cell surface markers using flow cytometry: positive for CD29 and CD44, but negative for CD34, CD45, CD117 and HLA-DR that similar to those observed on BMSCs. The ADSCs were able to differentiate into the osteoblast or adipocytes with induction media. Finally, ADACs expressed multiple CD marker antigens similar to those observed on BMSCs and differentiated into osteoblast, adipocyte. With this, human adipotissue contains multipotent cells and may represent an alternative stem cell source to bone marrow-derived MSCs.
Cell death induced by menadione (vitamin K-3,2-methyl-1,4-naphthoquinone) has been investigated in human promyelocytic leukemia HL-60 cells. Menadione was found to induce both apoptosis and necrosis in HL-60 cells. Low concentration ($1{\sim}$50 ${\mu}$M) of menadione induced apoptotic cell death, which was demonstrated by typical DNA ladder patterns on agarose gel electrophoresis and flow cytometry analysis. In contrast, a high concentration of menadione (100 ${\mu}$M) induced necrotic cell death, which was demonstrated by DNA smear pattern in agarose gel electrophoresis. Necrotic cell death was accompanied with a great reduction of cell viability. Menadione activated caspase-3, as evidenced by both increased protease activity and proteolytic cleavage of 116 kDa poly(ADP-ribose) polymerase (PARP) into 85 kDa cleavage product. Caspase-3 activity was maximum at 50 ${\mu}$M of menadione, and very low at 100 ${\mu}$M of menadione. Taken together, our results showed that menadione induced mixed types of cell death, apoptosis at low concentrations and necrosis at high concentrations in HL-60 cells.
Numerical analysis using three dimensional finite volume method for the discretization, adaptive grid method for the numerical accuracy, multiple rotating frame method for the rotating body and the standard $k-{\epsilon}$ model for the turbulent flow was performed to understand the heat transfer phenomena and to improve the efficiency of the scroll compressor. The temperature measurement was carried out under ARI condition. It was found that the fluid temperature in the compressor was predicted accurately while the temperature of the motor coil showed large discrepancy between the calculation and experiment due to the large anisotropy of the conductivity and non homogeneity. We found that the efficiency of the compressor depends on the inlet temperature of the compressing part and the flow pattern around the inlet region of the compressing part influences the inlet temperature due to high surface temperature of the main frame. The efficiency of the compressor using Coanda effect is higher than the previous one because the smooth suction at the inlet region of the compressing part leads to low heat transfer to the refrigerant of the compressor.
Transactions of the Korean Society of Mechanical Engineers
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v.18
no.4
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pp.920-932
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1994
The combustion phenomena of a reciprocating engine is one of the most important processes affecting performance and emissions. One effective way to improve the engine combustion is to control the motion of the charge inside a cylinder by means of optimum induction system design, because the flame speed is mainly determined by the turbulence at compression(TDC) process in S.I. engine. It is believed that the tumble and swirl motion generated during intake breaks down into small-scale turbulence in the compression stroke of the cycle. However, the exact nature of their relationship is not well known. This paper describes cycle resolved LDV measurement of turbulent flow inside the cylinder of a 4-valve engine under motoring(non-firing) conditions, and studies the effect of intake port configurations on the turbulence characteristics using following parameters ; Eulerian temporal autocorrelation coefficient, turbulence energy spectral density function, Taylor micro time scale, integral time scale, and integral length scale.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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