Woohyun Jee;Moonhwan Bae;Hyejin Yoon;Inyoung Kang;Myoungjoo Koo;Jaewang Lee;Jin Hyun Jun
Biomedical Science Letters
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v.28
no.4
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pp.298-306
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2022
Pathological tissue fixation using formalin has been widely used for histological samples in many hospitals and institutions. In general, formalin fixatives were either manufactured in laboratories or purchased commercially because of the risks and environmental concerns of handling organic compounds. In this study, the efficacy of three kinds of commercially purchased and one laboratory-made formalin fixative was compared in the PCR-based molecular diagnosis using the extracted DNA from formalin-fixed paraffin-embedded (FFPE) tissues. The quality of extracted DNA from FFPE tonsil tissues with four kinds of formalin solutions was evaluated, and PCR for beta-globin gene and microsatellite instabilities (MSI) tests for pentaplex panel markers were performed using the extracted DNA. There was no difference in PCR and MSI tests as molecular diagnoses regardless of the types of formalin used in this study. However, the total amount and average length of double-stranded DNA extracted from FFPE tonsil tissue showed significant differences according to the type of formalin fixative. Optimized formalin fixatives and methods for DNA extraction might be sophisticated to extract good quality DNA from the small size of specific tissue samples. Further studies are needed to select the most effective formalin fixative for histology and molecular pathology using human FFPE tissues.
In the past, European material and method were applied to conservation of Buddhist mural paintings in Korea. At that time, there were inadequate to selection of materials in consideration of porosity and hydrophilicity, therefore insufficiency to assessing their suitability for materials. The treatment result of mural painting are dissatisfied with consolidation of painting layer using synthetic resin. Therefore, it has experimented on applying fixative for reinforcement of painting layer on Buddhist mural painting in order to establish the effects of conservation. In relationship of binder's viscosity, adhesion and penetrating depth, adhesion increased in high-viscosity specimen whereas it decreased in low-viscosity specimen. While the binder's penetrating depths show similar patterns, the surface's response and combination adjacent to painting layer have differences. Animal glue and methyl cellulose (MC) shows excellent performance in their reaction with soil and painting layer. It is estimated that the fixative penetrates deep into soil to produce a stable fixing effect. The viscosity of polyvinyl acetate resin (PVAc) and acrylic resins are low, and thus penetrates well into soil, but they adhere poorly to soil.
BACKGROUND: in vitro micronucleus test (vitMNT) is one of the promising alternative testing methods in genotoxicity test and was adopted as OECD test guideline for chemical registration. This study was conducted to optimize the cytoplasm conditions in vitMNT using Chinese hamster lung (CHL) cell. METHODS AND RESULTS: In this study cytokinesis-block micronucleus test was conducted. Mitomycin C and colchicine were used as positive control chemicals and were treated for three hours (short time) or twenty-four hours (long time). Giemsa solution was used for cell staining. For optimization of vitMNT, the final fixative was prepared as five concentrations (0%, 1%, 3%, 5%, and 25%) of acetic acid in methanol, and treatment times of the final fixative were varied under four conditions (immediately, one hour, four hours, and one day). CONCLUSION: Acetic acid at 1% in methanol as the final fixative was most adequate to preserve the cytoplasm around the nucleus in the interphase cells. Also, fixative treatment time of cell suspension for one to four hours may minimize the cell rupture. These results can be helpful for getting an accurate result promptly due to clear visual distinction to score micronucleus in vitMNT using giemsa solution.
The painting layer of Payathonzu temple mural paintings in the ruins of Bagan Myanmar has been damaged due to various reasons. In this study, the applicability of Neem resin, a traditional Myanmar adhesive, as a fixative on the painting layer was examined. Cow glue and Paraloid B-72 were selected as fixatives in the comparison group, and pseudo-specimens with conditions similar to the original mural paintings were produced to examine the changes before and after applying the fixatives and according to the deterioration experiments. As a result of conducting the experiments and comparing the fixatives, it was found that changes on the surface such as smudge, yellowing and gloss are greater with the application of higher concentration of Neem resin than with other fixatives. However, such changes were relatively small under the condition of 4% concentration. It was also confirmed that chromaticity and glossiness vary greatly between before- and after-application of the fixatives but that such discrepancies tend to decrease at 4% concentration compared to other concentrations. As for fixation strength, it was found that the fixation capacity of Neem resin on the base and painting layers is overall higher than other fixatives as the concentration is increased. Therefore, the applicability of 4% concentration of Neem resin as a fixative on the painting layer was confirmed considering the low surface changes according to environmental factors, low color discrepancy and glossiness, and characteristics of excellent fixation strength. It is believed that the findings of this study could be used as basic data for the preservation of Payathonzu temple mural paintings in the future.
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Biological samples can be fixed either by chemical method by using chemical solution or physical methods by using heat treatment. The problem in traditional heat fixation is unsatisfactory quality due to uneven heat conduction in specimen and loss of inner cell contents. Chemical fixation method also bears several intrinsic problems like the limit in specimen size, time consumption in fixative impregnation, and loss of low molecular weight cell components. These factors deteriorate the quality of fixed specimen, thus limit the magnification and contrast of tissue pictures. Microwave heat has been reported to be a good alternative to current chemical methods to overcome these problem. In this study, we tried to introduce the microwave energy method to routine fixation work in hospital. We replaced chemical fixative with saline to provide moderate reaction condition, and used frozen section to reduce time for sample preparation. Temperature was measured at each experiment. The fixation of rat kidney tissue with 2.45 GHz electromagnetic wave and saline showed similar result to the control group fixed with traditional chemical method. Human tumor tissue fixed with 2.45 GHz electromagnetic in frozen section was improved in terms of histochemistry of PAS and immunohistochemistry of tumor marker like cytokeratin. Total turnaround time was reduced from $24\sim38$ h to to $2\sim4$ h. In conclusion, the quality of samples prepared by microwave heating method was at least as good as that of traditional method. If the condition for the fixation of different specimens is standardized, this new method could be applied to routine work in hospital, and could save working time as well.
The distribution of glutamatergic synaptic structures in the dog basilar pons was investigated at the ultrastructural level using monoclonal antibodies against fixative-modified glutamate. Electron-dense reaction product was densely localized at the perinuclear region in the neurenal somata and often observed along the microtubules located within the dendritic processes. One or more unlabelled axon terminals made asymmetric synaptic contacts with glutamate-immunoreactive dendritic profiles. In audition, reaction product was observed either within axonal processes surrounded by myelin sheath or axon terminals. Immunoreactive axon terminals made asymmetric synaptic contact either with unlabelled or labelled dendritic profiles. These observations provided an anatomic evidence of how this excitatory neural element might perform its function in a multisynaptic pathway involving glutamatergic afferents to the basilar pons, glutamate-immunoreactive pontocerebellar projection neurons, and the glutamate-positive granule cells of the cerebellar cortex.
Lee, Solji;Oh, Chang-Young;Han, Sim-Hee;Kim, Ki Woo;Kim, Pan-Gi
Korean Journal of Agricultural and Forest Meteorology
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v.16
no.1
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pp.22-28
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2014
This study was conducted to investigate the photosynthetic characters of Populus alba${\times}$glandulosa cuttings in response to elevated $CO_2$ concentration and air temperature for selecting tree species adaptive to climate change. The cuttings were grown in environment controlled growth chambers with two combinations of $CO_2$ concentration and air temperature conditions: (i) $22^{\circ}C$ + $CO_2$ 380 ${\mu}mol$$mol^{-1}$ (control) and (ii) $27^{\circ}C$ + $CO_2$ 770 ${\mu}mol$$mol^{-1}$ (elevated) for almost three months. The cuttings under the elevated treatment showed reduced tree height and photosynthetic pigment contents such as chlorophyll and carotenoid. In particular, the elevated treatment resulted in a marked reduction in the chlorophyll a closely associated with $CO_2$ fixative reaction system. Different levels of reduction in photosynthetic characters were found under the elevated treatment. A decrease was noted in photochemical reaction system parameters: net apparent quantum yield (7%) and photosynthetic electron transport rate (14%). Moreover, a significant reduction was obvious in $CO_2$ fixative reaction system parameters: carboxylation efficiency (52%) and ribulose-1,5-bisphosphate(RuBP) regeneration rate (24%). These results suggest that the low level of photosynthetic capacity may be attributed to the decreased $CO_2$ fixative reaction system rather than photochemical reaction system.
The author thought that the results of cytologic tests could be changed according to the fixative methods. So the author has studied several methods of fixing exfolaiative cells collected from normal adult cheek mucosa with a solution of equal parts of ether and 95% ethylalcohol, 95 ethylalcohol and Isoprophyl alcohol, and compared the results with each other. The results were as follows : The effects of fixation, and staining efficiency of nucleus and protoplasm are similar in each method, but the staining efficiency of cytoplasm and the conversation of cytoplasmic membrane were best in 95% ethylalcohol.
Currently, urban greening projects and research are attracting attention as a way to mitigate urban heat island phenomenon. In this study, nitrogen fixative bacteria were isolated and their effects on plant growth were confirmed. First, enrichment was performed in a nitrogen-free medium to isolate the nitrogen-fixing bacteria, and the colony showing high growth in a medium with limited nitrogen source was isolated and purified. Separated bacterial isolates were reduced by more than 90% acetylene by ARA and indirectly confirmed the activity of nitrogenase by ethylene production. Cedecea sp. MK7 and Enterobacter sp. Y8 with confirmed reproducibility were selected as nitrogen fixative bacteria. Nitrogen fixing bacteria were applied to the growth of perennial rye grass, and it was found that the dry weight increased to 34.80 mg (186.60%) compared with the control with 18.65 mg dry weight. After plant growth, microbial community analysis of soil applied by bacteria showed similarity to the control group. Therefore, in this study, it is expected that the efficiency will be increased if plant growth is promoted by using nitrogen fixing bacteria in urban greenery system.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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