Considerable attention has been given to the accuracy of HER-2 testing and the correlation between the results of different testing methods. This interest reflects the growing importance of HER-2 status in the management of patients with breast cancer. In this study the detection of HER-2 gene and centromere 17 status was evaluated using dual-colour primed in situ labelling (PRINS) in comparison with fluorescence in situ hybridization (FISH). These two methods were evaluated on a series of 27 formalin fixed paraffin embedded breast carcinoma tumours, previously tested for protein overexpression by HercepTest (grouped into Hercep 1+/0, 2+ and 3+). HER-2 gene amplification (ratio${\geq}2.2$) by PRINS was found in 3:3, 6:21 and 0:3 in IHC 3+, 2+ and 1+/0 cases, respectively. Comparing FISH and IHC (immunohistochemistry), showed the same results as for PRINS and IHC. Chromosome 17 aneusomy was found in 10 of 21 IHC 2+ cases (47.6%), of which 1 (10%) showed hypodisomy (chromosome 17 copy number per cell${\leq}1.75$), 7 (70%) showed low polysomy (chromosome 17 copy number per cell=2.26 - 3.75) and 2 (20%) showed high polysomy (chromosome 17 copy number per cell ${\geq}3.76$). The overall concordance of detection of HER-2 gene amplification by FISH and PRINS was 100% (27:27). Furthermore, both the level of HER-2 amplification and copy number of CEN17 analysis results correlated well between the two methods. In conclusion, PRINS is a reliable, reproducible technique and in our opinion can be used as an additional test to determine HER-2 status in breast tumours.
The opsin family of light sensitive proteins family makes up are the universal photoreceptor molecules of all visual systems in the vertebrates including teleosts. They can change their conformation from a resting state to a signaling state upon light absorption, which activates the G-protein coupled receptor, thereby resulting in a signaling cascade that produces physiological responses. However, this species is poorly characterized at molecular level due to little sequence information available in public databases. We have investigated the opsin family of nocturnal cutlass fish using the whole transcriptome sequencing method. The opsin genes were cloned and its expression in the tissues and organs were examined by qPCR. We cloned 6 opsin genes (RRH, Opn4, Rh1, Rh2, VA-opsin, and Opn3) in retina and brain tissue. It contained the seven presumed transmembrane domains that are characteristic of the G-protein-coupled receptor family. However, short wavelength sensitive pigment (SWS) and long wavelength sensitive pigment (LWS) were not detected in this study. The mRNA expression of the 6 photoreceptor genes were detected in retina and peripheral tissue. Our studies will lead to further investigation of the photic entrainment mechanism at molecular and cellular levels in cutlass fish and can be used in comparative studies of other fishes.
Thermal measurements were made for connective tissues of 5 different fish muscles by using a differential scanning calorimeter(DSC), and connective tissues between muscle fibers and the cross sections of muscle fibers were observed by a light microscope. Red sea bream(cultured and wild) and flounder(cultured, cultured with obosan and wild) were used in this study. It was found that the connective tissues of cultured and frozen fish muscle required less endothermic enthalpy and the endothermic peak temperature was lower than those of wild and fresh ones when they were shrunken and denatured. Therefore, it is likely that the former are more unstable to heat than the latter. The cultured flounder fed with obosan and wild flounder which contained more collagen than cultured flounder and the wild red sea bream showed clear connective tissues between fibers. The cross-section of cultured fish muscle fiber was larger than that of wild one. From these results, collagen content and thermal properties of collagen, cross section of muscle fibers seemed to contribute to the textural difference between wild and cultured fish.
Flounder culture has been developed mainly in the western parts of japan, and, to date, following six bacterial diseases have been reported. Bacterial white enteritis occurs in 16 to 30-day-old flounder larvae and often causes mass mortality in seed production. Bacterium named Vibrio sp. INFL invades and multiplies in the mucosae of posterier part of intestine, and causes desquamative enteritis. Gliding bacterial disease occurs mostly in juvenile stage and in spring to summer. Diseased signs are partial discoloration and erosion of skin and fins. Histologically, epidermis are removed, and the causative bacterium, Flexibacter maritimus, multiplies on the surface of demis and invades into the muscular tissue. Vibriosis caused by Vibrio anguillarum and related organisum is one of the well-known diseases among marine fish. Outbreaks of the disease in flounder culture are relatively few, but mass mortalities in fingerlings due to the disease were reported. An outbreak of nocardiosis in the autumn of 1984 has been reported, but since then the disease scarcely occurred. The disease is characterized by formation of abscesses under the skin and white nodes in the gill, heart, spleen and kidney. Streptococcicosis occurs frequently in recent years. Beta-hemolytic streptococcus is the causative bacterium, which possesses the same biochemical and serological characteristics as $\beta$-streptococci isolated from some marine and freshwater fish, and is seemed to related to Streptococcus iniae. Edwardsiellosis is the disease that causes most damage in flounder culture in Japan. Characteristic symptoms are swelling of abdomen and intestinal protrusion from the anus due to accumulation of ascites. Edwardsiella tarda, a well-known pathogen of freshwater fish, is the causative bacterium of the disease.
The effects of sardine oil(high in eicosapentaenoic acid : EPA) and tuna oil(high in docosahexaenoic acid : DHA, also high in EPA) on fatty acid composition of brain and learning ability were evaluated in male weanling Sprague-Dawley rats and compared with the effects of corn oil and beef tallow. Animals assigned by randomized block design to one of the four experimental diet groups containing dietary lipid at 15%(w/w) level were given ad libitum for 7 weeks. Food intake and body weight gain of the fish oil groups were significantly lower than those of the corn oil and beef tallow groups. However, brain weights of the groups were not significantly different. In the brain fatty acid composition, the corn oil group showed high concentrations of n-6 fatty acids, the fish oil groups of n-3 fatty acids, and the beef tallow group of saturated fatty acids. Brain EPA and DHA contents of the fish oil groups showed significantly higher than the other groups while the brain ratio of saturated/monounsaturated/polyunsaturated fatty acid was controlled in a narrow range. In a maze test, the fish oil groups appeared to arrive at the goal faster than the corn oil and beef tallow groups. It explained that EPA in diets might efficiently convert to DHA resulting in DHA accumulation in brain tissue and might increase the learning performance as DHA did.
Enrofloxacin is one of the normally used flouroquinolones in mammalian and fish but its withdrawal time and studies were remain obscure. The residual contents of enrofloxacin in fish muscle were analyzed by using HPLC-FLD. More than 0.1 mg/kg of ENR was detected in muscle tissues and the residues were found over 1 year after treatment. The concentration of ENR in Paralichthys olivaceus was not affected by water temperature and lasted for an extended amount of time. The spike recoveries of ENR in the muscle tissue ranged from 78% to 85%. From this results, we need the prescription by veterinarian or aquatic organism disease inspector in ENR usage to assure safety of fish. Future research is required to determine the recommendation dose of ENR for side effects and safety.
A disease with mass mortality characterized exophthalmia and abdominal distension by ascites occurred in farmed starry flounder, Platichthys stellatus in Pohang since October of 2007. Severe necrosis and infiltration of inflammatory cells were observed in tissue histopathological sections from liver, kidney, spleen and heart of the diseased fish. The catalase-negative and gram positive cocci with -hemolysis were isolated from moribund fish. Analysis of the API profiles and the multiplex PCR of the isolates showed that strains were identified as Streptococcus parauberis. In API profiles, S. parauberis isolated from starry flounder differed from those of olive flounder, Paralichthys olivaceus to the test of arginine dihydrolase, D-mannitol, D-sorbitol and α-lactose. And the strains, PH0710 and PH0711, were strongly lethal for starry flounder (LD50 ranging from 4.2×103~4.2×102 cfu/fish at 7 days after intraperitoneally inoculation). This is the first report on a S. parauberis infection in starry flounder.
Furfural, an organic solvent, is widely used as synthetic component material in producing chemical products. However, furfural has been reported that it shows strong toxicities to human being showing intense stimulus to skin, eyes, mucous membrane and nerve system. It is also known to cause anemia, liver cirrhosis, kidney failure and genetic toxicity in the human being working in the exposed area. LD$_{50}$ of furfural for peritoneal injected mouse has been known around 20mg/kg, but the acute toxicity on aquatic organisms such as fish, daphnid or algae are not well known, compared to those on rodents. In this experiment, we studied on the fish toxicity of furfural using Japanese Medaka (Orvzias latipes) and Common Carp (Cvprinus carpio). We also observed histological changes in the fish organs. The LC$_{50}$ were 12. Smg/L in Japanese Medaka and 21.8 mg/L in Common Carp, respectively. When Common Carps were exposed to 120mg/L of furfural concentration for 30 minutes, blood congestion in gills and lysis of secondary lamella were shown. Though the muscle of caudal fin was not completely eroded, its epidermic cells were shown to be necrotic in various parts. Tissue atrophy and cell necrosis were also shown in the liver of Common Carps exposed to furfural. From these results, furfural seems to cause histological damages on liver, an internal organ as well as on external organs such as gills and fins eventhough the fish were exposed for a short-term.
본 연구의 목적은 어류 옆줄(측선)이 수온, 수압, 수류 및 음파 등을 측정한다고 알려진 것을 직접 실험을 통해 확인하여, 어류 옆줄의 물리적 자극을 감지함을 확인하였다. 어류 옆줄 감각기능 실험연구 후 어류 옆줄이 물리적 자극을 감지하는 우수성을 확인하기 위해 옆줄 조직을 확대 분석하였으며, 측공과 측공관의 형태를 3D프린터로 제작하여 옆줄 교구 제작을 실현하였다. 옆줄 교구를 수중에서 물리적 자극인 음파를 측정함으로써 증폭 효과를 확인하였고, 이를 통해 어류 옆줄이 생명공학적으로 우수한 감각기관임을 증명하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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