• 한국어병학회지
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• 제9권2호
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• pp.169-176
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• 1996

연어과 어류의 이상유영 원인 바이러스 RVS의 ELISA법에 의한 신속 진단 방법을 개발하였다. 주화세포를 이용한 바이러스 배양액 및 감염 무지개송어의 뇌조직 마쇄액을 사용하여 실험하였다. 바이러스 배양액을 이용한 ELISA법의 검출 감도 조사에서 최소 바이러스 감염가 검출 한계치는 $10^{2.6}$ $TCID_{50}/100{\mu}l$ 이었다. 또한, 인공감염어의 뇌조직 마쇄액 내의 RVS 항원도 검출 되었다. 본 방법은 현장에서의 RVS 감염어 조사에 효과적으로 사용되어질 수 있는 방법으로 생각 되어진다.

• 한국수산과학회지
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• 제19권2호
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• pp.136-140
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• 1986

생선회에 사용되는 선어육중에 오염된 장염비브리오균이 저장온도와 시간에 따른 균의 증감정도를 파악하여 식중독 예방대책에 필요한 기초자료를 얻고자 가다랭이와 방어의 마쇄육에 Kanagawa현상 양성인 장염비브리오균을 접종하여 $30^{\circ}C,\;18^{\circ}C,\;4^{\circ}C$ 및 $-20^{\circ}C$에서 24시간 저장하면서 매 2시간마다 균수의 변화를 실험한 결과는 다음과 같다. 1. 가다랭이나 방어의 마쇄육에 장염비브리오균을 접종하여 상온에 방치하여 두었을때 처음 2시간까지는 균수감소 경향을 나타내었으며 그 이후부터 급격한 균의 증식현상이 나타났다. 2. 생선 마쇄육에 장염비브리오균을 $10^3/g$ 정도 오염시켜 $18^{\circ}C$에 10시간정도 보관하여 두었을때 $10^4/g$ 정도로 증가하는데 반하여 $30^{\circ}C$에 같은 시간 보관하였을 경우에는 $10^6/g$인으로 증가하였다. 3. 장염비브리오균을 생선마쇄육에 오염시켜 $-20^{\circ}C$에서 24시간 저장했을 때에 약 $20\%$의 생잔율을 나타내었다. 4. 생선회를 $4^{\circ}C$ 냉장고에 보관했을에 4시간후에는 약 $10\%$ 감소하였고, 24시간 후에는 약 $50\%$ 감소하였다. 5. 용선회를 $4^{\circ}C$에 냉장보관할때 신선한 방어육에 오염된 장염비브리균이 동결해동한 가다랭이육에 오염된 경우 보다 균 감소율이 $10{\sim}15\%$정도 높았다.

• 한국수산과학회지
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• 제21권2호
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• pp.80-84
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• 1988

방어, 참돔, 피조개, 굴 4종의 어패육에 V. vulnificus M-8을 접종하여 저장온도와 시간에 따른 균수의 변화를 시험한 결과는 다음과 같다. 1. V. vulnificus의 저온저항성은 $-20^{\circ}C$의 $1.5\%$ 식염-인산완충희석수에서는 32시간에 거의 사멸하였으며, 방어육 균질액에서는 인산완충희석수에서 보다 감소가 완만하였고 72시간 이후에도 균이 검출되었다. 그리고 $4^{\circ}C$ 저장에서도 균의 감소가 현저하였다. 따라서 이 균의 저온저항성은 약하지만 단시간 냉동 및 냉장에 의한 균의 사멸은 어렵다는 것을 알 수 있었다. 2. 어패육에 접종하여 $30^{\circ}C$에 저장한 시료중의 V. vulnificus의 증식은 일반적으로 16시간만에 최대균수에 달하였으나 피조개의 경우는 12시간으로 약간 빨랐으며 특히 방어육에 있어서는 초기에 감소하는 특징과 더불어 균의 증식속도가 완만하였다. 그리고 가열처리육보다 생육에서의 균의 증식이 빠르게 나타났다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제26권8호
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• pp.1457-1463
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• 2016

Vibrio anguillarum, a devastating pathogen causing vibriosis among marine fish, is prevailing in worldwide fishery industries and accounts for grievous economic losses. Therefore, a rapid on-site detection and diagnostic technique for this pathogen is in urgent need. In this study, two mouse monoclonal antibodies (MAbs) against V. anguillarum, 6B3-C5 and 8G3-B5, were generated by using hybridoma technology and their isotypes were characterized. MAb 6B3-C5 was chosen as the detector antibody and conjugated with quantum dots. Based on MAb 6B3-C5 labeled with quantum dots, a modified dot blot assay was developed for the on-site determination of V. anguillarum. It was found that the method had no cross-reactivity with other than V. anguillarum bacteria. The detection limit (LOD) for V. anguillarum was 1 × 10³ CFU/ml in cultured bacterial suspension samples, which was a 100-fold higher sensitivity than the reported colloidal gold immunochromatographic test strip. When V. anguillarum was mixed with turbot tissue homogenates, the LOD was 1 × 10³ CFU/ml, suggesting that tissue homogenates did not influence the detection capabilities. Preenrichment with the tissue homogenates for 12 h could raise the LOD up to 1 × 10² CFU/ml, confirming the reliability of the method.

• 한국어병학회지
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• 제32권1호
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• pp.45-48
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• 2019

We developed and subsequently characterized mouse monoclonal antibodies (MAbs) against recombinant VP28 structural protein (rVP28) of white spot syndrome virus (WSSV). We established six hybridoma clones secreting MAbs against rVP28: 15A11, 20G6, 31H2, 34H6, 38D1 and 43A1. All six MAbs recognized the 25 kDa of protein in gill homogenates of WSSV-infected shrimp by western blot analysis, while no reactivity was observed in gill homogenates of normal shrimp. Moreover, high enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) optical density (OD) values (0.8-2.68) were observed in the hemolymphs from WSSV-infected shrimp, while low OD values (less than 0.24) were recorded in the hemolymphs from normal shrimp, by using these six MAbs produced in this study. These results suggest that these six MAbs are useful for the detection of WSSV.

• 한국식품조리과학회지
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• 제12권1호
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• pp.6-12
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• 1996

Tryptic soy broth(TSB)와 광어, 굴 homogenate에 ethanol을 함유하지 않은 경우와 5%의 ethanol(v/v)을 함유한 경우에 ethanol이 V. parahaemolyticus의 증식과 생존에 미치는 영향을 이 세균의 최적온도(35$^{\circ}C$)와 저온(-20, 5$^{\circ}C$) 및 고온(45, 5$0^{\circ}C$)에서 검토하였다. 35$^{\circ}C$에서의 V parahaemolyticus의 증식은 TSB와 광어 homogenate에서 빨랐으나 굴 homogenate에서 약간 느렸다. 5%의 ethanol 존재하에서는 TSB와 광어 homogenate에서 긴 유도기를 거친 후에 증식이 시작되었으나 굴 homogenate에서는 저장초기부터 계속 생균수가 감소하였다. 5%의 ethanol을 함유한 것과 ethanol을 함유하지 않은 액체배지에 $10^{6}$-$10^{7}$ cells/ml의 V. parahaemolyticus를 접종하여 저온(5, -2$0^{\circ}C$)과 고온(45, 5$0^{\circ}C$)에 저장하면서 ethanol에 의한 생존억제 작용을 조사하였다. 5$^{\circ}C$에서 ethanol을 함유한 것과 ethanol을 함유하지 않은 액체배지에서 시료간의 생균수는 현저한 차이가 없었으나 -2$0^{\circ}C$에서는 5%의 ethanol 존재하에서 광어와 굴 homogenate에서 V. parahaemolyticus의 생존이 TSB에 비하여 현저히 억제되었다. 45$^{\circ}C$와 5$0^{\circ}C$에서 D-value는 ethanol을 함유하지 않은 경우와 5%의 ethanol을 함유한 경우 모두에서 굴 homogenate가 TSB와 광어 homogenate에 비하여 가장 낮은 값을 나타내었다. 45$^{\circ}C$와 5$0^{\circ}C$에서 ethanol을 함유하지 않은 각 액체배지에서의 D-value는 5%의 ethanol을 함유한 각각의 액체배지에서의 D-value보다 1.9-3.5배 높은 값을 나타내었다.

• 한국식품조리과학회지
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• 제11권3호
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• pp.261-266
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• 1995

3 종류의 생선(광어, 새우, 굴) homogenate와 tryptic soy broth(TSB)에 Staphylococcus aureus와 Listeria monocytogenes를 접종하여 35$^{\circ}C$에서의 증식과 냉장(5$^{\circ}C$) 및 동결저장(-2$0^{\circ}C$) 하였을 때 각 세균의 거동을 조사하였다. S. aureus는 생선 homogenate와 액체배지 모두 35$^{\circ}C$에서 큰 차이없이 빠르게 증식하였다. 5$^{\circ}C$에 3주간 저장하였을 때 S. aureus는 1-1.6 log cycle 감소하였으나 -2$0^{\circ}C$에서는 6주간의 저장기간 동안 0.3-1.2 log cycle의 세균수 감소를 나타내었다. L. monocytogenes는 35$^{\circ}C$에서 광어 homogenate, 새우 homogenate와 TSB에서 증식이 빨랐으나 굴 homogenate에서는 유도기를 거친 후에 증식이 진행되었다. 5$^{\circ}C$에서 L. monocytogenes는 광어 homogenate, 새우 homogenate와 TSB에서 3주간 증식이 진행되어 세균수가 3.8-5 log cycle 증가하였으나 굴 homogenate에서는 2.2 log cycle의 증가에 불과하였다. -2$0^{\circ}C$에 6주간 저장하였을 때 L. monocytogenes의 세균수는 광어 homogenate, 새우 homogenate 및 TSB에서 1.5-1.8 log cycle 감소하였으나 굴 homogenate에서는 2.8 log cycle 감소하였다

• 한국수산과학회지
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• 제31권4호
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• pp.471-476
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• 1998

우리나라 남해안의 다획성 어종인 고등어로부터 부패 활성이 강한 효모를 분리하여 그 균학적 특성을 조사하고 어육의 부패에 미치는 영향을 조사한 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 고등어로부터 분리된 효모 14균주 중 12균주 ($86\%$)가 저온성 효모였으며, 6균주 ($43\%$)가 단백분해활성을 가지는 것으로 나타났다. 2. 분리된 효모 14균주 중 저온생육능 및 단백분해능이 가장 강한 Y-5가 C. lipolytica로 동정되어 C. lipolytica FM5로 명명하였다. 3. C. lipolytica FM5의 최적 생육조건은 $25^{\circ}C$, pH 7.0이었으며, 염농도 $10\%$에서도 생육이 가능하여 강한 내염성을 나타내었다. 4. 멸균어육을 이용한 부패실험에서 C. lipolytica FM5를 접종한 경우 $5^{\circ}C$, $15^{\circ}C$, $25^{\circ}C$에서 저장 1주일만에 VBN생성량이 각각 50mg-N/100g, 152mg-N/100g, 379mg-N/100g를 나타내어, 대표적인 어류부패세균인 Ps. fluorescens ATCC 17571을 접종한 경우와 유사한 속도로 부패가 진행되었다.

• 한국수산과학회지
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• 제19권4호
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• pp.356-362
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• 1986

This experiment was designed to evaluate effects of freezing and frozen storage on survival of sanitary indicative bacteria in seafoods. Culture of bacteria such as Escherichia coli type I, Citrobacter freundii type I, Klebsiella aerogenes type I and Streptococcus faecalis was inoculated into homogenates of pollack, shrimp, and sardine frozen in a contact plate freezer at $-40^{\circ}C$ and chest freezer at $-20^{\circ}C$, stored at $-20^{\circ}C$, and then survival of the inoculated bacteria was determined over a period of 95 days. Coliform group was highly sensitive to freezing and frozen storage showing survival of about $2\%$ after 95 days of frozen storage at $-20^{\circ}C$, whereas Streptococcus faecalis was relatively resistant with $20\%$ survival rate. The sanitary indicative bacteria count was rapidly decreased in the early stage of frozen storage revealing 90 to $95\%$ loss of coliform group and 40 to $70\%$ loss in case of Streptococcus faecalis after 10 days storage. In determining recovery rate, most probable number (MPN) method gave more reproducible recovery of the tested strain than did the selected agar plate method.

• 한국어병학회지
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• 제32권2호
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• pp.59-67
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• 2019

본 연구에서는 넙치(Paralichthys olivaceus)로부터 분리한 바이러스성출혈성패혈증바이러스(viral hemorrhagic septicemia virus, VHSV, genotype IVa)에 대한 단클론 항체(monoclonal antibody, MAb)를 개발하였다. VHSV에 대한 항체를 생산하는 총 5개의 hybridoma clone을 생산하였다. 4개의 MAbs (2C10, 18H4, 23H6, 30B7)는 glycoprotein을 인식하였고, MAb 15E10은 nucleocapsid protein을 인식하였다. 5개의 MAbs는 western blot 상에서 VHSV에 감염된 세포와 넙치시료에 반응하였으나, 정상 세포와 넙치시료에는 반응하지 않았다. 또한 ELISA상에서 VHSV에만 반응하였고 6종의 어류바이러스(IHNV, HIRRV, SVCV, IPNV, MABV, NNV)에는 반응하지 않았다. 이상의 결과, 본 연구에서 제작된 MAbs는 VHSV에만 특이적으로 반응하는 것이 확인되어 VHSV를 검사하는데 사용될 수 있을 것으로 사료된다.