A high level of Staphylococcus haemolyticus L62 lipase was expressed in an Escherichia coli transformant. The expressed lipase activity in the cell-free extract was 70,800 U/l, which corresponded to 30% of the total cellular protein. Pre-mixing of the l62 lipase with some nonionic detergents enhanced its hydrolytic activity towards olive oil: Tween detergents activated the L62 lipase by 3 fold. Gel filtration chromatography of the Tween-80-L62 lipase mixture demonstrated a polymerized complex (∼180 kDa) formed exclusively between Tween-80 and the L62 lipase. The lipase enzyme in the complex showed a higher specific activity towards most triacylglycerols than the intact L62 lipase. The activity enhancement towards each substrate was quite different depending on the acyl chain length; the activity towards tributyrin, trilinolein, and trilinolenin was much more enhanced than the towards the medium and the long-chain saturated triglycerides.
When it is necessary to wear masks for long periods, such as during the current COVID-19 pandemic, the essential function of masks to prevent contamination (or transmission to others) as well as comfortableness are important. For this study, we used three-dimensional (3D) facial measurements of adult women to compile basic face shape data for designing comfortable and effective masks. This study analyzed the 3D facial data of 127 subjects in their 20s to 30s of the 6th Size Korea. Factor analysis of the survey data produced seven factors that formed the composition of adult female faces. These factors combined to produce three facial types: square (long face and a large lower middle face), oval (smallest central and lower body in the middle), and triangle (short face with a small central and lower large nose). These types reflect that the facial types of adult women show the differences in the nose angle, nose length, bitragion-subnasal arc, bitragion-menton arc. Therefore, properly fitting masks for fine dust particle filtration require 3D customization of a mask's breathing apparatus to fit differently shaped central and lower face parts that interfere with mask fit.
The purpose of this study was to analysis the correlation between kidneys function indicators and these size in ultrasonography. A total of 170 (male:86, female:84) patients of sex and age groups were examined by abdominal ultrasonography. The patients classified as those in their 20's, 30's, 40's, and over 50's. We measured the length, width, and cross-sectional height of the kidneys twice. At this time, the length of these were measured from the maximum upper to the maximum lower pole and the widest width in the same ultrasonography was measured to obtain the cross-sectional area. Other relevant indicators included body surface area, serum creatinine, glomerular filtration rate (GFR), MDRD (Modification of diet in renal disease) and C-G (Cockcroft-Gault). Significant comparisons of differences between relevant factors by age groups and sex were conducted with a one-way distribution analysis. Correlation analysis was also performed between relevant factors by using Pearson and Spearman correlation coefficient. It was defined as meaningful when the p-value was less than 0.05. As a result, the length, the width, and the cross-sectional area of kidneys were correlated with GFR, C-G, MDRD. Therefore, it is expected that the accuracy of diagnosis of kidneys disease will be increased if the relevant indicators are evaluated together rather than measuring only length of these in ultrasonography.
Abrus agglutinin was purified from the kernels of Abrus precatorius by Sepharose 4B affinity column chromatography followed by Sephadex G-100 gel filtration column chromatography. About 1.25 g of abrus agglutinin was obtained from 1 kg of the kernels. The LD$_{50}$ of abrus agglutinin is 5 mg/kg of body weight, which is less toxic than that of abrin, 20$\mu\textrm{g}$/kg body weight. The amino acid sequence of abrus agglutinin was determined by protein sequencing techniques and deduced from the nucleotide sequence of a cDNA clone encoding full length of abrus agglutinin. There are 258 residues, 2 residues and 267 residues in the A-chain, the linker peptide and the B-chain of abrus agglutinin, respectively. Abrus agglutinin had high homology to abrin-a (77.8%). The 13 amino acid residues involved in catalytic function, which are highly conserved among abrin and ricin, were also conserved within abrus agglutinin. The protein synthesis inhibitory activity of abrus agglutinin ($IC_{50}$/ = 3.5 nM) was weaker than that of abrin-a (0.05 nM). By molecular modeling followed by site-directed mutagenesis showed that Pro199 of abrus agglutinin A-chain located in amphipathic helix H and corresponding to Asn200 of abrin A-chain, can induce bending of helix H. This bending would presumably affect the binding of abrus agglutinin A-chain to its target sequence GpApGpAp, in the tetraloop structure of 285 r-RNA subunit and this could be one of major factors contributing to the relatively weak protein synthesis inhibitory activity and toxicity of abrus agglutinin.n.
Radial collector wells have been widely used for large-capacity groundwater development in riparian environments, and many empirical equations have been developed for initial estimates of groundwater yield. We compare the initial yield estimates produced by several empirical equations for the radial collector well at the Anseongcheon stream site. The results of Babac's, Kordas', and Petrovic's methods are similar to the actual yield of $6,124m^3/d$, but Milojevic's method predicts a higher yield than the observed value. The conditions under which these methods are applicable explain the observed differences between the actual and estimated yields. The applicability of empirical equations is evaluated by changing the input variables of distance from well to river, number of horizontal wells, thickness of aquifer, length of horizontal well, and hydraulic conductivity. The results indicate that the conditions under which each method is applicable must be considered carefully when estimating groundwater yield, and hydraulic conductivity must be estimated accurately.
A novel mannose-binding tuber lectin with in vitro antiproliferative activity towards human cancer cell lines and antiviral activity against HSV-II was isolated from fresh tubers of a traditional Chinese medicinal herb, Typhonium divaricatum (L.) Decne by a combined procedure involving extraction, ammonium sulfate precipitation, ion exchange chromatography on DEAE-SEPHAROSE, CM-SEPHAROSE and gel-filtration on sephacryl S-200. The apparent molecular mass of the purified Typhonium divaricatum lectin (TDL) was 48 kDa. TDL exhibits hemagglutinating activity toward rabbit erythrocytes at 0.95 $\mu$g/ml, and its activity could be strongly inhibited by mannan, ovomucoid, asialofetuin and thyroglobulin. TDL showed antiproliferative activity towards some well established human cancer cell lines, e.g. Pro-01 (56.7 $\pm$ 6.8), Bre-04 (41.5 $\pm$ 4.8), and Lu-04 (11.4 $\pm$ 0.3). The anti-HSV-II activity of TDL was elucidated by testing its HSV-II infection inhibitory activity in Vero cells with $TC_50$ and $EC_50$ of 5.176 mg/ml and 3.054 $\mu$g/ml respectively. The full-length cDNA sequence of TDL was 1145 bp and contained an 813-bp open reading frame (ORF) encoding a 271 amino acid precursor of 29-kDa. Homology analysis showed that TDL had high homology with many other mannose-binding lectins. Secondary and three-dimensional structures analyses showed that TDL is heterotetramer and similar with lectins from mannose-binding lectin superfamily, especially those from family Araceae.
Jo, Seung-Hyun;Kwon, Suk-Yoon;Park, Doo-Sang;Yang, Kyoung-Sil;Kim, Jae-Whune;Lee, Ki-Teak;Kwak, Sang-Soo;Lee, Haeng-Soon
Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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v.11
no.5
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pp.442-448
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2006
Human lactoferrin (hLf) is an iron-binding glycoprotein that has been considered to play many biological roles in the human, including the stimulation of the immune system, antimicrobial and anti-inflammatory effects, and regulation of iron absorption. We generated transgenic Siberian ginseng (Acanthopanax senticosus) cell cultures producing a functional hLf protein using the signal peptide sequence from the endoplasmic reticulum and driven by an oxidative stress-inducible SWPA2 promoter which is highly expressed in plant cell cultures. The production of hLf increased proportionally to cell growth and showed a maximal level (up to 3.6% of total soluble protein) at the stationary phase in suspension cultures. Full-length hLf protein was identified by immunoblot analysis in transgenic cell cultures of Siberian ginseng. Recombinant hLf (rhLf) was purified from suspension cells of Siberian ginseng by ammonium sulfate precipitation, cation-exchange and gel filtration chromatography. N-terminal sequences of rhLf were identical to native hLf (nhLf). The overall monosaccharide composition of rhLf showed the presence of plant specific xylose while sialic acid is absent. Antibacterial activity of purified rhLf was higher than that of nhLf. Taken together, we anticipate that medicinal Siberian ginseng cultured cells, as demonstrated by this study, will be a biotechnologically useful source for commercial production of functional hLf not requiring further purification.
Galectins are generally believed to be potential candidates for use in the development of novel antiinflammatory agents or as selective modulators of the immune response. In particular, galectin-9 exhibits some of the extracellular functions, including cell aggregation, adhesion, chemoattraction, activation, and apoptosis. Tl-galectin (Tl-gal, galectin-9 homologue gene) was isolated from an adult worm of the Toxascaris leonina. The full-length Tl-gal gene, which was incorporated into pET-28a, was overexpressed in E. coli and purified by nickel affinity and gel filtration chromatographies. The purified Tl-gal was crystallized using the hangingdrop vapor-diffusion method. The crystal belonged to the tetragonal space group $P4_1$, with unit-cell parameters of a = b = $75.7\AA$ and c = $248.4\AA$. The crystals were obtained at $20^{\circ}C$ and diffracted to a resolution of $3.0\AA$. The asymmetric unit contained four molecules of Tl-gal, which gave a crystal volume per protein mass (Vm) of $2.8\AA^3Da^{-1}$ and a solvent content of 54.1%.
Effects of available food on growth of commercially cultured Pacific oysters, Crassostrea gigas in Goseong Bay on the south coast were studied using a numerical model. levels of total protein, carbohydrate and lipid in particulate organic matter in the water column as well as chlorophyll a concentration were determined for estimating total available food for oyster growth. Environmental parameters including water temperature, salinity and total suspended solid were also monitored for the model. Oyster growth was also monitored by means of measuring shell length and tissue wet weight increase on a monthly basis. Simulation results from the numerical model indicated that chlorophyll a is not a good representative of available food for the oysters in Goseong Bay. In contrast, available food in the water column measured by filtration of the organic particles and analyzed in terms of total lipids, carbohydrates and protein was well matched with simulated oyster growth in the Bay which is similar to observed growth. The model also suggested that oysters have relatively low retention efficiency of $50\%$ or less. This result indicates that oysters in the bay utilize only a part of food particle available in the water column, as reported in other studies.
Kang-Rae Kim;Yeong-Ho Kwak;Mu-Sung Sung;Heon Yang;Seong-Jang Cho;Bong Han Yun;In-Chul Bang
Korean Journal of Ichthyology
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v.35
no.2
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pp.91-100
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2023
The early life history of Silurus microdorsalis living in Jahocheon Stream was studied by observing egg and morphological development. Live fish were captured in June 2018, then reared in a circulating filtration system under a 14L : 10D photoperiod with a water temperature of 18℃. To artificially induce spawning, females were injected with 0.5 mL of Ovaprim (Syndel, Nanaimo, BC, Canada) per kg of body weight, and males were injected with 10,000 IU/kg body weight of human chorionic gonadotropin. Approximately 15 h later, eggs were artificially inseminated by the dry method. Mature eggs were light pale yellow, which separated them from immature eggs. Fertilized eggs were 2.16±0.06 mm (n=8) in diameter and fully hatched at 181 h after fertilization. The fertilization rate was 63.1±2.2%, and 10.0±3.7% of the embryos were malformed at 18℃. The rates of development were 181 h at 18℃, 109 h at 21℃, and 76 h at 24℃. The larval size immediately after hatching was 4.64±0.22 mm (n=8), and the larvae displayed negative phototaxis at 1 day after hatching. The total larval length on 7 days after hatching was 12.47±0.53 mm, with 25~30 basal anal fin rays and 14~16 basal caudal fin rays observed. The total larval length was 14.13±0.51 mm on 9 days after hatching, and approximately 90% of the black endoplasmic reticulum was deposited on the head and body. The dorsal fin had formed, and a single basal body was observed. On 15 days after hatching, the total larval length was 16.69±0.31 mm; the number of basal caudal fin rays (18 poles) was an integer because 2 dorsal fin basal rays and 60~63 anal fin basal rays were observed. The total larval length was 28.96±1.10 mm on 50 days after hatching; the numbers of caudal fins (n=18), dorsal fins (n=3), pectoral fins (n=11), and anal fin basal rays (n=67~73) were integers.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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