플라스크 실험과 fermentor 발효실험으로 분리균주인 Acetobacter aceti B20 균주의 초산발효를 위한 몇가지 조건을 최적화하였다. 통기교반 조건이 제한된 flask 실험에서 B20 균주의 생육은 에탄올 농도에 민감하게 반응하여 4%의 에탄올 농도에서는 거의 생육이 되지 않았으며, 초산 생성량도 미미하였다. Flask 배양에서 B20 균주의 생육은 포도당 농도가 3%일 때 가장 좋았으나 농도가 증가할 수록 생육이 저해되었다. ${27^{\circ}C}$와 ${30^{\circ}C}$의 온도에서 A. aceti B20 균주의 생육과 초산생성은 유사하였으며, 이보다 낮거나 높은 온도에서는 생육과 초산 생성이 모두 저하되었다. B20 균주의 최적 발효온도는 $27{\pm}3^{\circ}C$ 범위로 생각된다. Fermentor의 교반속도가 높아질수록 B20 균주의 생육도와 초산생성량이 증가하여 500 rpm일 때 초산농도 5.34%, 발효수율은 57.2%이었다. Batch식 발효에서 초기 에탄올 농도가 7%일 때 발효 120시간째 산도가 5.34%로 가장 높았으며, 이 때의 발효수율은 56.1%로 가장 양호하였다. Fedbatch식 발효에서 초산농도는 2회 feeding할 때 144시간째 8.76%로 최고에 도달하였으며, 이 때 발효수율은 50.6%로 feeding 횟수가 증가할수록 낮게 나타났다.
막걸리 식초 생산에 효과적인 초산균을 분리하기 위해 다양한 시료에서 초산균을 검색하였고, 그 중 초산 생산이 우수한 균주인 Acetobacter pasteurianus CK-1을 최종 분리하였다. 분리균주의 최적 생육온도는 30.0℃로 확인되었고, pH 6.0에서 가장 왕성하게 생장하였으며, pH 5.5~6.5 범위에서 잘 생장하였다. A. pasteurianus CK-1은 배지의 초기 에탄올 농도가 4%일 때 가장 왕성하게 생장하였고, 7%의 에탄올 농도에서도 생장이 가능하였다. 분리균주를 막걸리에 접종하여 초산 발효를 유도하였을 때, 발효 초기 pH 3.54였던 것이 발효가 진행되면서 점차 낮아져서 발효 18일 후에는 pH 2.77이 되었다. 산도는 발효 초기에 0.75%였던 것이 발효 4일경부터 점차 증가하여 최종 산도는 5.54%로 증가하였다. A. pasteurianus CK-1 발효 식초에서는 acetic acid가 3,575.7±48.6 mg%로 높게 검출되었고, malic acid와 citric acid는 각각 2,150.8±27.6 mg%와 55.8±3.7 mg%로 검출되었다. 접종한 균주의 종류에 따라 생성되는 유기산의 함량과 비율이 유의하게 차이가 나는 것을 확인하였다. 초산 발효 동안 발효액 내의 효모와 A. pasteurianus CK-1의 개체군은 반비례적으로 변화하였다. 발효 초기에는 효모가 우점하였으나, 발효가 진행됨에 따라 A. pasteurianus CK-1이 서서히 증식하여 10일 후에는 정체기에 이르렀다.
El-Gendy, Mervat Morsy Abbas Ahmed;Al-Zahrani, Hind A.A.;El-Bondkly, Ahmed Mohamed Ahmed
Mycobiology
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제44권3호
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pp.171-179
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2016
In the screening of marine mangrove derived fungi for lovastatin productivity, endophytic Aspergillus luchuensis MERV10 exhibited the highest lovastatin productivity (9.5 mg/gds) in solid state fermentation (SSF) using rice bran. Aspergillus luchuensis MERV10 was used as the parental strain in which to induce genetic variabilities after application of different mixtures as well as doses of mutagens followed by three successive rounds of genome shuffling. Four potent mutants, UN6, UN28, NE11, and NE23, with lovastatin productivity equal to 2.0-, 2.11-, 1.95-, and 2.11-fold higher than the parental strain, respectively, were applied for three rounds of genome shuffling as the initial mutants. Four hereditarily stable recombinants (F3/3, F3/7, F3/9, and F3/13) were obtained with lovastatin productivity equal to 50.8, 57.0, 49.7, and 51.0 mg/gds, respectively. Recombinant strain F3/7 yielded 57.0 mg/gds of lovastatin, which is 6-fold and 2.85-fold higher, respectively, than the initial parental strain and the highest mutants UN28 and NE23. It was therefore selected for the optimization of lovastatin production through improvement of SSF parameters. Lovastatin productivity was increased 32-fold through strain improvement methods, including mutations and three successive rounds of genome shuffling followed by optimizing SSF factors.
Jeong, Yong Dae;Lee, Jung Jae;Seol, Kuk-Hwan;Kim, Doo Wan;Min, Ye Jin;Yu, Dong Jo;Cho, Kyu Ho;Kim, Young Hwa
농업과학연구
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제44권4호
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pp.558-565
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2017
This study was conducted to determine the effect of inoculation of microorganism isolated from pig feces on nutrient contents of fermented hulless barley. The microbial flora in feces of a total of four crossbred piglets ($Landrace{\times}Yorkshire{\times}Duroc$) was analyzed by 16s rRNA sequencing. The most abundant strain was then selected for fermentation of hulless barley. Lactobacillus plantarum (L. plantarum) was dominant (64.56%) in intestinal microbial flora in the pig feces. The selected candidate strain showed significantly higher survival rate at pH 7 than at pH 2.5 and 3.0 (p < 0.05). Incubated culture containing the candidate strain showed an increased growth rate with lower pH levels after 7.5 h incubation compared to initial incubation period (p < 0.05). When compared with commercial multiple probiotics which were used as control, the selected strain showed faster growth rate at 5 h post-incubation (p < 0.05). During the fermentation period, neither inoculated nor non-inoculated control hulless barley showed any change in pH value. Crude fat, fiber and ash contents were lower (p < 0.05) in hulless barley inoculated by the selected strain compared to control. However, moisture, energy, NDF and ADF were not affected by the inoculation of strain or fermentation period. Lactic acid was increased and acetic acid was decreased in the hulless barley inoculated with the selected strain during the fermentation period (p < 0.05). Taken together, our results suggest that L. plantarum derived from the pigs could be utilized as a new microorganism for manufacturing fermented feed stuffs.
Using Micromonospora strain, gentamicin was produced by fermentation. The increase in gentamicin productivity was studied by strain improvement and systematic optimization of fermentation process variables. The productivity of parent strain of M.purpurea (ATCC15835) was improved by selection of superior mutant after U.V. irradiation and induction of genetamicin resistance. Potato starch and soy bean meal were the best carbon and nitrogen sources for gentamicin fermentation, respectively. The optimum stimulating concentration of Co ion for gentamicin production was 0.006g $CoCl_2$ per liter of broth. Oxygen ws found to be an important factor for gentamicin yield. The optimum pH for the cell growth and gentamicin production were 7.2 and 6.8 respectively. By controlling the pH, oxygen, and other conditions found in this study at the optimal conditions for cell growth and gentamicin production, the total productivity of gentamicin was increased significantly.
In order to obtain a strain of producing lipase which has resistance against alkaline and detergent, a screening test was carried out. Among 500 strains isolated from soil samples, the strain J-19 was selected for this study. The composition of the optimum medium for the highest lipase production was 2.0% glycerin, 1.0% corn steep liquor, 2.0% yeast extract, 0.1% $MgSO_4$$7H_2O$, 0.2% $K_2HPO_4$, 1.5% soybean oil and 0.1% LAS(linear alkylbenzene sulfonate) with initial pH value of 10.0 and 3-day cultivation at $25^{\circ}C$. The lipase activity of the strain J-19 under optimal condition was 3.3. units/ml, which was increased about 1.3-fold than that of basal medium.
Yeast cells of a fusant strain constructed by protoplast fusion of Saccharomyces cerevisiae and Kluyveromyces frugilis were immobilized on calcium alginate beads. The increment of the ethanol tolerance of this strain to 8.0%, when compared with the parent K, fragilis, was confirmed. Based on the results from jar fermentation, a packed-bed reactor of theh immobilized yeast cells was operated. The optimal performance of the immobilized yeast reactor for ethanol production was achieved when supplying 10% lactose (suplemented 1.0% yeast extract) at a temperature of 30.deg.C. The maximal ethanol productivity was obtained as 13.3 g/I/hr at a dilution rate of $0.76 hr^{-1}$.
The artificial gene coding for anticoagulant hirudin was placed under the control of the GAL 10 promoter and expressed in the galactokinase-deficient strain (Δgal1) of Saccharomyces cerevisiae, which uses galactose only as a gratuitous inducer in order to avoid its consumption. For efficient production of recombinant hirudin, a carbon source other than galactose should be provided in the medium to support growth of the Δgal1 strain. Here we demonstrate the successful use of glucose in the fed-batch fermentation of the Δgal1 strain to achieve efficient production of recombinant hirudin, with a yield of up to 400 mg hirudin/L.
This experiment carried out to obtain the thermophilic yeast, suitable for ethanol fermentation, and two usable strain were isolated. And microbial characteristics of these strains were investigated, and ethanol fermentation tested. The results obtained were as follows; 1. The selected yeasts were identified D-71 with Saccharomyces cerevisiae, and J-515 with Saccharomyces fermentati. 2. The strains D-71 and J-515 were showed the highest ethanol fermentation activity in the crushed corn mash of high concentration at $35^{\circ}C$, and showed the slightly lower at $40^{\circ}C$ than in the case of $35^{\circ}C$. 3. The strains D-71 and J-515 were showed the very higher ethanol fermentation activity than that of compared strain at $35^{\circ}C$ and $40^{\circ}C$, and at these temperature, fermentation period was a little bit of short. 4. On fermentation test using D-71 and J-515, the residual total sugar in the mash was very lower at $35^{\circ}C$.
충남 아산시 호서대 주변 토양에서 Bacillus 균주를 분리하고, 생화학적 검사, VITEK, MIDI system을 이용해 Bacillus licheniformis B1으로 동정하였다. B. licheniformis B1은 amylase와 protease를 세포 외로 분비하였다. 본 균주를 증자 대두에 접종해서 청국장과 간장발효 과정을 추적하였다. 당과 아미노산의 항산화물질로 알려져 있는 갈변물질이, 청국장 발효에서는 초기에 비해 8배 이상, 간장에서는 2배 이상 증가하였다. 또한 청국장 발효에서는 단백질 분해효소의 활성이 발효시작 하루만에 최대치에 이르렀다. 간장발효에서는 단백질 분해효소의 활성이 발효시작 하루만에 50% 감소했으나 그 후로는 일정한 값을 유지하였는 데, 이는 salt의 영향으로 보인다. 또한 청국장과 간장이 발효되면서, 증자대두에 존재하지 않던 안정된 고분자 핵산이 확인되었다. 호서대 주변 토양에서 분리한 B. licheniformis B1으로, 청국장과 간장발효를 연속적이면서 성공적으로 수행할 수 있음을 본 연구를 통해 확인하였고, 아울러 갈변물질과 핵산 기능성 물질의 개발 가능성을 제시하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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