• 미생물학회지
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• 제27권4호
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• pp.348-356
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• 1989

PIeurotus ostrealus의 배양액에서 syringic acid에 의해 유도되는 peroxidase의 활성이 추정되었다. 본 효소는 DEAE Sephadex A-50 이온교환크로마토그래피와 Sephadex G-150 첼 여과크로마토 그래피를 통하여 순수분리 되었다. 순수분리된 효소는 당함량이 35.7%인 당단백젤이었으며. SDS-linear polyacrylamide gradient gel 전기영동과 젤여과크로마토그래피에 의해 분자량(Mr) 72.400인 2개의 동일한 소단위체로 이루어진 이합체로 판명되었다. 본 효소는 흡광 스펙프럼의 분석결과, iron protoporphyrin IX의 구조를 갖는 2개의 heme을 조효소로 가지고 였는 것으로 추정되였다. 본 효소의 등전점은 4.26 이었고 $H_2O_2$에 대한 $K_m$값은 $7.2{\mu}M$이었다. 본 효소의 반응 최적온도는 $40^{\circ}C$, 최적 pH는 3.5에서 4.0 사이였다. Ferulic acid와 sinapic acid에 대한 본 효소의 친화도(Km)는 horseradish peroxidase에 비해 각각 2.4. 12.3배 더 높은 것으호 계산되었다.

• BMB Reports
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• 제32권2호
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• pp.168-172
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• 1999

We previously reported that a novel thiol peroxidase (p20) from Escherichia coli is a distinct periplasmic peroxidase that detoxifies hydroperoxides together with glutathione or thioredoxin. Until now, there was no experimental evidence for the presence of thioredoxin (Trx) in the periplasmic space. In an attempt to confirm the physiological function of p20 as a thiol peroxidase supported by Trx in the periplasmic space, we have purified a Trx activity from the periplasmic space of Escherichia coli and identified the Trx as the same protein as the cytoplasmic Trx. The presence of Trx in the periplasmic space of Escherichia coli suggests that p20 is a unique extracellular Trx-linked thiol peroxidase.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제6권6호
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• pp.420-424
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• 1996

Effects of exogenous veratryl alcohol addition on the growth of basidiomycete Phanerochaete chrysosporium ME-446 and the induction of lignin peroxidase activity were investigated in this study. The organism was grown in ligninolytic (low-nitrogen) culture conditions in which extracellular enzymes are produced. Analyses showed that a statistically significant decrease of cell growth was associated with the veratryl alcohol addition. The effect of veratryl alcohol addition on LiP activity was nearly instantaneous and this effect diminished with culture aging. The extent of this effect was different depending on the time of addition, which led to a speculation that there might be some other effector species which played a role in regulation of lignin peroxidase activity.

• KSBB Journal
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• 제15권5호
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• pp.525-528
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• 2000

Taxus chinensis 세포배양 중의 FCW/DCW ratio, 세포내, 외 단백질 생산 및 peroxidase 활성의 변화를 배양시기별로 조사하였다. 조사 결과, 배지내 잔류당이 고갈되기 직전인 배양 14일째에 FCW/DCW ratio 는 12로 가장 낮은 수치를 나타내었고 DCW를 기준으로 한 세포 외에서의 protein 생산도 14일째 가장 낮은 수치인 4.3 mgfg DCW 였다. 배양시기별 P POD 활성도는 단백질 생산 pattern과 유사하였다. 이 결과들 은 flask에서 활발하게 증식 중인 세포들을 이용하여 측정한 것으로 대량배양시, 공정제어를 위한 자료 및 세포가 받는 stress 정도를 나타내는 지표로 활용할 수 있다

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제12권6호
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• pp.972-978
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• 2002

Streptomyces sp. AD001 is a Gram-positive soil actinomycetes secreting an uncharacterized 2,4-dichlorophenol (DCP) oxidizing enzyme, whose activity is similar to the previously known Actinomycetes lignin-peroxidase (ALiP). This extracellular peroxidase was purified from Streptomyces sp. AD001 as a single protein band on an SDS-PACE by ammonium sulfate fractionation, Q-sepharose, concanavalin A, and Bio-Gel HTP column chromatographies. The molecular mass of the purified peroxidase was determined by SDS-PAGE to be 45.2 kDa, and 49.7 kDa with MALDI-TOF-MS, respectively. The highest level of peroxidase activity was observed at pH 7.5 and $30^{\circ}C$. The amino terminal sequence of the purified peroxidase (G-E-P-E-E-G-N-V-D-G-T-L) showed no significant homologies to my known proteins, suggesting that Streptomyces sp. AD001 may secrete a novel kind of bacterial peroxidase Initial rate kinetic data of the 2,4-DCP oxidation were best modeled with a random-binding bireactant system.

• Journal of the Korean Wood Science and Technology
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• 제32권6호
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• pp.14-22
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• 2004

The effect of cadmium ions on ligninolytic and decolourizing activities in cultures of two white-rot fungi, Cerrena unicolor and Trametes versicolor, were examined. Cadmium was added to the shallow stationary cultures growing on a liquid mineral medium. Both examined strains sorbed Cd ions in the first 24 hr of incubation. An appreciable stimulation of the activity of extracellular laccase (LAC) and inhibition of the extracellular manganese-dependent peroxidase (MnP) were simultaneously observed when 25 mgL^-1 and 50 mgL^-1 of cadmium ions were added to the cultures. On the other hand, the addition of cadmium ions also resulted in stimulating the decolorization activity of C. unicolor to decolorize Remazol Brilliant Blue R (RBBR) in the cultures, but decreasing it in the culture of T. versicolor, which is compared to the inhibition of MnP activity in this fungus. Our data indicate that the presence of Cd(II) ions can affect the ligninolytic activity of white-rot fungi. It was found that C. unicolor is a strain resistant to the presence of Cd ions in the liquid culture media, and has a potential to use this strain for bioremediation of sites contaminated with both heavy metals and aromatic pollutants.

• Journal of the Korean Wood Science and Technology
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• 제27권2호
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• pp.53-61
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• 1999

리그닌분해균 LSK-27 균주로부터 Manganese peroxidase (MnP) 생산을 위한 배지조건과 Mn(II) 첨가효과를 검토하였다. LSK-27균주에 의한 균체외 MnP 생산에는 탄소원보다 질소원의 영향이 크게 나타났다. 질소원으로는 peptone 이나 yeast extract와 같은 복합 유기질소원이 효과적이었으며 특히 질소원의 농도가 높은 조건에서 MnP activity가 우수하였다. 질소원으로서 peptone 농도 1.0%까지는 뚜렷한 activity 증가를 가져왔으나 1.5%이상의 농도에서는 MnP activity 증가효과가 크게 나타나지 않았다. 반면에 탄소원의 농도에 의한 MnP activity 증가효과는 glucose농도 1.0% 에서 3.0%까지 거의 비슷한 수준이었다. Mn(II)는 높은 MnP 유도효과를 나타냈으며 첨가농도 100ppm 까지 MnP activity의 증가효과를 보였고 그 이상의 농도에서는 MnP 생산이 억제되었다. Mn(II)는 배양 2일 후에 첨가하였을 때 MnP activitv 증가가 가장 높게 나타났다.

• 미생물학회지
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• 제33권4호
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• pp.252-256
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• 1997

담자균류 백색부후균의 일종인 흰구름버섯(Coriolus hirsutus)을 실험균주로 하여 수종의 난분해성 방향족염료의 분해능을 측정하였다. 사용된 4종류의 염료 중, triphenyl methane 염료인 bromophenol blue가 탈색율 95% 이상으로 가장 잘 탈색되었으며, Congo red와 Poly R-478은 이보다는 낮은 57%, 55%가 탈색되었다. 그러나, heterocyclic 염료인 methylene blue는 본 균주에 의해 거의 탈색되지 않았으며, UV-visible spectrum상에서의 심색성 이동만 관찰되었다. 세포외 laccase와 peroxidase의 활성은 각 염료의 탈색율과 비례하여 나타났으며, 최대 활성 또한 최대 탈색시기에 관찰되었다. 효소의 활성 염색시 모든 염료의 탈색배지에서 공통적인 laccase와 peroxidase의 활성 띠가 관찰되었다. 이러한 결과로 볼 때, 세포외 laccase와 peroxidase가 난분해성 염료의 탈색에 중요한 역할을 할 것으로 판단된다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제16권2호
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• pp.226-231
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• 2006

Several white-rot fungi are able to produce extracellular lignin-degrading enzymes such as manganese peroxidase (MnP), lignin peroxidase (LiP), and laccase. In order to enhance the production of laccase and MnP using Trametes versicolor KCTC 16781 in suspension culture, the effects of major medium ingredients, such as carbon and nitrogen sources, on the production of the enzymes were investigated. The decolorization mechanism in terms of biodegradation and biosorption was also investigated. Among the carbon sources used, glucose showed the highest potential for the production of laccase and MnP. Ammonium tartrate was a good nitrogen source for the enzyme production. No significant difference in the laccase production was observed, when glucose concentration was varied between 5 g/l and 30 g/l. As the concentration of nitrogen source increased, a lower MnP activity was observed. The optimal C/N ratio was 25 for the production of laccase and MnP. When the concentrations of glucose and ammonium tartrate were simultaneously increased, the laccase and MnP activities increased dramatically. The maximum laccase and MnP activities were 33.7 U/ml at 72 h and 475 U/ml at 96 h, respectively, in the optimal condition. In this condition, over 90% decolorization efficiency was observed.

• KSBB Journal
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• 제21권2호
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• pp.85-89
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• 2006

F. trogii ATCC 200800으로부터 원형질체 분리를 통해 단일균주들을 선별하였으며, 선별된 균주들의 고체배양 및 agar plug assay를 통해 효소생산을 위한 균주를 대량 선별하였다. Agar plug assay를 통해 4일 동안 100여종 이상의 균주를 동시에 배양, 분석이 가능하였으며, 염료분해환을 형성하지 않은 균주는 액체배양 확인 결과 MnP의 생산이 거의 일어나지 않는 것으로 나타났다. 이러한 방법으로 선별된 균주를 이용하여 UV 돌연변이를 통해 모균주로부터 유전적 변이를 유도해 새로운 균주선별을 시도하였으며, 이로부터 모균주와 비교하여 효소생산성이 향상되고 안정성이 증대된 균주를 선별할 수 있었다. 모균주와 선별된 균주의 명확한 유전적 차이를 규명하기보다는 배양시 형태학적 특성이 상이함을 확인하였다. 또한, 선별된 균주를 이용하여 배양액내에 다양한 종류의 inducer를 첨가에 따라 효소생산에 미치는 영향을 확인하였다. 과량의 inducer 물질이 첨가될 경우, 균체성장은 물론 효소생산성도 크게 떨어졌으며, 균체성장이 어느 정도 이루어진 상태 즉, 이차대사가 이루어지는 시점에서 inducer를 첨가할 경우 그 효율이 최대였으며, 동시에 inducer를 첨가할 경우 보다 미량씩 일정량을 나누어 주입할 경우 효소생산에 더 유리한 것으로 나타났다.