• Journal of Forest and Environmental Science
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• 제24권1호
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• pp.53-59
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• 2008

목질 바이오매스(wood biomass)를 효율적으로 분해하는 최적 배양조건을 확립하기 위하여 국내 침엽수 4수종(소나무, 낙엽송, 잣나무, 리기다소나무)의 목질바이오매스를 혼합하여 목분의 적정입도, 배양기간, 기질첨가농도별 균주의 균체외효소 활성을 측정하였다. 연구 결과, 혼합목분을 기질로 했을때 Fomitopsis palustris가 분비하는 균체외효소 활성은 효소 종류에 따라 기질농도, 목분입도, 및 배양기간등의 배양조건에 따라 다른 효소활성 값을 나타냈다. 침엽수 혼합목분을 기질로 했을 때 대부분의 cellulase 분비를 유도하는 최적 조건은 목분 입도, 80~100 mesh, 기질 농도는 7.5%가 적정한 것으로 밝혀졌다. 또한 최적의 목분입도 및 투입농도 조건에서 배양기간은 4~8주로 적절한 것으로 구명되었다.

• 미생물학회지
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• 제31권1호
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• pp.93-98
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• 1993

수계생태계에서 유기물질의 순환을 이해하기 위하여 팔당호에서 종속영양 활성도와 세균세포의 효소활성의 계절절 변화를 연구하였다. 팔당호 I 의 glucose 전환시간은 수층, 퇴적토에서 2-1,300 시간, 17-170 시간, protein hydrolysate 는 5-900 시간, 15-240 시간, acetic acid 는 4-350 시간, 15-230 시간으로 계절적인 변화를 나타냈다. Glucose, protein hydrolysate, acetate 각각의 호흡율은 수층에서 23-32%, 38-41%, 22-28%로 나타났고 퇴적토에서는 34%, 61% and 41% 로 나타났다. 이 결과로 3가지 유기물질 종류 모두가 수층보다 퇴적토에서는 높은 율로 호흡됨을 알 수 있었다. 한편 세균의 $\alpha$-glucosidase, $\beta$-glucosidase, N-acetyl-$\beta$-D-glucosaminidase, aminopeptidase 활성력을 살펴본 결과 수층에서는 효소 각각에 대해 32-44%, 31-32%, 18-34% 61-67% 의 범위를 나타내었고 퇴적토에서는 34%, 40%, 23% 65%로 나타났다.

• BMB Reports
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• 제44권1호
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• pp.40-45
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• 2011

Extracellular superoxide dismutase (EC-SOD) is an antioxidant enzyme that protects cells and tissues from extracellular damage by eliminating superoxide anion radicals produced during metabolism. Two different forms of EC-SOD exist, and their different enzyme activities are a result of different disulfide bond patterns. Although only two folding variants have been discovered so far, five folding variants are theoretically possible. Therefore, we constructed five different mutant EC-SOD expression vectors by substituting cysteine residues with serine residues and evaluated their expression levels and enzyme activities. The mutant EC-SODs were expressed at lower levels than that of wild-type EC-SOD, and all of the mutants exhibited inhibited extracellular secretion, except for C195S ECSOD. Finally, we demonstrated that co-expression of wild-type EC-SOD and any one of the mutant EC-SODs resulted in reduced secretion of wild-type EC-SOD. We speculate that mutant EC-SOD causes malfunctions in systems such as antioxidant systems and sensitizes tissues to ROS-mediated diseases.

• 생명과학회지
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• 제20권6호
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• pp.902-906
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• 2010

고온성 균주로 알려진 Geobacillus 속의 다양한 균주로부터 내열성 extracellular lipase를 생산하는 G. kaustophilus DSM 7263를 선별하였다. 우리는 본 균주로부터 lipase를 대량생산하기 위한 최적 조건을 조사하였다. 배양 배지에 다양한 천연오일을 첨가한 결과, lipase의 최적 생장을 위한 탄소원으로는 0.5% 올리브 오일이 최적 조건으로 확인되었다. 본 균주의 생장을 위한 최적온도와 pH는 각각 $55^{\circ}C$와 8.0인 반면, lipase 생산을 위한 최적 온도와 pH는 각각 $50^{\circ}C$와 6.0을 나타내어 최적생육조건과는 다른 양상을 나타내었다. 금속이온에 대한 영향에 대해서는 배지에 $Mg^{2+}$과 $Mn^{2+}$을 첨가한 경우 각각 247%와 157%의 효소 생산이 증가한 반면, $Co^{2+}$, $Fe^{2+}$, $Ni^{2+}$, $Cu^{2+}$는 효소 생산을 저해 하였다. 또한 0.1% (v/v) triton X-100을 첨가하면 대조구에 비해 효소생산과 균의 생장이 모두 증가하는 것으로 나타났다.

• Mycobiology
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• 제39권2호
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• pp.125-128
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• 2011

Enzyme activities of Cenococcum geophilum isolates were examined on enzyme- specific solid media. Deoxyribonuclease, phosphatase, and urease were detected in all isolates, whereas cellulase was not detected in any of the isolates. Variations in enzyme activities of amylase, caseinolysis, gelatinase, lipase, and ribonuclease were observed among isolates.

• 미생물학회지
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• 제32권2호
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• pp.147-154
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• 1994

Serratia marcescens가 세포외로 분비하는 nuclease의 유전자가 발현된 Escherichia coli JM107을 배양하여 다량의 효소를 정제하였다. Matrex green gel과 heparin agarose gel column chromatography법으로 약 50배 정제한 효소는 분자량이 29KDa였으며, 전기영동 상에서 단일 띠를 보였다. 이 단백질을 이용하여 polyclonal antibody를 만들고, 면역조직화학법으로 세포내의 분포를 조사하였다. Nuclease는 주로 세포막에 존재하였고, 이를 토대로 효소가 세포질에서 합성된 후 세포막으로 빠르게 이동함을 알 수 있었다. 이 결과는 세포의 막분획에서 효소의 활성의 대부분이 회수되며, 면역블럿 방법으로 효소의 대부분이 세포막에서 검출된다는 결과와 일치하였다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제18권5호
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• pp.490-495
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• 1990

토양 분리균인 Bacillus spp.가 생산하는 inulinase를 ammonium sulfate 분획, 열처리, DEAE Sephadex Cl-6B ion exchange chromatography, Sephadex G-100 및 Sephadex G-150 gel 여과 등의 과정을 거쳐 단일 단백질로 분리 정제하였다. 정제 inulinase는 분자량이 약 56,000인 효소로서 pH6.0,$50^{\circ}C$에서 최대 활성을 나타내었으며 $Co^{2+}$와 $Mn^{2+}$에 의해서 현저한 활성화 효과를 보였다. 또한 본 효소는 sucrose와 raffinose에 대해서도 높은 활성을 나타내므로 $\beta$-D-fructofuranosidase(EC 3.2.1.26)로 분류되는 exo-inulinase인 것으로 확인되었다. 한편 효소활성에 필수적인 아미노산 잔기는 tryptophan과 histidine인 것으로 분석되었으며 inulin과 sucrose에 대한 $K_m$값은 각각 $2.0 \times 1.0^[-3}M, 1.0 \times 10^[-2}M$로 산출되었다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제14권5호
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• pp.1004-1008
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• 2004

An extracellular acid phytase from Pseudomonas fragi Y9451 was purified to homogeneity from the culture supernatant by salting-out, DEAE-Sepharose column chromatography, CM-Sepharose column chromatography, and Sephacryl S-300 gel filtration. The molecular weight of the purified enzyme was estimated to be 74 kDa on gel filtration and 54 kDa and 25 kDa on SDS-PAGE, suggesting that the native enzyme was a heterodimeric protein. The purified enzyme was most active at pH 4.5 and $70^{\circ}C$ and fairly stable from pH 4.0- 6.0. It was specific for phytate and exhibited a $K_{m}$ value of 27 mM (sodium phytate, pH 4.5, $50^{\circ}C$). The phytase activity was strongly inhibited (at maximum by 87%) by $Fe^{3+},\;Cu^{2+},\;Fe^{2+}$, and $Zn^{2+}$ at 5 mM concentration, and greatly inhibited by $Ca^{2+}$ at 10 mM concentration. However, EDTA notably stimulated the phytase activity at 10 mM concentration. With optimum pH and stability, Pseudomonas fragi phytase could be a potential candidate for animal feed applications.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제15권5호
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• pp.306-311
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• 1987

황산암모늄 분획, 2차례의 DEAE-Cellulose, DEAE-Sephadex A-50 및 Sephacryl S-200 superfine gel filtration으로 정제한 결과 Streptomyces sp. J-350P의 세포외 adenine deaminase는 0.3%의 수율로서 1764배로 정제되었다. Streptomyces sp. J-350P의 세포외 adenine deaminase는 pH6.5~8.5 사이에서 안정하였고, pH7.0에서 10분간 열처리하였을 때 5$0^{\circ}C$까지는 안정하였다. 효소 활성 최적 pH와 온도는 pH6.5와 35$^{\circ}C$ 였다. Sephacryl S-200 superfine gel filtration 의한 분자량의 측정 결과 본 효소의 분자량은 약 36,000이었다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제21권5호
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• pp.453-460
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• 1993

The extracellular bacteriolytic enzyme from alkalophilic Bacillus sp. YJ-451 was endopeptidase which hydrolyzes the peptide bond at the amino group of D-glutamic acid in the peptidoglycan. Protoplast transfomation system of B. subtilis by the lytic enzyme that differs, in mechanisms, from lysozyme which was used to transformation of B. subtilis was investigated. High protoplast yield was obtained from cells cultured in PAB at the late logarithmic growth phase.