• 제목/요약/키워드: ethidium bromide

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송아지 胸線 DNA의 Spermine에 依하여 誘發되는 異例的 吸光度-溫度 樣相에 미치는 Ethidium Bromide의 影響 (Effect of Ethidium Bromide on Anomalous Absorbance-Temperature Profile, of Calf Thymus DNA, induced by Spermine)

  • 이찬용;고동성
    • 대한화학회지
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    • 제29권3호
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    • pp.271-276
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    • 1985
  • 송아지 胸線 DNA가 單分子的 凝縮된(collapsed) 構造를 이루는 spermine 濃度에서 얻어지는 異例的 吸光度-溫度 樣相(anomalous absorbance-temperature profile)의 trough 領域에 이르는 相變移에 對한 cooperativity, enthalpy, 및 相變移 midpoint를 구하여 그 값들을 Tm 領域의 값들과 比較한 結果 그 두 그룹의 값들은 서로 相異하였으며 前者의 값들이 後者의 값들 보다 ethidium bromide에 對하여 더 銳敏하였다. Ethidium bromide 濃度를 增加시킴에 따라서 그 trough의 깊이가 작아져서 終局的으로 없어졌으나 그와 對照的으로 Tm은 實驗的으로 一定하게 維持되었다. 本 硏究結果를 基礎로 하여 DNA 凝縮 메카니즘을 推理하였다.

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Ethidium Bromide에 의한 Streptomyces bobili(YS-40)의 R-Plasmid 제거 (Elimination of R-Plasmid in Streptomyces bobili (YS-40) by Ethldium Bromide)

  • 김상달;도재호
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제10권4호
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    • pp.289-295
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    • 1982
  • Streptomyces bobili (YS-40) 의 Hg, Ag, penicillin-G, ampicillin, chloramphenicol, oxytetracycline, streptomycin, kanamycin에 대한 생육최소저해농도는 각각 15, 10, >3,000, >100, >1,000. >100. <5, <5 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$였으며 본 균주의 R-plasmid를 제거시키기 위하여 ethidium bromide, acriflavine, sodium dodecyl sulfate 등의 curing agent를 처리시킨 결과를 요약하면 다음과 같다. Ethidium bromide를 10$\mu\textrm{g}$/$m\ell$의 농도로 처리했을 때 98.0% 정도의 R-plasmid를 제거시킬 수 있었다. pH 7.0에서 curing시킴으로서 R-plasmid가 가장 잘 제거되었으며 분균을 24시간동안 배양해서 curing시킴으로서 R-plasmid의 제거율이 가장 높게 나타났다. Ethidium bromide에 의해서 R-plasmid가 제거된 균과 원균을 여러가지 색소생성배지에서 배양시켜 배양상의 특성을 조사해 본 결과 peptone-beef extract agar 배지에서 aerial mass color가 greyish pink에서 grey로 변했으며 tryptone-yeast extract broth에서 배지에서 soluble pigment가 pale brown에서 무색으로 변했다. 이 결과로는 aerial mycelium, melanin 생성과 R-plasmid 는 무관하다고 추측된다.

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Bacillus subtilis의 항생물질 내성에 대한 Curing작용 (Curing Action of Antibiotic Resistant Factor in Bacillus Subtilis)

  • Hong, Yong-Ki;Seu, Jung-Hwn
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제13권2호
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    • pp.103-107
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    • 1985
  • B. subtilis의 항생물질 내성균주에 대하여 여러 plasmid curing 시약인 sodium dodecyl sulfate, acriflavine, ethidium bromide, mitomycin-C등을 처리하여 streptomycin 감수성 변이주를 만들었다. Sodium dodecyl sulfate 처리의 경우 0.1% 농도에서 균체성장 극대기에 도달한 후부터 항생물질 감수성 비율이 증가되었으며, acriflavine 처리의 경우는 4$\mu\textrm{g}$/$m\ell$ 농도에서, ethidium bromide 처리의 경우에는 10$\mu\textrm{g}$/$m\ell$ 농도에서. 그리고 mitomycin-C 처리의 경우에는 200$\mu\textrm{g}$/$m\ell$ 농도에서 가장 curing빈도가 높았다. 또 이들 curing 작용은 B. subtilis의 streptomycin과 terramycin 내성균주에서 보는 바와 같이 경쟁적 작용으로 일어났다.

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Improved Fluorometric Assay Method for Ribonuclease Activity

  • Lee, Jong-Soo;Choi, Jong-Soo
    • BMB Reports
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    • 제30권4호
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    • pp.258-261
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    • 1997
  • A simple quantitative assay method for ribonuclease activity has been developed. This method is based on the decrease of fluorescence intensity emitted by the ethidium bromide bound to RNA due to the degradation of RNA by ribonuclease. The substrate RNA was reacted with ribonuclease A and the fluorescence intensity was measured after the addition of ethidium bromide. The intensity difference was calculated using a blank reaction mixture containing no RNase. Whole cellular RNA substrate produced a significant error and was not suitable for this assay method possibly because of local microheterogeniety caused by high molecular weight rRNA. but satisfying results were obtained with tRNA substrate. The intensity difference increased linearly by raising enzyme concentration up to $2{\times}10^{-4}$ Kunitz Units of ribonuclease A. More refined and reliable results were obtained by use of initial reaction velocities which were calculated from the plots of intensity difference vs time. A linear relationship between initial velocities and enzyme concentrations was observed up to 0.01 Kunitz Units of enzyme.

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Rapid Isolation of Mitochondrial DNA-Depleted Mammalian Cells by Ethidium Bromide and Dideoxycytidine Treatments

  • Yoon, Young Geol;Oh, Yoo Jin;Yoo, Young Hyun
    • Journal of Applied Biological Chemistry
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    • 제57권3호
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    • pp.259-265
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    • 2014
  • Mitochondrial DNA (mtDNA)-depleted (${\rho}^0$) cells are often used as mtDNA recipients to study the interaction between the nucleus and mitochondria in mammalian cells. Therefore, it is crucial to obtain mtDNA-depleted cells with many different nuclear backgrounds for the study. Here, we demonstrate a rapid and reliable method to isolate mammalian mtDNA-depleted cells involving treatment with the antimitochondrial agents ethidium bromide (EtBr) and 2',3'-dideoxycytidine (ddC). After a short exposure to EtBr or ddC, followed by rapid clonal isolation, we were able to generate viable mtDNA-depleted cells from mouse and human cells and were able to successfully repopulate them with exogenous mitochondria from platelets isolated from mouse and human blood samples. These mtDNA-depleted cells can be used to characterize the nuclear mitochondrial interactions and to study mtDNA-associated defects in mammalian cells. Our method of isolating mtDNA-depleted cells is practical and applicable to a variety of cell types.