Background: Embryonic stem cells (ESCs) have the potential to form teratomas when implanted into immunodeficient mice, but data in immunocompetent mice are limited. We therefore investigated teratoma formation after implantation of three different mouse ESC (mESC) lines into immunocompetent mice. Materials and Methods: BALB/c mice were injected with three highly germline competent mESCs (129Sv, BALB/c and C57BL/6) subcutaneously or under the kidney capsule. After 4 weeks, mice were euthanized and examined histologically for teratoma development. The incidence, size and composition of teratomas were compared using Pearson Chi-square, t-test for dependent variables, one-way analysis of variance and the nonparametric Kruskal-Wallis analysis of variance and median test. Results: Teratomas developed from all three cell lines. The incidence of formation was significantly higher under the kidney capsule compared to subcutaneous site and occurred in both allogeneic and syngeneic mice. Overall, the size of teratoma was largest with the 129Sv cell line and under the kidney capsule. Diverse embryonic stem cell-derived tissues, belonging to the three embryonic germ layers, were encountered, reflecting the pluripotency of embryonic stem cells. Most commonly represented tissues were nervous tissue, keratinizing stratified squamous epithelium (ectoderm), smooth muscle, striated muscle, cartilage, bone (mesoderm), and glandular tissue in the form of gut- and respiratory-like epithelia (endoderm). Conclusions: ESCs can form teratomas in immunocompetent mice and, therefore, removal of undifferentiated ESC is a pre-requisite for a safe use of ESC in cell-based therapies. In addition the genetic relationship of the origin of the cell lines to the ability to transplant plays a major role.
Introduction: Prostate cancer in Indonesia is the $3^{rd}$ ranking cancer among males and the $5^{th}$ rank for their cancer mortality. Prognostic markers that can identify aggressive prostate cancer in early stages and help select appropriate therapy to finally reduce the mortality are therefore urgently needed. It has been suggested that stem cells in the prostate gland have a role in initiation, progression, and metastasis of cancer, although controversy continues to exist. Maintenance of normal stem cell or reserve cell populations in several epithelia including prostate has been shown to be regulated by p63 and alteration of p63 expression is considered to have an oncogenic role in prostate cancer. We hypothesize that the expression of cytoplasmic aberrance of p63 is associated with high ALDH1A1 expression as a cancer stem cell marker, thus leading to progression of prostate cancer. Methods: Using a cross-sectional study during two years (2009-2010), a total of 79 paraffin embedded tissues of benign prostatic hyperplasia, PIN prostatic intraepithelial neoplasia, low and high Gleason score prostate cancer were investigated using immunohistochemistry. Associations between cytoplasmic p63 and ALDH1A1, as well as with pathological diagnosis, were analyzed by Chi-Square test using SPSS 15.0. Links of both markers with cell proliferation rate (KI-67) and apoptotic rate (cleaved caspase 3) were also analyzed by Kruskal-Wallis test. Results: The mean age of patient at the diagnosis is 70.0 years. Cytoplasmic aberrance of p63 was associated with ALDH1A1 expression (p<0.001) and both were found to have significant relationships with pathological diagnosis (including Gleason score), (p=0.006 and p<0.001 respectively). Moreover, it was also found that higher levels of cytoplasmic p63 were significantly associated with the frequency of proliferating cells and cells undergoing apoptosis in prostate cancers (p=0.001 and p=0.016 respectively). Conclusion: p63 cytoplasmic aberrance is associated with high ALDH1A1 expression. These components are suggested to have an important role in prostate cancer progression and may be used as molecular markers.
Objective: Desmogleins (DSGs) are major members among the desmosomal cadherins critically involved in cell-cell adhesion and the maintenance of normal tissue architecture in epithelia. Reports exploring links of DSG family member expression with cancers are few and vary. The aim of this study was to investigate the ratio of DSG2 and DSG3 mRNA expression in esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) tissue to normal tissue (T/N ratio) and evaluate correlations with clinical parameters. Methods: The mRNA expression of DSGs, as well as ${\gamma}$-catenin and desmoplakin, was detected by real-time quantitative RT-PCR in 85 cases of ESCC tissue specimens. Results: The expression level of DSG3 mRNA was significantly higher than that of DSG2 in ESCC specimens (p=0.000). DSG3 mRNA expression highly correlated with histological grade (p=0.009), whereas that of DSG2 did not significantly relate to any clinicopathologic parameter. Kaplan-Meier survival analysis showed that only DSG3 expression had an impact on the survival curve, with negative DSG3 expression indicating worse survival (p=0.038). Multivariate Cox regression analysis demonstrated DSG3 to be an independent prognostic factor for survival. Furthermore, correlation analysis demonstrated the mRNA level of DSG3 to highly correlate with those of ${\gamma}$-catenin and desmoplakin in ESCC samples (p=0.000), implying that the expression of desmosomal components might be regulated by the same upstream regulatory molecules. Conclusions: Our findings suggest that DSG3 may be involved in the progression of ESCC and serve as a prognostic marker, while expression of DSG2 cannot be used as a predictor of ESCC patient outcome.
The present experiments were carried out to elucidate the effects of hypophysectomy and subsequent administration of sex hormone on thyroid, adrenal gland, gonads and blood plasma components in the rat. The jresults obtained were summarized as follows: The weight of the thyroid gland of both male and female hypophysectiomzed rats decreased markedly from 7 days up to 56 days after the hypophysectomy as compared to the control group. The administration of sex hormone (6 mg of testosterone propionate to male and 6 mg of hexestrol to female) to the hypophysectomized rat gave on effect on the change in the weight of the thyroid gland. The hopophysectomy decreased the uptake of radioactive iodine in the thyroid gland in both male and female rats with time. Subsequent administration of the sex hormone caused no effect. With regard to the histological changes of the thyroid gland, the hypophysectomy caused significant changes in the gland showing a remarkable degeneration. The function of the gland seemed to disa, pp.ar almost completely on 56th day after the hypophysectomy. Upon the administration of sex hormone after the hypophysectomy, however. the epithelia of the follicle which has changed to flat from has partly returned to its functional cubicfrom and nuclei recovered as nearly as normal. These recovery were more remarkable in the female than in the male. The hypophysectomy kept causing a significant decrease in the weight of the adrenal gland in male and female rats during the period of observation (up to 56 days) as in the case of thyroid gland. The administration of sex hormone has on effect in this respect either. The hypophysectomy also caused a marked morphological change in the gland: zona fasciculata and zona reticularis were dicreased in size quichly after the hypophysectomy. The administraton of the sex hormone to the hypophysectomized rat resulted in clear distinction among the three layers of the adrenal cortex which otherwise very diffused. In the male, this phenomenum was more remarkable than in the female and the pattern of the cell arrangements and the thickening of each layer became similar to those of normal rats. The gonads of both sexes have also kept decreasing in the weight and degenerated in morpohology after the hypophysectomy. However, the degenerate follicle became enlarged after the administration of hexestrol in the female. Furthermore, the vacuoles found in interstitial cells of hypophysectomized rat disa, pp.ared after the administration of testosterone in the male and the formation of spermatocytes seemed to be recovered. Hypophysectomy also caused a gradual increase in the contents of total protein, non-protein nitrogen, total lipid, cholesterol and calcium in the blood plasma with time. The concentrations of sodium, potassium and chloride in the blood did not change after the hypophysectomy. Sex hormone caused practically no change in above tendency.
본 연구는 감성돔(Acanthopagrus schlegeli)에 기생한 Amyloodinium sp.의 성상을 알기 위하여 이 기생충의 형태 계측학적인 특징을 조사하는 한편, 지속적인 감염을 유도하여 충체의 발달과 번식 특성 및 병리 조직상을 확인하고자 하였다. 이 기생충의 형태는 크게 기생기(parasitic phase)와 비기생기(nonparasitic phase)로 구분할 수 있었고, 영양형(trophont), 분열형(tomont), 자충(dinospore)의 3단계의 발달과정을 거치는 것을 알 수 있었다. 방추형 또는 난형인 기생 충체는 색깔이 없었으며, 직경 30-$80{\mu}m$ 크기였다. 성숙한 충체는 크기가 약 $80{\mu}m$ 내외로 체내에 $15{\mu}m$의 둥근 핵과 다수의 식포 및 전분성 과립을 함유하고 있으며, 가근상 돌기가 있는 부착기로 아가미 기저막에 부착해 있었다. 비기생기인 분열형은 80-$90{\mu}m$의 크기로 어체로부터 이탈된 직후 구형의 Cyst wall을 가지고 있던 것이 분열과 함께 Cyst wall의 모양이 사각형으로 변하였으며, 지속적인 2분열로서 감염형을 생성하였다. 8회의 분열로서 생성된 감염형은 $10-15{\times}10-14{\mu}m$의 크기로 전체 형태가 둥글고 양끝이 편평하였으며 체내에 다수의 과립을 가지고 있었다. 그리고 자충은 2개의 편모(충체 중앙부에 허리띠 모양의 가로 편모와 뒤로 길게 늘어뜨린 세로 편모)를 가지고 있는 것을 볼 수 있었다. 또한 안점은 기생 초기의 충체와 자충에서 관찰되었다. 조피볼락(Sebastes schlegeli)에 인위 감염을 유도하여 발달과 번식 특성을 확인한 결과, 이 충은 수온 24-$26^{\circ}C$의 어체에서 3-5(평균, 3.75)일만에 성숙하며, 이탈하여 수중에서 3-4(평균, 3.3)일만에 분열하여 256개의 자충을 생성하는 것으로 조사되었다. 한편, 이들 감염어의 아가미 조직은 감염 초기에 뚜렷한 병변을 나타내지 않지만, 감염이 진행되면서 지속적인, 재감염으로 인하여 아가미 상피세포의 과잉 형성을 일으켜 새판이 비후되어 곤봉화되고 결국 감염어는 폐사되는 것으로 판단되었다.
In mammals, puberty is a dynamic transition process from infertile immature state to fertile adult state. The neuroendocrine aspect of puberty is started with functional activation of hypothalamus-pituitary-gonadal hormone axis. The timing of puberty can be altered by many factors including hormones and/or hormone-like materials, social cues and metabolic signals. For a long time, attainment of a particular body weight or percentage of body fat has been thought as crucial determinant of puberty onset. However, the precise effect of high-fat (HF) diet on the regulation of hypothalamic GnRH neuron during prepubertal period has not been fully elucidated yet. The present study was undertaken to test the effect of a HF diet on the puberty onset and hypothalamic gene expressions in immature female rats. The HF diet (45% energy from fat, HF group) was applied to female rats from weaning to around puberty onset (postnatal days, PND 22-40). Body weight and vaginal opening (VO) were checked daily during the entire feeding period. In the second experiment, all animals were sacrificed on PND 36 to measure the weights of reproductive tissues. Histological studies were performed to assess the effect of HF diet feeding on the structural alterations in the reproductive tissues. To determine the transcriptional changes of reproductive hormone-related genes in hypothalamus, total RNAs were extracted and applied to the semi-quantitative reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR). Body weights of HF group animals tend to be higher than those of control animals between PND 22 and PND 31, and significant differences were observed PND 32, PND 34, PND 35 and PND 36 (p<0.05). Advanced VO was shown in the HF group (PND $32.8{\pm}0.37$ p<0.001) compared to the control (PND $38.25{\pm}0.25$). The weight of ovaries (p<0.01) and uteri (p<0.05) from HF group animals significantly increased when compared to those from control animals. Corpora lutea were observed in the ovaries from the HF group animals but not in control ovaries. Similarly, hypertrophy of luminal and glandular uterine epithelia was found only in the HF group animals. In the semi-quantitative RT-PCR studies, the transcriptional activities of KiSS-1 in HF group animals were significantly higher than those from the control animals (p<0.001). Likewise, the mRNA levels of GnRH (p<0.05) were significantly elevated in HF group animals. The present study indicated that the feeding HF diet during the post-weaning period activates the upstream modulators of gonadotropin such as GnRH and KiSS-1 in hypothalamus, resulting early onset of puberty in immature female rats.
Eik-Nes (1966) reported that the mechanism of spermatogenesis is controlled by FSH and LH and maintaned normally in scrotum terperautre which is 3-5$^{\circ}C$ lower than body termperature. But Ojeda and Ramirez (1972) have described that the abdominal testis was shrinked severely and lost its normal function in congenital cryptorchidism or surgically induced cryptorchidism. Ramirez and Sawyer (1974) reported that the compensatory hypertorphy occured in the remaining testis of unilateral castration and the scrotal testis of unilateral cryptorchidism. Cunninham et al. (1978) reported that the serum FSH levle increased after unilateral castration. Frankel and Wright (1982) reported that the serum LH level was unchanged greatly after unilateral castration. Gomes and Jain (1976) reported that the serum testosterone level increased temporarily but not varied after unilateral castration. On the other hand, Kormano et al. (1964) reported that the serum FSH level in unilateral cryptorchidism rat was unchanged in contrast with the control and Risbirdger et al. (1981) reported that the serum LH level was unchanged till 2 weeks after operation and after then increased to 77%. Kim (1984) reported that the serum testosterone level was somewhat lower than that fo control group but there was't significant different. There were many different reports on hormone levels among different investigators when the immarue rats were castrated unilaterally or induced cryptorchidism unilaterally. Liang and Liang (1970) and Cunningham et al. (1978) described that there were no true compenastory hypertrophy in the remaining testis of unilateral castration and scrotal testis of unilateral testis of unilateral cryptorchidism in rat but they grew faster than that of control. Kormano et al.(1964), Damber et al.(1976), Cunningham et al.(1978) and Karpe et al.(1981) reported that the testis weight, germinal epithelia height and seminiferous tubules diameter developed continuously and similarily in the control, the remaining testis of unilateral castration and scrotal testis of unilateral cryptorchidism increased, however, in the abdominal testis of the unilateral cryptorchidism, they were much smaller than those of other groups. In observation of the histological changes in the seminiferous epithelium of control, remaining tesis of unilateral castration and scrotal testis of unilateral cryptorchidism differentiated and developed fully(Cunningham et al., 1978). However, the abdominal testis of unilateral crytorchidism degenerated severely and only the germ cells in early stage and Sertoli cells were found in the seminiferous tubules. (Damber et al., 1976, Gomes and Jain, 1976 and Karpe et al., 1981). By electron microscopic observation, Nagano (1963) and Leason and Leeson (1970) found that the abdominal testis of unilateral cryptorchidism was thicked in boundary tissue, increased lipid droplet in the Sertoli cell, disarranged axial filament complex and increased lipid inclusions in the Sertoli cell.
Park, Young-Wook;Min, Bong-Gi;Kim, Ji-Hyuck;Kim, Soung-Min;Lee, Young-Joon;Lee, Sang-Shin;Lee, Suk-Keun;Moon, Huck-Soo;Chi, Je-Geun
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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제32권1호
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pp.19-26
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2006
Objective: In order to elucidate the retrogressive degeneration of orofacial cleft, the fissured tissues of prenatal and postnatal cleft lip and palate were examined by histological and immunohistochemical methods. Design: Totally 42 cases of prenatal (n=17) and postnatal (n=25) cleft lip and/or palate were examined in comparison with 10 cases of normal lip and oral mucosa using immunohistochemical stainings of MMP-3, MMP-9, MMP-10, cathepsin G, PCNA, E-cadherin, TGase 2, HSP-70, vWF, and VEGF. Main Outcome Measures: In the fissured tissue the sebaceous glands were strongly positive for PCNA and grew into the underlying fibromuscular tissue (24/42). Some hyperplastic sebaceous glands of prenatal cleft lip produced infundibular follicular cyst (9/17). The skin and mucosal epithelia from the postnatal cleft lip and palate (10/25) showed severe basal hyperplasia (11/25) and melanocyte infiltration (7/25). Results: The immunostaining of MMP-3 and HSP-70 were strongly positive in the hyperplastic sebaceous glands and nearby atrophying muscle bundles of the fissured tissue, while MMP-9, MMP-10, and cathepsin G were almost negative. The immunoreactions of the other antibodies used in this study were similar between in the fissured tissues and in the normal controls. Conclusions: These data suggest that the over-expression of MMP-3 is closely related to the sebaceous gland hyperplasia, epithelial dysplasia, and the muscle degeneration, and that the over-expression of MMP-3 in the fissured tissue may continuously aggravate the cleft condition in the later life.
우리 나라에 서식하는 뱀목 중 뱀과의 유혈목이, 능구렁이 및 무자치와 살모사과의 살모사, 까치살모사 및 쇠살모사를 재료로 하여 그 위장관에 출현하는 장내분비세포들 중 bombesin, CCK-8, gastrin, glucagon, insulin, PP, serotonin, somatostatin, substance P 및 VIP 등 10종류의 세포를 면역세포화학적 방법으로 염색한 후 광학현미경하에서 세포의 분포, 출현빈도, 모양 및 특징 등을 관찰하였던 바 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. 능구렁이, 유혈목이, 무자치, 까치살모사 및 쇠살모사의 위장관 점막상피에서는 CCK-8, gastrin, PP 및 serotonin 등 4종류의 분비세포가 관찰되었으며 동물의 종 및 위장관 각 부위별에 따라 내분비세포의 다과의 차이는 다소 있었다. 2. 살모사의 위장관 점막상피에서는 CCK-8, gastrin 및 serotonin 등 3종류의 분비세포가 관찰되었다. CCK-8, gastrin 및 serotonin 세포는 위장관 전반에 걸쳐 관찰되었으며 gastrin세포는 유문부와 소장 점막에 출현하였으며 각 부위에 따른 수의 차이가 있음을 알게 되었다. 3. 위장관 점막상피에서 관찰된 장내분비세포들의 모양은 위에서는 추체형 및 난원형을 띠었고 폐쇄형이었으며 소장 및 대장 전부에서는 주로 방추형을 띤 개구형이었으나 소수는 폐쇄형도 있었다. 대장 후부 및 직장에서는 난원형의 폐쇄형이었다. 4. 본 실험에서 사용된 10종류의 항혈청 중에서 bombesin, glucagon, insulin, somatostatin, subsatance P 및 vasoactive intestinal polypeptide 항체 등에 양성반응을 보인 장내분비세포들은 관찰되지 않았다.
Purpose : This study was carried out to investigate the effects of Gamigwichulpajing-Tang(GGT) on the development of experimentally-induced endometriosis in rats. Materials and Methods : Endometriosis was induced in rats by auotransplanting uterine tissue to the peritoneum and devided them into three groups: (1) sham-operated group(n=8), (2) surgically induced endometriosis and untreated control group(n=8), (3)surgically induced endometriosis and GGT treated group. GGT(700mg/head) was orally administrated for 15days after operation. Then we measured the body weight, the volumes of endometriotic implants, the weight of uterus and ovary, and investigated the content of cytokines(MCP-1, $TNF-{\alpha}$, $IL-l{\beta}$) in serum and ascites. Histopathology, immunohistochemistry for COX-2, and histochemistry for mast cell in transplanted uterine tissue were performed. Results :- The $volume(mm^3)$ of endometriotic implants in GGT-treated group$(53.50\;{\pm}18.63)$ was significantly decreased(p<<0.01) compared with control group$(404.50{\pm}317.68)$. - The content(pg/ml) of MCP-1 in ascites in GGT-treated group$(4265{\pm}108)$ was significantly decreased(p<<0.001) compared with control group$(8632{\pm}1245)$. - The content(pg/ml) of $TNF-{\alpha}$ in serum in GGT-treated group$(64.5{\pm}21.6)$ was significantly decreased(p<<0.05) compared with control group$(147.1{\pm}78.2)$. - The content(pg/ml)- of $TNF-{\alpha}$ in ascites in GGT-treated group$(738.3{\pm}502.4)$ was significantly decreased(p<<0.05) compared with control group$(1245.2{\pm}362.2)$. - The percentage(%) of positive epithelial layers for COX-2 in GGT-treated group$(22.9{\pm}9.3)$ was significantly decreased(p<<0.001) compared with control group$(50.2{\pm}8.2)$. - The number of mast cells in adjacent tissue of transplanted uterine tissue in GGT-treated group$(61.4{\pm}13.9)$ was significantly decreased(p<<0.001) compared with control group$(109.3{\pm}30.2)$. - The number of mast cells in stroma of transplanted uterine tissue in GGT-treated group$(9.4{\pm}2.7)$ was significantly decreased(p<<0.001) compared with control group$(26.0{\pm}7.7)$. - Histopathologically, proliferation of endomeuiotic epithelia and stroma, and infiltration of inflammatory cells in transplanted uterine tissue of GGT-treated group were weakly observed than those of control group. Conclusion :On the basis of these results, we concluded that Gamigwichulpajing-Tang have inhibiting effects on the development of transplanted uterine tissue. And these effects may be related with decreased Production of MCP-1 and $TNF-{\alpha}$, decreased expression of COX-2, and decreased infiltration of mast cells by administration of Gamigwichulpajing-Tang.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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