• 제목/요약/키워드: enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA)

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보르나병 바이러스 항체검출을 위한 연구 -세 가지 혈청진단법의 비교- (Detection of antibodies against infectious Borna disease virus -a comparison of three serological methods-)

  • 이두식
    • 대한수의학회지
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    • 제32권1호
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    • pp.57-61
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    • 1992
  • Borna disease(BD) virus 특이항체검출에 대한 세 가지 혈청진단법(간접형광항체법, 세포효소면역반응법, 혈청중화시험)의 정확도를 비교하기 위해 BD virus를 실험적으로 감염시킨 273수의 토끼의 혈청으로 시험하였다. 혈청중 간접형광항체법에 의하여 판정된 123혈청들은 모두 세포효소면역반응법에 의해서 양성으로 판정되었으나 혈청중화시험법에 의해서는 단지 27혈청에서만 양성으로 판정되었다. 혈청중화시험법은 간접형광항체법과 세포효소면역반응법에 비하여 민감도가 훨씬 낮게 나타나 BD virus의 혈청학적 연구에는 간접형광항체법 및 세포효소면역반응법의 활용도가 높을 것으로 생각된다.

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Indirect enzyme linked immunosorbent assay for the diagnosis of brucellosis in cattle

  • Rahman, Siddiqur;Huque, Fazlul;Ahasan, Shamim;Song, Hee-Jong
    • 한국동물위생학회지
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    • 제33권2호
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    • pp.113-119
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    • 2010
  • Brucellosis is a major zoonosis caused by Gram negative facultative intracellular bacterial organisms of the genus Brucella that are pathogenic for a wide variety of animals and human beings. Because of its economic impact on animal health and the risk to the human population,most countries have a brucellosis control program. Brucellosis is also an economically important andprevalent disease in Bangladesh. The accurate and prompt diagnosis is very important in controlling and eradicating of the disease in animals. The present study was undertaken to determine the seroprevalence of brucellosis in cattle in Mymensingh and Patuakhali district of Bangladesh. A total of 120 serum samples were collected from the two districts along with a questionnaire related to the epidemiology of the disease. The sampleswere screened by using slow agglutination test and conformed by indirect enzyme linked immunosorbent assay. The overall seroprevalence of brucellosis in cattle was 5% and it was observed that, a higher prevalence of Brucella was found in female than male, through natural breeding than artificial insemination (AI) and animal above 4 years old are highly susceptible than younger ones. Higher prevalence was found in aborted animals in comparison with non aborted animal. Finally, the study revealed that the female animal has more susceptible to brucellosis and healthy semen should be used for AI.

Detection of Aspergillus and Penicillium genera by Enzyme-Linked Immunosorbent Assay Using a Monoclonal Antibody

  • Kwak, Bo-Yeon;Shon, Dong-Hwa;Kwon, Byung-Joon;Kweon, Chang-Hee;Lee, Ke-Ho
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제11권1호
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    • pp.21-28
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    • 2001
  • Enzyme linked-immunosorbent assay (ELISA) for a rapid detection of fungi, Aspergillus and Penicillium genera in food, were developed and their efficiencies were approved by detecting artificially contaminated agricultural commodities. Mice were immunized with partially purified Aspergillus flavus extracellualr polysaccharide (EPS) and lymph node cells of the mice were fused with the myeloma cells for production of monoclonal antibodies. Mab 1G11, one of the antibodies, was selected and purified. A sandwich ELISA was established and its detection limit toward A. flavus EPS was 1mg/ml. Among the 59 strains tested (including 18 species of Aspergillus, 16 of Penicillium, 11 of Fusarium, 1 of Absidia, 2 of Alternaria, 2 of Candida, 2 of Cladosporium, 2 of Geotrichum, 2 of Mucor, 2 of Rhizopus, 1 of Trichoderma), species of Aspergillus and penicillium had a high reactivity with Mab 1G11 even up to 10,000 times dilution of culture broths. The other genera except Cladosporium resinae showed no reactivity, thus Mab 1G11 was specific to the genera of Aspergillus and Penicillium. The epitope of A. flavus EPS against monoclonal Mab 1G11 was on the carbohydrate moiety when 1 to 100$\mu g/g$ A. flavus EPS were put into rice, potato, and mandarin orange, the average recoveries detected by sandwich ELIA were 123, 59, and 76%, respectively. Correlation was found to be linear between the EPS, and mycelium of A. flavus and Penicillium citrinum grown in a liquid medium (r=0.87 and 0.96), and also between the EPS and colony forming unit in solid media of rice of potato (r=0.91-0.99).

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효소, Trifluoromethanesulfonic Acid, 열, 및 NaOH 처리에 의한 계란 난백의 항원성 변화 (Changes in the Antigenicity of Chicken Egg White by the Treatments of Protease, Trifluoromethanesulfonic Acid, Heat, and NaOH)

  • 류주현;이종미;손동화
    • 한국식품과학회지
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    • 제32권3호
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    • pp.720-725
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    • 2000
  • 여러 가지 처리가 난백의 항원성을 감소시키는데 미치는 영향을 조사하기 위하여, 토끼 항난백항체로 난백 처리물들의 간접 경합 ELISA(ciELISA)를 실시하였다. 식물성, 동물성, 미생물성의 9가지 효소를 이용한 가수분해처리는 난백의 항원성에 영향을 주지 못했다. 보다 효율적인 효소 가수분해를 위해 방사선 조사 후, 효소처리를 실시했는데, 이것 역시 항원성을 감소시키지 못했다. Trifluoromethanesulfonic acid 처리는 난백의 항원성을 거의 제거시키는 것으로 나타났다. 열처리는 $121^{\circ}C$ 고온처리의 경우에서만 반응성이 1/10,000이하로 감소하여 항원성이 거의 사라졌다. NaOH 단독 처리는 0.3%(w/v) 이상의 농도에서 반응성이 감소되기 시작하여, 1%(w/v) 이상에서는 반응성이 1/10,000이하로 감소하였다. NaOH 처리에 $70^{\circ}C$, 15분간의 열처리를 더해 주면, NaOH 단독 처리시보다 효과적으로 항원성이 감소되는 것으로 나타났다.

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Detection of immunity in sheep following anti-rabies vaccination

  • Hasanthi Rathnadiwakara;Mangala Gunatilake;Florence Cliquet;Marine Wasniewski;Mayuri Thammitiyagodage;Ramani Karunakaran;Jean-Christophe Thibault;Mohamed Ijas
    • Clinical and Experimental Vaccine Research
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    • 제12권2호
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    • pp.97-106
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    • 2023
  • Purpose: Rabies is a fatal but preventable disease with proper pre-exposure anti-rabies vaccination (ARV). Dogs, as household pets and strays, are the reservoir and vector of the disease, and dog bites have been associated with human rabies cases in Sri Lanka over the past few years. However, other susceptible species having frequent contact with humans may be a source of infection. One such species is sheep and immunity following ARV has never been tested in sheep reared in Sri Lanka. Materials and Methods: We have tested serum samples from sheep reared in the Animal Centre, Medical Research Institute of Sri Lanka for the presence of anti-rabies antibodies following ARV. Sheep serum samples were tested with Bio-Pro Rabies enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) antibody kits used for the first time in Sri Lanka and our results were verified by a seroneutralization method on cells (fluorescent antibody virus neutralization, FAVN test) currently recommended by World Organization for Animal Health and World Health Organization. Results: Sheep received annual ARV and maintained high neutralizing antibody titers in their serum. No maternal antibodies were detected in lamb around 6 months of age. Agreement between the ELISA and FAVN test, i.e., coefficient concordance was 83.87%. Conclusion: Annual vaccination in sheep has an effect on maintaining adequate protection against rabies by measurements of anti-rabies antibody response. Lambs need to be vaccinated earlier than 6 months of age to achieve protective levels of neutralizing antibodies in their serum. Introducing this ELISA in Sri Lanka will be a good opportunity to determine the level of anti-rabies antibodies in animal serum samples.

어류 Metallothionein에 대한 특이적 면역 효소 측정법의 확립에 관한 연구 (The Study on the Establishment of Specific ELISA for the Detection of Fish Metallothionein)

  • 황갑수
    • Environmental Analysis Health and Toxicology
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    • 제11권1_2호
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    • pp.11-17
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    • 1996
  • The purpose of this experiment is to estabilish the sensitive and specific ELISA (enzyme linked immunosorbent assay) system for the detection of fish metallothionein (MT). Silver carp were injected with CA of 1-8mg/kg body wt. 4 times during 10 days. Silver carp was very tolerant species to CA. Cd induced MT in liver was seperated and purified by gel filtration chromatography and ion exchange chromatography and identified by spectrophotometry, native gel electrophoresis and western blot analysis. The rabbit antiserum was produced by immunizing rabbit with lyophilized MT, and the competitive ELISA system was estabilished for the detection of fish MT. In the present ELISA system, the detection limit was about 33 ng/ml. When this ELISA system was employed to determine the MT level in the supernatant sample of fish liver homogenate, the reaction curve showed a good parallel corelationship with the calibration curve over a certain dilution range. The results indicate that the competitive ELISA can be a useful tool for the detection of fish MT in the toxicological study and the evaluation of water pollution.

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가금인플루엔자 바이러스 항체검출을 위한 혈청학적 진단법 비교 (Comparison of serological methods for detection of avian influenza virus antibodies)

  • 한명국;박경윤;권용국;김재홍
    • 대한수의학회지
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    • 제42권1호
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    • pp.73-80
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    • 2002
  • An enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) using purified hemagglutinin of swine influenza virus (H1N1) as antigen was developed for detection of antibody to avian influenza virus (AIV). The sensitivity and specificity of a developed and commercial available ELISA kits were compared with those of agar gel precipitation (AGP) test and hemagglutination inhibition (HI) test using sera collected from chickens under condition of field exposure. The concentration of antigen, serum dilution and concentration of enzyme-conjugated secondary antibody in developed ELISA (S-ELISA) were 0.5ug/100ul, 1:200 and 0.03ug/100ul, respectively. The correlation coefficients between S-ELISA and commercial ELISA and HI titers were 0.419 and 0.533, respectively. A significant correlation (p < 0.01) was not found between HI and ELISA titers. The S-ELISA was found to be as more sensitive and specific than the AGP test, showing 86.8% sensitivity and 85.3% specificity. It is suggested that the ELISA using the SIV as antigen may be useful method as an investigating tool for AIV serological surveillance.

간접 Latex 응집반응과 ELISA에 의한 중추신경계 질환 환자의 혈청 및 뇌척수액에서 Toxoplasmu gondii에 대한 항체 검출 (Detection of Antibodies in Serum and Cerebrospinal Fluid to Tonoplasma gondii by Indirect Latex Agglutination Test and Enzyme-Linked Immunosorbent Assay)

  • 최원영;남호우
    • Parasites, Hosts and Diseases
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    • 제30권2호
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    • pp.83-90
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    • 1992
  • Toxoplasma증의 혈청학적 진단에 있어서 민감도를 증가시키기 위해 간접 latex 응집반응의 결과와 비교하면서 ELISA를 개발하였으며, 뇌척수액의 검사 시료로서의 가능성을 검토하였다. 아울러 중추신경계 질환환자로부 터기생충질환을 감별하기 위하여 1986년부터 1991년까지 전국 카 병원에서 채취한 혈청과 뇌척수액에 대하여 간접 latex 응집반응(ILA)과 ELISA를 실시하여 Toxoplasma 항체 보유 양상을 비교 검토하였다. 전체 2,016 건의 혈청에 대해 ILA를 실시하여 76건(3.8%)의 양성 (1:32이상의 titer)을 얻었다. 그러나 양성 혈청환자에서 채취한 뇌척수액에서는 낮은 titer의 반응은 있었으나 양성은 나타나지 않았다. 이들 양성 혈청의 양성 혈청 및 음성 혈청에 대하여 ELISA로 항체검사를 실시한바 ILA의 titer가 1 : 32인 군에서 통계적으로 유의한 차이를 나타내는 항체값을 얻었으며, 그 흡반도는 0.40이었다. 뇌척수액에 대한 ELISA로는 ILA의 1 : 64 titer군에서 통계 적으로 유의한 차이가 나타났고 그때의 흡광도 0.27을 양성 판단의 기준으로 사용하였다. ELISA에 의한 항체 검사상 전체 혈청에서 7.0%의 양성을 검출하여 ILA보다 약 2배 정도의 높은 민감도를 보였으며, 뇌척수액에서 는 5.6%의 양성률을 보여 ELISA는 뇌척수액에서의 항체 검출시 유용한 방법이라고 판단하였다. ILA에 비하여 ELISA는 약 2배 정도 높은 양성률을 내었고 양성률은 나이에 마라 40대 이후 급격한 증가를 보였으며, 여성보 다는 남성에서 약 2배 정도 양성률이 높게 나타났다. ELISA에 의한 뇌척수액의 항체 검사에서는 양성률의 성별 차이를 나타내지 않았다. 이상의 결과로 판단할 때, ELISA가 ILA보다 Toxoplasma 항체 검출의 민감도가 높았으며, 뇌척수액은 ELISA의 좋은 검사시료가 되며, 특히 중추신경계 Tocxoplnsma증의 진단에 있어 뇌척수액에 대한 항체 검사에서 ELISA가 유용하다고 판단하였다.

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소양호에서 남조류 독소, 마이크로시틴의 정량 분석 (Quantitative Analysis of Microcystins, Cyanobacterial Toxins in Soyang Lake)

  • 이정애;이소영;표동진
    • 대한화학회지
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    • 제46권6호
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    • pp.535-540
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    • 2002
  • 남조류 독소인 마이크로시틴은 호수에서 매우 미량 존재하기 때문에 이를 정확히 정량 분석하기가 쉽지 않다. 본 연구에서는 소양호에서 채취한 물시료 중에 포함된 남조류 독소, 마이크로시틴을 정량 분석하기 위하여 두 가지 서로 다른 정량 분석법을 시도하였으며 이 둘의 정량 결과를 비교${\cdot}$분석 하였다. 첫째는 고체상 추출과 HPLC(High Performance Liquid Chromatography)를 이용한 분석법을 이용하였으며 둘째는 마이크로시틴의 단일클론항체를 이용한 효소면역흡착분석법(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)을 이용하였다.

식품 내 바이오제닉아민 신속검출기술 개발 동향 (Rapid Detection Methods for Biogenic Amines in Foods)

  • 이재익;김영완
    • 한국식품과학회지
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    • 제44권2호
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    • pp.141-147
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    • 2012
  • BA은 치즈, 와인, 젓갈, 소시지, 된장 등 미생물에 의한 발효과정을 거치는 식품뿐만 아니라 채소류, 과일, 육류와 같은 비발효 식품군에서도 발견된다. 식품 내 BA 오염에 대한 관리를 목적으로 제조공정 및 유통과정에서 신속하게 다량의 시료를 분석하고 제품에 대한 항시 모니터링 기술이 요구된다. 이를 위해 BA 특이항체 및 BA 분해효소를 이용하는 BA 검출 및 센싱 기술이 개발되고 있다. HisN 특이 항체를 이용한 ELISA 키트는 상용화 되었으며 다양한 식품에 적용되고 있다. 산화적 탈아미노반응을 촉매하는 아민산화효소는 항체기반의 ELISA 방식에 비해 다양한 BA 분석에 사용되고 있으며, 효소반응에 의해 생성되는 $H_2O_2$의 산화환원반응에 의해 발생하는 전류를 측정함으로써 BA의 함량을 정량할 수 있는 전류측정식 바이오센서 개발에 적용되고 있다. BA 신속검출을 위한 바이오센서의 개발 연구 동향에 발맞추어 국내 전통발효식품에 적합한 기술개발이 요구되며, 산업현장 적용 연구를 거쳐 국내 전통발효식품의 안전성을 확보해야 할 것으로 판단된다.