유백피의 천연항산화제로서의 이용성을 검토하기 위하여 각종 용매로 유백피 추출물을 제조하여 lard emulsion에 첨가하여 6$0^{\circ}C$에서 저장하면서 항산화 활성을 비교하고 항산화 활성이 우수한 추출물을 용매별로 분획하여 항산화 활성, 분획물의 첨가농도의 결정 및 기질특이성을 측정하였다. 또한 생체내에서도 분획물의 항산화 효과를 살펴보기 위하여 흰쥐 간 micmsome 을 사용하여 유도된 지질 과산화 반응에 대한 억제 효과를 측정하였다. 유백피의 추출물은 물추출물에서 가장 강력한 항산화 활성을 나타내었다. 물추출물의 용매분획별 항산화 활성은 ethyl acetate 분획에서 가장 높았으며 ethyl acetate 분획물 0.05%(w/w) 첨가는 합성 항산화제인 BHA(0.01%, w/w)와 비슷한 항산화 활성이었다. Ethyl acetate 분획물 0.05%(w/w)는 돈지, 대두유, 팜유 및 옥수수유에서도 항산화 활성을 나타내었다. 간 microsome 분획을 이용한 지질 과산화 억제 효과는 비효소적 지질 과산화 검정계인 Fe$^{++}$ascorbate system과 효소적 지질 과산화 검정계인 Fe$^{++}$-ADP/NADPH system 모두에서 ethyl acetate 분획물 첨가가 caffeic acid보다 강한 억제율을 보였다.
The purpose of this study was to determine the optimum extraction method suitable for the availability of biological activities in unripe apples known to be rich in functional components. Unripe apples 'Hongro' picked on May 28th, 2019 were extracted by various extraction methods (hot water, ethanol, enzymatic pre-treatment, ultrasonic wave, and subcritical water) and their extracts were investigated yield, effective component contents, and antioxidant activities. Overall, the yields by the extraction solvent were higher in water than in organic solvent(ethanol) because water-soluble compounds were eluted from a polar solvent. Total phenol contents of the ultrasonic wave (ethanol) extracts were significantly higher in 6 times than hot water extract. Contents of flavonoid were highest in the ethanol extract at 29.14 mg QE/g. Contents of tannin and ursolic acid were also significantly higher in the ultrasonic wave (ethanol) extract. The DPPH radical and ABTS radical scavenging activities were the strongest in the ultrasonic wave (ethanol) extract. Correlation between effective components and antioxidant activities was high in the total phenol content with ABTS and the ursolic acid content with DPPH (p<0.01). The above results suggested that ultrasonic wave (ethanol) extract of unripe apples has the potential to act as a functional material.
쌀단백질을 이용한 고부가가치 천연 조미소재를 개발하기 위하여 쌀단백질을 프로테아제로 효소분해한 배지에서 Saccharomyces cerevisiae를 배양하여 제조한 효모 추출물(Yx)에, 효소분해 후 남은 쌀단백질 잔사를 Bacillus licheniformis 혹은 Bacillus subtilis로 발효하여 얻은 발효물(Rfl, Rfs)을 각각 첨가하였다. 쌀단백질 잔사의 발효물이 첨가된 효모추출물(YxRfl, YxRfs)의 전체적 선호도는 첨가전의 효모추출물(Yx)에 비하여 높았으며, 특히 쌀단백질 발효물의 보충에 의해서 감칠맛과 같은 풍미가 증가함을 미각센서 분석 및 관능검사에 의해서 확인할 수 있었다. 쌀단백질 잔사발효물에 의한 감칠맛의 상승은 감칠맛을 내는 아미노산 이 외에도 쌀단백질의 발효에 따라 유리된 다양한 펩타이드 분획의 영향이 있었을 것으로 예상된다. 이와 같이 감칠맛 아미노산 및 펩타이드가 함유된 쌀단백질 발효물이 보충된 효모추출물은 감칠맛과 풍미의 상승작용으로 전체적인 기호도가 높아짐에 따라 고부가가치 천연조미소재의 제조에 응용될 수 있을 것으로 기대되었다.
The intake of probiotic lactic acid bacteria not only promotes digestion through the microbiome regulated host intestinal metabolism but also improves diseases such as irritable bowel syndrome and inflammatory bowel disease, and suppresses pathogenic harmful bacteria. This investigation aimed to evaluate the immunomodulatory effects in intestinal epithelial cells and to study the clinical efficacy of the selected the Bifidobacterium breve and Bifidobacterium longum groups. The physiological and biochemical properties were characterized, and immunomodulatory activity was measured against pathogenic bacteria. In order to find out the mechanism of inflammatory action of the eight viable and sonicated Bifidobacterium spp., we tried to confirm the changes in the pro-inflammatory cytokines (TNF-α, interleukin (IL)-6, IL-12) and anti-inflammatory cytokine (IL-10), and chemokines, (monocyte chemoattractant protein-1, IL-8) and inflammatory enzymatic mediator (nitric oxide) against Enterococcus faecalis ATCC 29212 infection in Caco-2 cells and RAW 264.7 cells. The clinical efficacy of the selected B. breve and B. longum group was studied as a probiotic adjuvant for acute diarrhea in children by oral administration. The results showed significant immunomodulatory effects on the expression levels of TNF-α, IL-6, IL-12, MCP-1, IL-8 and NO, in sonicated Bifidobacterium extracts and viable bifidobacteria. Moreover, each of the Bifidobacterium strains was found to react more specifically to different cytokines. However, treatment with sonicated Bifidobacterium extracts showed a more significant effect compared to treatment with the viable bacteria. We suggest that probiotics functions should be subdivided according to individual characteristics, and that personalized probiotics should be designed to address individual applications.
치커리 추출액으로부터 올리고당을 생산하기 위하여 산과 효소에 의한 가수분해를 실시하였다. 이온교환수지를 통과한 당용액을 가수분해 시킨 결과 중합도 $3{\sim}5$인 올리고당의 함량은 $55^{\circ}C$에서는 가수분해 12분에, $65^{\circ}C$에서는 6분에 총당의 26%내외에 도달한 후 30분까지 거의 변하지 않았다. 30분 처리로 fructose, glucose 및 sucrose는 $55^{\circ}C$에서는 총당의 24.6%을 $65^{\circ}C$에서는 50.3%로 증가하고, 중합도 6 이상의 당은 총당의 49.5%, 23.0%로 각각 감소하여 산가수분해는 당중합도에 비선택적인 것으로 나타나 올리고당 생산방법으로는 부적합하였다. Athrobactor sp. S37의 정제 endo-inulinase를 사용하여 치커리 추출액을 $40^{\circ}C$에서 가수분해한 결과 18시간 가수분해물의 당조성은 inulobiose(F2)를 포함한 중합도 $3{\sim}5$의 올리고당이 총당의 66.1%, 중합도 6 이상이 23.0%, fructose, glucose 및 sucrose가 10.9%이었다. 가수분해전 fructose, glucose 및 sucrose 함량이 9.6%인 것을 감안하면 본 효소에 의한 가수분해는 고중합도의 당이 올리고당으로 선택적으로 전환되는 것으로 나타났다. 가수분해에 사용되는 조효소와 정제효소의 차이를 알아보기 위하여 중합도 $1{\sim}2$의 당들을 제거한 치커리당액을 각각 두 효소로 가수분해하였다. 정제 효소로 가수분해한 것과는 달리 조효소에 의한 18시간과 44시간 가수분해물에서는 fructose, F2 및 GF2가 검출되었으며 또한 F4의 생성이 가수분해 초기($2{\sim}8$시간)에서 훨씬 빨랐다. 두 효소의 44시간 가수분해물은 총당의 72%가 올리고당이었으며 올리고당의 주요 구성당은 F2, F3, F4의 inulo올리고당으로 총당의 $51.3{\sim}64.35$를 차지하였다. 따라서 endo-inulinase에 의한 가수분해는 효과적인 올리고당 생산방법으로 판단된다.
Park, Hyun-Sun;Lee, Jue-Yeon;Cho, Sun-Hye;Baek, Hyon-Jin;Lee, Seung-Jin
Archives of Pharmacal Research
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제25권6호
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pp.964-968
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2002
Colon drug delivery is advantageous in the treatment of colonic disease and oral delivery of drugs unstable or suceptible to enzymatic degradation in upper GI tract. In this study, multilayer coated system that is resistant to gastric and small intestinal conditions but can be easily degraded by colonic bacterial enzymes was designed to achieve effective colon delivery of prednisolone. Variously coated tablets containing prednisolone were fabricated using chitosan and cellulose acetate phthalate (CAP) as coating materials. Release aspects of prednisolone in simulated gastrointestinal fluid and rat colonic extracts (CERM) were investigated. Also, colonic bacterial degradation study of chitosan was performed in CERM. From these results, a three layer (CAP/Chitosan/CAP) coated system exhibited gastric and small intestinal resistance to the release of prednisolone in vitro most effectively. The rapid increase of prednisolone in CERM was revealed as due to the degradation of the chitosan membrane by bacterial enzymes. The designed system could be used potentially used as a carrier for colon delivery of prednisolone by regulating drug release in stomach and the small intestine.
High Temperature-cooking conditions of cultured fishes(loach, crucian carp, bastard halibut, and jacopever) were optimized by response surface methodology(RSM), and plastein products were prepared using enzymatic hydrolysis. Four models were proposed with regard to effects of time(t), temperature(T), and water/fish meat (w/f) ratio on the amount of 0.3M TCA soluble fractions. The model coefficients were ranged from p<0.0001 for jacopever to p<0.0433 for bastared halibut. Cooking conditions for 60% hydrolysis were optimized at 1) 14$0^{\circ}C$ except for crucian carp(136$^{\circ}C$); 2) 10.08 hours(loach), 7.25 hours(crucian carp), 9.85 hours(ba-stard harlibut), and 9.37 hours(iacopever); 3) 1:1(w/f) ratio except for the crucian carp(1.1:1). When protein hydrolyzates were employed for the plastein synthesis, optimum plastein-reaction conditions were determined to be pH 9.0 with chymotrypsin for the loach and crucian carp hydrolyzates, pH 9.0 with papain for the bastard halibut hydrolyzate, and pH 11.0 with trypsin for the jacopever hydrolyzate. Plastein reaction could be performed in water at concentration up to 20%(w/f).
The saccharomyces cerevisiae Rad27, a structure-specific endonuclease for the okazaski fragment maturation has been known to interact genetically and biochemically with Dna2, an essential enzyme for DNA replication. In an attempt to define the significance of the interaction between the two enzymes, we expressed and purified both Dna2 and Rad27 proteins. In this report, Rad27 could not form a complex with Dna2 in the three different analyses. The analyses included glycerol gradient sedimentation, protein-column chromatography, and coinfection of baculoviruses followed by affinity purification. This is in striking contrast to the previous results that used crude extracts. These results suggest that the interaction between the two proteins is not sufficiently stable or indirect, and thus requires an additional protein(s) in order for Rad27 and Dna2 to form a stable physical complex. This result is consistent with our genetic findings that Schizosaccharomyces pombe Dna2 is capable of interacting with several proteins that include two subunits of polymerase $\delta$, DNA ligase I, as well as Fen-1. In addition, we found that the N-terminal modification of Rad27 abolished its enzymatic activity. Thus, as suspected, we found that on the basis of the structure determination, N-terminal methionine indeed plays an important role in the nucleolytic cleavage reaction.
Velvet antler (VA) is a historically traditional medicinal supplement and is well known in Asian countries for its pharmaceutical and health benefits. The objectives for this study were to optimize the hot water extraction (HWE) of VA for the Korean VA industry, and to determine the most effective pretreatment method among microwave (MW), ultrasonication (US), and enzymatic (EZ) techniques. Using response surface methodology, optimum extraction temperatures and times were determined by central composite design configuration based on extraction yield and sialic acid content. Various quality parameters of VA extract including yield, soluble solid, protein, and sialic acid contents were also compared with the conjunction of HWE and pretreatment. The yield and sialic acid content of VA extract were determined to be 40% and 0.73 mg/g, respectively, under an optimum temperature of 100℃ at 24 h of extraction time. The yields from VA extracts pretreated with MW, US, and EZ were 17.42%, 19.73%, and 29.15%, respectively. Among the tested commercial enzymes, pepsin was the most effective proteolytic enzyme and led to the highest yield (47.65%), soluble solids (4.03 °brix), protein (1.12 mg/ml), and sialic acid (3.04 mg/ml) contents from VA extract.
Trigonopsis variabilis는 버l타락탐 항생제인 cephalosporin C (ceph C)를 ${\alpha}$-keto-adipyl-7 a aminocephalosporanic acid(AKA-7 ACA)로 생변 환하는 강력한 D-amino acid oxidase 효소를 갖고 있다. 본 연구는 이 D-AAO 효소의 유전자를 추출하기 위하여 polymerase chain reaction (PCR)을 사용하였다. PCR 단편을 콜로닝하기 위하여 Taq D DNA polymerase, Klenow, T4 DNA polymerase I, Alkaline phosphatase Calf Intestinal와 T4 kinase 의 효소반응을 이용하여 4가지의 방법을 샤용한 결 과, blunt - end 의 PCR fragment 를 phosphoryl lation하고 blunt -end의 pUC18 plasmid를 dephos phorylation 한 후 ligation 한 것 이 가장 좋은 클로 닝 효율을 보였다. Ceph C에 대한 D-AAO 효소의 활성은 재조합 E. coli의 세포추출액과 permea bilized cells에서 모두 확인할 수 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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