Galactomyces geotrichum MTCC 1360 degraded the Scarlet RR(100 mg/l) dye within 18 h, under shaking conditions(150 rpm) in malt yeast medium. The optimum pH and the temperature for decolorization were pH 12 and $50^{\circ}C$, respectively. Enzymatic studies revealed an induction of the enzymes, including flavin reductase during the initial stage and lignin peroxidase after complete decolorization of the dye. Decolorization of the dye was induced by the addition of $CaCO_3$ to the medium. EDTA had an inhibitory effect on the dye decolorization along with the laccase activity. The metabolites formed after complete decolorization were analyzed by UV-VIS, HPLC, and FTIR. The GC/MS identification of 3 H quinazolin-4-one, 2-ethylamino-acetamide, 1-chloro-4-nitro-benzene, N-(4-chloro-phenyl)-hydroxylamine, and 4-chloro-pheny-lamine as the final metabolites corroborated with the degradation of Scarlet RR. The phytotoxicity study revealed the nontoxic nature of the final metabolites. A possible degradation pathway is suggested to understand the mechanism used by G. geotrichum and thereby aiding development of technologies for the application of this organism to the cleaning-up of aquatic and terrestrial environments.
Siuda, Waldemar;Kiersztyn, Bartosz;Chrost, Ryszard J.
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제17권6호
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pp.897-904
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2007
The aim of this paper is to discuss the methodology of our investigation of the dynamics of protein degradation and the total in situ protealytic activity in meso/eutrophic, eutrophic, and hypereutrophic freshwater environments. Analysis of the kinetics and rates of enzymatic release of amino acids in water samples preserved with sodium azide allows determination of the concentrations of labile proteins $(C_{LAB})$, and their half-life time $(T_{1/2})$. Moreover, it gives more realistic information on resultant activity in situ $(V_{T1/2})$ of ecto- and extracellular proteases that are responsible for the biological degradation of these compounds. Although the results provided by the proposed method are general y well correlated with those obtained by classical procedures, they better characterize the dynamics of protein degradation processes, especially in eutrophic or hypereutrophic lakes. In these environments, processes of protein decomposition occur mainly on the particles and depend primarily on a metabolic activity of seston-attached bacteria. The method was tested in three lakes. The different degree of eutrophication of these lakes was clearly demonstrated by the measured real proteolytic pattern and confirmed by conventional trophic state determinants.
Notch signaling plays a pivotal role in cell fate determination, cellular development, cellular self-renewal, tumor progression, and has been linked to developmental disorders and carcinogenesis. Notch1 is activated through interactions with the ligands of neighboring cells, and acts as a transcriptional activator in the nucleus. The Notch1 intracellular domain (Notch1-IC) regulates the expression of target genes related to tumor development and progression. The Notch1 protein undergoes modification after translation by posttranslational modification enzymes. Phosphorylation modification is critical for enzymatic activation, complex formation, degradation, and subcellular localization. According to the nuclear cycle, Notch1-IC is degraded by E3 ligase, FBW7 in the nucleus via phosphorylation-dependent degradation. Here, we summarize the Notch signaling pathway, and resolve to understand the role of phosphorylation in the regulation of Notch signaling as well as to understand its relation to cancer. [BMB Reports 2015; 48(8): 431-437]
As the biodegradation of wood constituents has been understood as a multi-basidiomycetes and enzymatic processes, this review will focus on the roles of low molecular compounds and radicals working in harmony with fungal enzymes. Wood rotting basidiomycete fungi penetrate wood, and lead to more easily metabolize carbohydrates of the wood complex. The white-rot fungi, having versatile enzymes, are able to attack directly the "lignin barrier". They also use a multi-enzyme system including so-called "feedback" type enzymes allowing for simultaneous degradation of lignin and carbohydrates. The multi-enzymes including laccase support the proposed route by explaining how the high molecular weight enzymes can function in the wood complex. These enzymes may function separately or cooperate each other. In addition, veratryl alcohol oxidase, cellobiose dehydrogenase, arylalcohol dehydrogenase, and particularly low molecular mediators and radicals have an important role in wood biodegradation. However, the possibility of other mechanism as well as other enzymes, as operating as feedback systems in the process of wood degradation, could not be excluded.
In this study, the reusability of the Fenton oxidation solution was evaluated to reduce the cost of the pretreatment process. Biomass was sequential subjected to Fenton oxidation-hydrothermal treatment and enzymatic hydrolysis to produce monosaccharides. The liquid solution recovered after Fenton oxidation contained OH radicals with a concentration of 0.11 mol/L. This liquid solution was reused for a new Fenton oxidation reaction. After Fenton oxidation, hydrothermal treatment was performed under the same conditions as before, and 9.34-13.63 g/L of xylose was detected. This concentration was slightly lower than that of a fresh Fenton oxidation solution (16.51 g/L) but was higher than that obtained by hydrothermal treatment without Fenton oxidation (2.72 g/L). The degradation rate during hydrothermal pretreatment involving Fenton oxidation was 36.02%, which decreased (29.24-31.05%) slightly when the liquid solution recovered after Fenton oxidation was reused. However, the degradation rate increased compared to that measured from hydrothermal treatment without Fenton oxidation (15.21%). Moreover, the yield after enzyme hydrolysis decreased in the following order: fresh Fenton oxidation-hydrothermal treatment (89.64%) > Fenton oxidation with reused solution-hydrothermal treatment (74.84%) > hydrothermal treatment without Fenton oxidation (32.05%).
Andrzej Leonowicz;Jolanta Luterek;Maria W.Wasilewska;Anna Matuszewska;M.Hofrichter;D.Ziegenhagen;Jerzy Rogalski;Cho, Nam-Seok
펄프종이기술
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제31권5호
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pp.1-11
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1999
Wood components, cellulose and lignin, are degraded simultaneously and the general outline for the complementary character of carbohydrates and lignin decomposition as well as the existence of enzymatic systems combining these processes is still valid. The degradatiion of free cellulose or hemicellulose into monosaccharides has long been known to be relatively simple, but the mechanism of lignin degradatiion wasn ot solved very clearly yet. Anyway the biodegradation of woold constituents is understood at present as an enzymatic process. Kigninolytic activity has been correlated with lignin and manganese peroxidases. At present the attention is paid to laccase. Laccase oxidizes lignin molecule to phenoxy radicals and quinones . This oxidation can lead to the cleavageo f C-C or C-O bonds in the lignin phenyl-propane subunits, resulting either in degradation of both side chains and aromatic rings, or in demethylation processes. The role of laccase lies in the "activation" of some low molecular weight mediators and radicals produced by fungal cultures. Such activated factors produced also in cooperation with other enzymes are probably exported to the wood environment where they work in degradation processes as the ' enzyme messengers." It is worth mentioning that only fungi possessing laccase show demethylating activity. Thus demethylation, the process important for ligninolysis, is probably caused exclusively by laccase. Under natural conditions laccase seems to work with other fungal enzymes , mediators and mediating radicals. It has shown the possibility of direct Bjrkman lignin depolymerization by cooperative activity of laccase and glucose oxidase.
The feasibility of skin penetration was studied for aspalatone (AM, acetylsalicylic acid maltol ester), a novel antithrombotic agent. In this studys hairless mouse dorsal skins were used as a model to select composition of vehicle and AM. Based on measurements of solubility and partition coefficient, the concentration of PC that showed the highest flux for AM across the hairless mouse skin was found to be 40%. The cumulative amount permeated at 48 h, however, appear inadequate, even when the PC concentration was employed. To identify a suitable absorption enhancer and its optimal concentration for AM, a number of absorption enhancers and a variety of concentration were screened for the increase in transdermal flux of AM. Amongst these, linoleic acid (LOA) at the concentration of 5% was found to have the largest enhancement factor (i.e., 132). However, a further increase in AM flux was not found in the fatty acid concentration greater than 5%, indicating the enhancement effect is in a bell-shaped currie. In a study of the effect of AM concentration on the permeation, there was no difference in the permeation rate between 0.5 and 1% for AM, below its saturated concentration. At the donor concentration of 2%, over the saturated condition, the flux of AM was markedly increased. A considerable degradation of AM was found during permeation studies, and the extent was correlated with protein concentrations in the epidermal and serosal extracts, and skin homogenates. In rat dorsal skins, the protein concentration decreased in the rank order of skin homogenate > serosal extract > epidermal extract. Estimated first order degradation rate constants were $6.15{\pm}0.14,{\;}0.57{\pm}0.02{\;}and{\;}0.011{\pm}{\;}0.004{\;}h^{-1}$ for skin homogenate, serosal extract and epidermal extract, respectively. Therefore, it appeared that AM was hydrolyzed to some extent into salicylmaltol by esterases in the dermal and subcutaneous tissues of skin. taken together, our data indicated that transdermal delivery of AM is feasible when the combination of PC and LOA is used as a vehicle. However, since AM is not metabolically stable, acceptable degradation inhibitors may be nervessary to fully realize the transdermal delivery of the drug.
The enzymatic isolation of residual lignins obtained from spruce and beech pulps (obtained by sulfite, kraft, ASAM and soda/AQ/MeOH pulping processes) and their characterization was described in previous publications. Here, the residual lignins have been submitted to potassium permanganate oxidation (KMnO4 degradation), and 9 aromatic carboxylic acids (3 of them are dimeric) were identified after methylation with diazomethane by GC/MS. The analytical challenge during qantification by the internal standard methods was the partly high protein content of the samples, which resulted in elevated anisic acid yields in the degradation mixture of sulfite residual lignins. The results are compared with the KMnO4 degradation of the corresponding MWLs and discussed in terms of S/G ratios and degrees of condensation. The latter was calculated as a quotient between the aromatic carboxylic acids derived from condensed and non-condensed lignin structures. Typical degradation patterns for the various processes have been observed. Among other parameter, the relative compositions between iso-hemipinic acid (which is for condensation in pos. 5 of the aromatic ring) and meta-hemipinic acid and 3,4,5-trimethoxyphthalic acid (both are for condensation in pos. 6 of the aromatic ring) was found to be process specific. Kraft and soda/AQ/MeOH residual lignins yielded higher amounts of iso-hemipinic acid. In contrast, the relative yields of meta-hemipinic acid and 3,4,5-trimethoxyphthalic acid (the latter in beech lignins) are higher in sulfite and particularly in ASAM residual lignin. In case of beech residual lignins the amount of acids originated from non-condensed syringyl type lignin units was surprisingly high. The condensation degree of residual lignins was shown to be generally higher than that of MWLs. This was especially true for the G units. ASAM residual lignin exhibited very high S/G ratios and degrees of polymerization. Causality between condensation degree and total yield of degradation products was demonstrated.
재조합 단백질 생산에서 문제가 되고 있는 번역 후 과정인 glycosylation 을 in vitro 상에서 수행하였다. 원핵생물 시스템에서 재조합 단백질을 생산하고, 이후 효소를 이용하여 올리고당을 붙여 원래의 당단백질과 유사한 단백질을 생산하는 것이 산업적으로 경쟁력을 가질 수 있으므로 이를 위하여 glucose oxidase와 fetuin을 모델 당단백질로, 가수분해 효소인 peptide-N-glycosidase F 의 역반응 활성을 이용하여 glycosylation 을 시도하였다. 역가수분해로의 평형 이동을 위하여 그 기질인 올리고당과 암모니아를 과량 첨가하고, 반응 온도를 높였다. Glucose oxidase의 경우에는 denaturation 했을 때 완전한 deglycosylation 이 일어났지만, fetuin의 경우에는 그렇지 못했다. Glucose oxidase 의 glycosylation 은 수용액상에서는 불가능 했지만 acetone 을 media로 사용하여 $50^{\circ}C$에서 4 시간동안 반응시켰을 때 SDS-PAGE 분석 결과 reglycosylation이 일어나 단백질 밴드가 위로 올라감을 관찰할 수 있었다.
Fish backbone, a major by-product in the fish processing industry, accounts for about 15% of whole fish weight. In this study, recovery of bioavailable calcium from Alaska pollack (Theragra chalcogramma) backbone by-products using enzymatic hydrolysis was investigated. Finely ground fish backbones were hydrolyzed with two proteolytic enzymes (pepsin and protease) to obtain soluble calcium from the by-products. The pepsin digest had a higher degradation efficiency (88%) than protease. Four different concentrations of the fish backbone calcium (100, 250, 500 and 1000 mg/L) prepared by the pepsin digest were treated with $Na_2HPO_4$ at a concentration gradient (0, 1, 2, 4, 8, 10, 15 and 20 mM) to evaluate their solubility, revealing that solubilities of the fish backbone calcium were superior to those of $CaCl_2$ at all the calcium and $Na_2HPO_4$ concentrations. Among the tested concentrations the highest solubility was found in the pepsin digest containing a calcium concentration of 1000 mg/L. Thus, hydrolyzing with pepsin is an effective mode of recovering bioavailable calcium from Alaska pollack fish backbones.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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