• 대한미생물학회지
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• 제22권2호
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• pp.147-153
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• 1987

Colonization factor antigen I(CFA I) has been shown to be one of several virulence factors that promote attachment of enterotoxigenic E. coli(ETEC) to small intestinal epithelial cells of humans. The ability of ETEC to produce mannose-resistant hemagglutination(MRHA) of human blood group A has been used to detect CFA I. To determine gastrointestinal carriage in Korean children of E. coli with MRHA and CFA I, 116 strains of E. coli from diarrheal children admitted to Hanyang University Hospital were examined for MRHA of human erythrocytes and the presence of CFA I. Of 45 ETEC strains, 18(40%) gave a positive MRHA($MRHA^+$) and eight(18%) were positive for CFA I(CFA $I^+$). ETEC with CFA I were all heat-stable enterotoxin(ST) producers and two of these strains were of serogroups $O_{25}$. Of 17 classic enteropathogenic E. coli(EPEC), 7(41%) were $MRHA^+$ but all were negative for CFA I(CFA $I^-$). Of 30 enteroadherent E. coli(EAEC) strains, 11(37%) were $MRHA^+$ and one was CFA $I^+$. Of 24 nonpathogenic E. coli, 4(17%) were $MRHA^+$ but all were CFA $I^-$. It was shown that MRHA was common in all strains of E. coli, CFA I was limited only to ST producing ETEC and EAEC; although MRHA is a useful screening procedure, serologic tests seem to be necessary to comfirm CFA I production. CFA I was associated with a lower proportion of ETEC isolates in Korea than has been reported for other locations.

• 한국식품위생안전성학회지
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• 제28권2호
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• pp.138-145
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• 2013

어린이집 유아들이 공용으로 사용하는 수건의 미생물 오염도와 분리된 식중독 미생물의 장독소 유전자 및 장독소 생산 특성을 분석하여 어린이집 유아 사용 수건의 위생안전성을 확보하고자 어린이가 손 씻은 후 공용으로 사용하는 수건 22개 (사용 전 7개, 사용 중 15개)를 연구대상으로 하였다. 일반세균수는 평균 6.2 log CFU/100 $cm^2$로 검출되었고 진균수는 평균 4.1 log CFU/100 $cm^2$로 검출되었으며 대장균군은 사용 전 수건의 경우 7건 중 4건 (57.1%), 사용 중인 수건의 경우 15건 모두에서 (100%) 검출되었다. 어린이 사용 수건의 미생물 오염도가 높게 나타나 수건의 위생적인 살균 세탁 및 상대습도가 낮은 곳에 보관하는 등의 보관 방법 개선이 필요한 것으로 판단되었다. Salmonella spp.의 경우 실험에 사용된 모든 수건에서 검출되지 않았으나, Staph. aureus는 22건 중 5건 (22.7%), B. cereus는 11건 (50.0%)에서 검출되어 B. cereus 오염이 가장 심각한 것으로 나타났다. Staph. aureus 장독소 유전자와 독소 단백질은 모두 불검출 되었으나 분리 동정된 11균주의 B. cereus 장독소 유전자 실험 결과 hblC, hblD, hblA 유전자가 각각 72.7, 72.7, 54.5% 검출되고 nheA, nheB, nheC 유전자가 각각 81.8, 72.7, 54.5% 검출되었으며 cytK, entFM 장독소 유전자는 각각 45.5, 90.0% 검출되었다. B. cereus 장독소 실험결과 HBL 장독소는 11균주 중 8균주 (72.7%), NHE 장독소는 5균주 (45.5%) 검출되었고 HBL과 NHE 장독소 중 하나 이상을 생산하는 B. cereus 균주는 10균주 (90.9%)로 나타났다. 수건에 오염된 B. cereus 균주의 교차오염에 따른 식중독 위험성이 상존하는 것으로 나타나 개인별 수건 또는 종이 타올 사용을 고려하여야 할 것으로 판단되었다.

• 한국어병학회지
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• 제36권2호
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• pp.263-275
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• 2023

첨연어(Oncorhynchus keta)는 한국에서 회귀하는 연어로 종 보존을 위해 경상북도 울진군에 위치한 수산자원공단에서 해수 순치하며 종묘 생산하였다. 그러나, 사육 중이던 첨연어 치어에서 세균성 질병에 감염된 증상을 보이며 폐사하였다. 따라서, 본 연구에서는 2021년 10월경에 사육환경에 따라 구분된 첨연어로부터 원인체를 규명하고자 세균을 분리하였다. 분리된 세균은 16S rDNA, rpoD (RNA polymerase sigma factor σ⁷⁰) 및 vapA (A-layer)의 염기서열을 기반으로 유전학적으로 동정하고, 추가로 염분에 따른 성장, 생화학적 특성 분석, 항생제 감수성 및 병원성 인자를 분석하여 균주를 특성화하였다. 그 결과, 분리된 4개의 균주는 모두 Aeromonas salmonicida subsp. salmonicida 아종으로 동정하였다. 또한, 분리된 균주는 염분의 농도가 증가할수록 배지에서 성장이 감소하였다. 생화학적 특성 분석에서 분리된 4개 균주는 용혈성이 확인되지 않았고, 모두 같은 생화학적인 성상을 나타냈다. 항생제 감수성 분석에서는 oxolinic acid, flumequine 그리고 florfenicol에 대한 항생제에서 40~44 mm 억제대를 형성하였다. 병원성 인자의 발현 분석은 mRNA 수준에서 RT-PCR로 확인되었으며, 4개 균주는 모두 A. salmonicida의 병원성에 크게 기여한다고 잘 알려진 outer membrane ring of T3SS (ascV), inner membrane ring of T3SS (ascC), vapA, enterotoxin (act) 및 lipase (lip) 유전자가 발현되었다. 이 연구에서 분리된 A. salmonicida subsp. salmonicida의 특성 분석은 해수에 순치된 첨연어에서 발병하는 절창병을 예방하기 위한 기초자료로 활용될 수 있을 것이다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제27권8호
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• pp.1461-1471
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• 2017

Escherichia coli heat-labile enterotoxin (LT) and its non-toxic mutant (LTm) are well-known powerful mucosal adjuvants and immunogens. However, the yields of these adjuvants from genetically engineered strains remain at extremely low levels, thereby hindering their extensive application in fundamental and clinical research. Therefore, efficient production of these adjuvant proteins from genetically engineered microbes is a huge challenge in the field of molecular biology. In order to explore the expression bottlenecks of LTm in E. coli, we constructed a series of recombinant plasmids based on various considerations and gene expression strategies. After comparing the protein expression among strains containing different recombinant plasmids, the signal sequence was found to be critical for the expression of LTm and its subunits. When the signal sequence was present, the strong hydrophobicity and instability of this amino acid sequence greatly restricted the generation of subunits. However, when the signal sequence was removed, abundantly expressed subunits formed inactive inclusion bodies that could not be assembled into the hexameric native form, although the inclusion body subunits could be refolded and the biological activity recovered in vitro. Therefore, the dilemma choice of signal sequence formed bottlenecks in the expression of LTm. These results reveal the expression bottlenecks of LTm, provide guidance for the preparation of LTm and its subunits, and certainly help to promote efficient preparation of this mucosal adjuvant protein.

• 한국식품조리과학회지
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• 제19권4호
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• pp.454-462
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• 2003

본 연구는 서울시에 위치한 소규모 베이커리 2곳을 대상으로 제빵류(단팥빵, 크림빵, 케익류)의 원료 및 공정별, 제빵기구$.$용기, 제빵종사자와 작업장환경에 대한 일반세균, 대장균군 및 급식소에서 위해세균으로 정의되어 있는 E. coli, Salmonella, Yersinia, Staphylococcus와 같은 식중독균에 대한 미생물 검색을 실시함으로써 소규모 베이커리에서의 HACCP적용을 위한 기초자료를 제공하고자 하였으며, 그 결과는 다음과 같았다. 1. 채취한 시료의 일반세균수 및 대장균군수는 대부분의 시료에서 안전성 수준을 초과하였다. 2. 대장균은 A점포의 혼합기, 수도꼭지, 쓰레기통, 작업장 바닥과 손잡이, 단팥빵 및 크림 빵 성형단계의 시료에서 균이 분리되었다. 3. 살모넬라균은 A점포의 원재료인 마가린과 단팥빵 성형단계의 시료에서 검출되었다. 4. 황색포도상구균은 A점포의 계란과 빵자르는 기계 및 B점포의 크림빵 성형단계의 시료에서 검출되었고, 독소형은 enterotoxin A인 것으로 확인되었다. 5. PCR분석 결과 E. coli O157은 음성인 반면, Salmonella균은 양성임이 판명되었다. 이상의 결과가 소규모 베이커리에서의 HACCP적용을 위한 미생물학적 위해도 평가의 전반적인 면을 대표할 수 없는 연구의 제한성을 가지고는 있으나 이연구를 기초로 더욱더 체계적인 연구들이 실시되리라 기대한다.