Kim, Woo-Kap;Park, Hong-Duok;Kim, Eun-Soo;Han, Sung-Sik
Applied Microscopy
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v.9
no.1
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pp.57-69
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1979
The ultrastructural changes of embryo and endosperm cells were observed during the green fruit with embryo about $250{\mu}$ long to germination. 1. In the embryo cells of green fruit with embryo about $250{\mu}$ long, mitochondrial cristae and plastid are undifferentiated and dictyosome are occasionally observed. There are electron-opaque globoids in the vacuole and a lot of spherosomes in the outer layer of smooth endoplasmic reticulum. Endosperm is filled with spherosomes and electron-opaque protein bodies surrounded by spherosomes, and due to these, other organelle are not observed. 2. In the embryo cells of seeds with red seed coat, mitochondrial cristae are well developed, electron-opaque globoids increased, and vacuoles are enlarged. In the endosperm, however, spherosomes increased, protein bodies are enlarged, and electron-opaque globoidal crystals are dispersed within them. 3. In the procambium and epicotyl cells of dehiscent seed, Golgi vacuoles and vesicles are well developed, and mitochondrial cristae are also well differentiated. Spherosomes are numerously present and radicle cells, peripheral cells of hypocotyl, and vacuoles of cotyledon are well differentiated. Endosperm is filled with spherosomes containing electron-opaque granules and protein bodies are surrounded by a single membrane. There are acid phosphatase around globoids and spherosomes. 4. At the time of seeding, spherosomes markedly increased in the outer layer of cotyledon and protein bodies are also observed. Cell organelles are differentiated and plastids containing starch are also present. 5. In the outer $2{\sim}3$ layers of cotyledons, radicle cells, and peripheral cells of hypocotyl during post-seeding to germination, spherosomes and plastids with starch increased, and mitochondria and microbodies are also found around the nucleus of embryo cells. With approaching, the germination stage, in the endosperm contacting with embryo, vacuoles are well differentiated but spherosomes decreased. There increased electron-opaque materials within vacuoles. In other endosperm, with the decrease of spherosome, mitochondria increased and electro n-opaque globular bodies are formed and gradually increased. The outer layer of protein bodies are reduced while electron-transparent portions are enlarged and fused together to occupy the outer layer where small particles are formed. 6. In the endosperm of germination stage, spherosomes decreased while protein bodies, are fused together to form 2 or 3 within a cell.
The effect of germination on hydration and germination properties, and on the changes of fatty acids and amino acids profiles of a brown rice 'Keunnun' (KN) with a large embryo was compared to 'Ilpumbyeo' (IP) with a normal embryo. A rapid germination up to 24 hr was observed in both brown rice cultivars, afterward decreased with germination time. At 60 hr, the KN ($86.0{\pm}4.24%$) showed slightly lower germination capability than the IP ($97.0{\pm}1.41%$). Lower water uptake during germination was also found in the KN ($1.22{\pm}0.02\;g$) compared to the IP ($1.59{\pm}0.05\;g$). Major fatty acids were palmitic acid, oleic acid, and linoleic acid accounting for more than 95% of total fatty acids. The most abundant amino acid in both types was oleic acid, which was decreased during germination, whereas palmitic and linoleic acids were increased. Eight amino acids were detected, and a remarkable increase in ${\gamma}-amino$ butyric acid (GABA) during germination was observed. The KN was characterized with higher tasty amino acids of aspartic acid, glutamic acid, glycine, and alanine.
The experiment was conducted to study on the physiology of developing embryo and endosperm degradation during germination of Zea mays seeds treated with GA 20 and B-Nine 5000 ppm. Data obtained can be summerized as follows : 1. Swelling of seminal root increased the section of GA treatment more or less, on the other hand, the section of B-9 treatment inhibited slightly. 2. According to elapsing of seeding date, epithelial cell of Scutellum expansed in size, and the space of cell increased, that degree was enlarged as follows ; the section of GA, the section of Control, and the section of B-9. 3. According to the elapsing of seeding date, the formation of vascular organization embryo became clearer little by little, the lignification of vascular B-9 treatment section rather higher than the other section. 4. The degradation of Starch Grain is composed of near part of epithelial cell of Scutellum, the shape of degradation radiate from element of a disk shape, and the speed of degradation is the section of GA, the section of Control, the section of B-9 in turn.
For the germination and differentiation of immature embryos obtained by artificial crossing between tetraploid grape 'Fujiminori' (Vitis vinifera ${\times}$ V. labruscana) and triploid 'Summer Black' (V. labruscana ${\times}$ V. vinifera), were incubated in vitro using MS medium supplemented with $GA_3$ or coconut water (CW) at various concentrations. The percentage of embryo formation of 'Fujiminori' ${\times}$ 'Summer Black' was 64.3%. Embryo germination percentage was higher than 95% in all the $GA_3$ treatments at the concentrations of 0.01, 0.05, 0.25, and $1.25mg{\cdot}L^{-1}$. However, only 15.8-31.6% of the germinated embryos successfully developed into normal plantlets. At higher concentration of $GA_3$, the plantlets developed infirm hypocotyls with over elongated and less enlarged structure. Among the treatments of CW at the concentrations of 5, 10, 15, and 20% (v/v), 10% and 15% were more effective and plantlet achievement percentage were 68.4 and 66.7%, respectively. The addition of 10% CW was most effective to obtain plantlets with optimal shoot length, node and root numbers. 15% CW was suitable to obtain plantlets with longer roots. Accordingly, the embryo culture using the MS medium supplemented with 10-15% CW was observed to be more efficient for germinating and growing the immature embryos produced from artificial crossing between tetraploid grape 'Fujiminori' and triploid 'Summer Black'.
This study was conducted to optimize the efficiency of cloning and to produce cloned mice. The majority of cloned mammals derived by nuclear transfer (NT) die during gestation and have enlarged and dysfunctional placentas. In this study, the optimized conditions were established to produce clone mice. The parthenogenetic oocytes were activated after 6 h regardless of cytochalasin B (CB) concentration. CB treatment ($2{\mu}g/ml$) was found second polar body. Lower concentration of CB was decreased the activation rate, but the second polar body was the best highly increased during 6 h incubation. The small fragments were exhibited in the $5{\mu}g/ml$ treatment of CB, but it was not found in lower concentration groups (> $2.5{\mu}g/ml$). To examine effects of $SrCl_2$ on the adult cumulus cells, somatic cell NT oocytes were exposed during 0.5, 1 and 6 hrs. The second polar body was significantly greater in 0.5 h exposure group (6.6%) than 1, 6 hrs. Developmental rate from 2-cell to 4-cell was the lowest in 7.5 mM Strontium chloride ($SrCl_2$) groups (84.1% and 64.3%) than 5, 10 m $MSrCl_2$. The implantation rate was not significantly difference among 5, 7.5 and 10 m $MSrCl_2$ group. Three live fetuses were produced by SCNT. SCNT placentas were remarkably heavier than IVF group (8 fetuses) (0.34, 0.34, 0.33 vs 0.14 g) compared with the placenta weight of IVF and SCNT clones.
A 3-month-old American Cocker spaniel was presented at the Veterinary Teaching Hospital, Chungbuk National University, for examination of urinary tract after dissection of vaginal mass at local clinic before 10 days. Clinical examination of the affected bitch revealed a normal sized vulva in a normal anatomical position with a grossly enlarged clitoris, which contained an os clitoris. On examinations of the genital gland, there were testis, epididymis, ductus deferens and uterus. The histology of both gonads was primarily testis. Seminiferous tubules were divided into many parts by fibrous connective tissue. A small number of spermatogonia was present, but large numbers of Leydig's cells were existed. A normal female karyotype (78, XX) was detected in metaphase spreads obtained from cultured peripheral lymphocytes. Y chromosome specific sequences were not detected in genomic DNA by PCR. After 27 months, the os clitoris was larger than 3-month-old dog and os bone was more calcified than young age. Combining the results of cytogenetic, molecular genetic and histological examinations, the dog was diagnosed as a female hermaphrodite with Sry-negative XX sex reversal.
Solomon's seal (Polygonatum odoratum) seedlings raised through its seeds can replace the rhizomes impelling higher cost for transplanting, This experiment was done to determine the seed characteristics and the germinating processes to give some information on bulk production of seedlings using the seeds. The external or internal morphology of seeds or seedlings grown in lab. or greenhouse was examined mainly with stereomicroscope. The external shape of Solomon's seal seed was hard seed-coat and orthotropous ovule with linear type embryo stretching to the center of seed. Germination proceeded through the several steps. The lower part of seed embryo having the primordia of bulbil and roots first grew before the bulbil and roots was developed from the primordia. The lower part of embryo was enlarged toward the endosperm of seed as soon as seed germinated. Then epicotyl was formed on the apex of bulbil. The epicotyl was elongated after at least 6-week chilling treatment for breaking its dormancy and the first leaf shape was affected by light intensity given during seedling emergence. The bulbil was the first organ of the rhizome used as tea or herb medicine.
This study was performed to determine the estrous cycles by macroscopic observation of the ovarian changes using the laparoscopy and to make use of these results for embryo transfer in Korean black goat (Copra hircus aegagrus). Laparoscopic examinations of the ovaries were performed from 2 days after $CIDR^(R)$ removal to 22 days after ovulation. The serial morphological changes of follicles and corpus luteum (CL) were observed. CL was classified corpus hemorrhagicum(CH), corpus luteum (CL) and corpus albicans (CA) by its maturation and regression. On the day before ovulation (Day 0), Graafian follicles (GF) were found on one or both ovaries. On the day (Day 1) and $2^{nd}$day (Day 2) of ovulation, and ovulation depression (OD) and an early stage corpus hemorrhagicum $(CH_1)$ were observed at the site of GF, respectively. On Days 3 to 4, more developed and enlarged corpus hemorrhagicum $(CH_2\;and\;CH_3)$ arised from the ovulation of the GF with well vascularization. On Days 5 to 6, it was identified that mature corpus luteum $(CL_3)$ was grown on the ovary, and fully developed CL with adjacent follicles were occupied most part of the ovary on Days 17 and 18. Then the size of CL was diminished, and completely luteal regression $(CL_1\;or\;CA)$ with new large follicle was identified on Days 20 and 22. From these results, the 4 stages of the estrous cycle in Korean black goats were 1) estrus (Day 0) for 1 day, 2) metestrus $(Day\;1{\sim}4)$ for 4 days (stage of CH development), 3) diestrus $(Day\;5{\sim}16/17)$ for 12 or 13 days (luteal stage), and 4) proestrus $(Day\;17/18{\sim}20/22)$ for 4 or 5 days (stage of luteal regression and follicular growing). Laparoscopy for observation of ovarian changes was invasive than laparotomy. Additionally, it had advantages of reduced adhesion and quick operation time. It was considered that laparoscopic examination of ovarian changes will be useful for embryo transfer in the Korean black goats.
In this study we investigated the embryo toxicity of three kinds of plant extracts during early development of African clawed frog, Xenopus laevis through FETAX assay (Frog Embryo Teratogenesis Aassay with Xenopus). The plants used in this study were the materials of the Korean herbal medicines, Polygala tenuifolia, Lycium chinensis and Comus officinalis. The test embryos exposed to 1, 10 and $100{\mu}g/ml$ of each plant extract and control embryos were incubated for 96h at $24{\pm}0.5^{\circ}C$. The focus of this study is to elucidate the malformation due to toxicity of plant extracts, especially, to elucidate plant inducing optic malformation. As a result, the growth inhibition of embryos, optic malformation, axial distortion, cephalic and abdominal edema, dysplasia of digestive track and hyper-pigmentation were occurred in all of extracts, and these malformations were increased to the increase of extract concentration. The rate of optic malformation was highest in $100{\mu}g/ml$ of Lycium chinensistreated group and 27% of tested 150 individuals showed optic hernia. The histological results showed enlarged ventriculum in brain, dysplasia of vitreous chamber in eye and unclear retinal layers.
Duck viral hepatitis is an acute, highly infectious viral disease of young dacklings aged from two days to three weeks. The significant lesion associated with the disease was enlarged liver including necrotic foci and numerous hemorrhagic spots. We have isolated five strains of duck hepatitis virus (DHV) from field cases showing about 20% mortality with a sign of opisthotonos. When a-day-old ducklings were intramuscularly inoculated with one of the isolates, 92% of the birds were died within 5 days. We attempted to develop an attenuated strain of duck hepatitis virus (DHV) using one of the isolates by serial chicken embryo passages. The propagation of DHV in chicken embryos was carried 140 passages. The virus titer increased gradually from the $21^{st}$ through the $50^{th}$ passage, but there was no significant increase of virus titer in subsequent passages after then. Through the serial passages, the virulence of the virus for chicken embryos was gradually increased but decreased for ducklings. The pathogenicity of the virus for ducklings was preserved up to the $21^{st}$ passage but disappeared at the $50^{th}$passage. An attenuated Korean isolate which was passaged 140 times in chicken embryos gave good protection in ducklings against both challenge infection to a Korean virulent strain and to a DHV-DRL strain, a type 1 reference strain of DHV, which indicated that the Korean isolates could be classified as DHV type 1. And the above results suggest that an attenuated Korean isolate can be used for developing a live DHV vaccine.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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