For the activity-guided separation on anti-asthmatic action from 4 fractions as n-hexane (yield. 0.09%), EtOAc (0.48%), BuOH (3.0%) and H2O (5.17%) fractions from MeOH extract (11.64%) of powdered Gastrodia elata Rhizoma (GER), some biological active agents were isolated by column chromatography (column, silica gel: elution solvent. CHCl3 : MeOH) according to the method of Junko Hayashi et. al. and Heihachiro Taguchi et. al. (omitted)
From 4 fractions as n-hexane (yield. 0.09%), EtOAc (0.48%). BuOH (3, 0%) and H2O (5.17%) fraction from MeOH extract (11, 64%) of powdered Gastrodia elata Rhizoma (GER) for the activity-guided separation on anti-inflammatory action. some biological active agents were isolated by column chromatography (column. silica gel: elution solvent. CHCl3 : MeOH) according to the method of Junko Hayashi et. al. and Heihachiro Taguchi et. al. Compound I, II, III, IV, V as phenolic derivatives were isolated in the EtOAc and BuOH fractions. (omitted)
$\beta$-glucosidase derived from Aspergillus niger was immobilized by (1) covalent linkage on chitin and chitosan with glutaraldehyde, (2) adsorption on DEAE-cellulose and Amberite IRA93 after succinylation, and (3) entrapment on alginate and polyacrylamide gels with various cross linking agents. The retention yield of $\beta$-glucosidase immobilized on chitosan was 31.5% and operational stability was 69% after continuous operation at column reactor(5$0^{\circ}C$ at pH 4.8) for 15 days. The retention yield and operational stability were 24.7% and 60% respectively, in adsorption on Amberite IRA 93. On the other hand, the entrapment method by alginate and polyacrylamide gel was identified to be not appropriate due to the continuous elution of inlmobilized $\beta$-glucosidase. Optimum conditions for the immobilization on chitosan were also studied with optimum pH of 4.8 and glutaraldehyde concentration of 0.4%(w/v). The properties and stability of immobilized $\beta$-glucosidase are also investigted. The conversion yield of cellobiose to glucose was also analyzed using the column type enzyme reactor to evaluate the effectiveness of immobilized enzyme.
A marine alga, Spirulina maxima, was extracted under high pressure and low temperature conditions at 500 MPa and $60^{\circ}C$ for 5 and 10 min. A high pressure of 500 MPa was applied to improve process yields because of low temperature extraction. This method resulted in highest higher extraction yield of 26.1% (w/w) in comparison to those results obtained from conventional extraction methods which produced a yield of 17.6% (w/w) from water. The extracts from this process also showed 19% of low cytotoxicity against human normal fibroblast cells in adding 1.0 mg/ml of the highest concentration. The crude extract significantly reduced the production of Prostaglandin $E_2$ ($PGE_2$) from CCD-986sk cells and increased nitric oxide production by macrophages. These higher activities of enhancing skin immune functions were found to have high antioxidant extract properties, like a 98% increase in DPPH radical scavenging activity. The extracts from the high pressure process showed a higher elution of active components than other processes and generated new compounds based on HPLC analysis. This clearly indicates that the extracts from high pressure and low temperature conditions have higher skin immune activation properties that have not been previously reported.
Enzymatic synthesis of glucosyl-sugar alcohols using various transglycosylating enzymes, such as cyclodextrin glucanotransferase (CGTase), ${\alpha}$-amylase, ${\alpha}$-glucosidase, and pullulanase was investigated using various sugar alcohols, such as sorbitol, xylitol, inositol, maltitol, and lactitol as glucosyl acceptors. CGTase showed the highest transglycosylating activity to sugar alcohols compared to other transglycosylating enzymes, and inositol and maltitol were the most suitable glucosyl acceptors. Soluble starch, extruded starch, cyclodextrins, and maltooligosaccharides were also identified to be adequate glucosyl donors for transglycosylation reaction of CGTase to sugar alcohols. The synthesis of glucosyl-maltitol in the reaction system using extruded starch as the glucosyl donor and maltitol as the glucosyl acceptor showed the best results showing the highest transglycosylation yield. The transglycosylation products were purified by activated carbon column chromatography with ethanol gradient elution. Chemical structures of above transglucosylated products were analyzed by nuclear magnetic resonance spectroscopy, and two products were identified to be maltotritol and maltotetraitol, in which one or two glucose molecules attached to the parent maltitol molecule by a ${\alpha}$-l,4-glucosidic bond, respectively.
Cholesterol and cholesterol oxidation products (COPs) may accumulate in foods of animal origin during processing or storage. An effective and sensitive analytical method was developed by increasing the UV absorption of compounds through derivatization by attaching a chromophore to the functional groups of cholesterols (cholesterol, 20-hydroxycholesterol, 7-ketocholesterol, cholestane-$3{\beta}$-$5{\alpha}$-$6{\beta}$-triol, 25-hydroxycholesterol, and $5,6{\alpha}$-epoxycholesterol). The influences of the reaction time, volume of reaction solvent, amounts of derivatizing reagent, and extraction solvents were investigated, as they may influence the reaction and extraction yield. The derivatized COPs were analyzed simultaneously on a C18 column (2.1 mm i.d. ${\times}$ 100 mm length, $3.5{\mu}m$ particle size) using a gradient elution with water and acetonitrile. The derivatized COPs showed increased sensitivity and selectivity in HPLC/UV-Vis. The LOD and LOQ were in the concentration ranges of 0.018-0.55 mg/kg and 0.059-1.84 mg/kg from the powdered milk. And the accuracy and precision were 78.1-116.7% and 1.1-9.9%, respectively.
Cho, Sunghun;Quilantang, Norman G.;Lee, Ju Sung;Kim, Young-Mi;Kim, Ho Bang;Cho, Eun Ju;Jung, Yong-Su;Lee, Sanghyun
Natural Product Sciences
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v.24
no.1
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pp.36-39
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2018
Phytochemical analysis of Boehmeria nivea (Bn) leaves by medium pressure liquid chromatography led to the isolation of a flavonoid glycoside identified by spectroscopic analysis as rutin. The amount of rutin in the leaves of Bn harvested from nine regions in South Korea (Bn 1-9) which were collected on the months of June, July, August, and September was determined by HPLC-UV analysis. A gradient elution program that utilizes a $Discovery^{(R)}$ C18 ($4.6{\times}250mm$, $5{\mu}m$) column and mobile phase composed of 1% acetic acid-water: acetonitrile (90:10 to 60:40 for min) was followed. The injection volume and flow rate were $10{\mu}l$ and 1 mL/ min, respectively. UV detection was set at 350 nm. Results show that Bn-8 harvested in September reported the highest content of rutin among the samples analyzed. This study provides a basis for the optimal harvest time of Bn which maximizes the yield of rutin.
Curcuma longa L. leaf was extracted by water at $60^{\circ}C$ for 12 hours after being treatment of Ultra High Pressure under 500 MPa for 5-15 minute. The high pressure extraction for 15 minute (HPE15) was measured the highest extraction yield of 25.48% (w/w), compared to those from conventional extraction methods. The HPE15 showed the lowest cytotoxicity as 11.97% in adding $1.0mg/m{\ell}$ of concentration. Also, HPE15 was measured the highest inhibition of hyaluronidase as 44.48% in adding $1.0mg/m{\ell}$. In addition, The production of NO from macrophages was measured as $7.06{\mu}M$ in adding $1.0mg/m{\ell}$ of HPE15, which was lower than the those from others processes. Finally, HPE15 significantly reduced up to $649.44pg/m{\ell}$ of $ProstaglandinE_2$ production from UV-irradiation. These results suggest that the Curcuma longa Linne leaf extract from high pressure process might enhance the skin immune activities possibly by high elution of active components than other processes.
Two protease inhibitors of 67 and 18 kDa, respectively, were purified from the eggs of glass fish, Liparis tanakai, by affinity chromatography and electro-elution method. The high molecular weight (HMW) protein was purified with a specific inhibitory activity, yield, and purity of 18.46 U/mg, 0.07%, and 131.86 fold, respectively, and was further characterized: Optimal temperature and pH for inhibitory activity of the HMW glassfish egg protease inhibitor were $40^{\circ}C$ and pH 6, respectively, and it was stable between $5^{\circ}C\;and\;50^{\circ}C$ in the pH range of 5-6 with maximal stability at pH 6. It was shown to be a competitive inhibitor against papain with an inhibition constant $(K_i)$ of 97.02 nM. Moreover, the 67 kDa protein inhibited cathepsin, a cysteine protease, more effectively than did an egg-white protease inhibitor. The HMW glassfish egg protease inhibitor was classified as a member of the family III (kininogen).
The structral properties of rice starch and its components were investigated. The intrinsic viscosities of rice starch, amylose and amylopectin solutions were 1.053, 1.772 and 1.596 ml/g, respectively. ${\beta}-amlolysis$ limits of rice starch was 73% and those of amylose and amylopectin were 106 and 56%, respectively. The outer chain length $({\overline{OCL}})$ and inner chain length $({\overline{ICL}})$ of amylopectin were 1.56 and 7.7, respectivety. Debranching of rice starch with pullulanase yield two peaks on Sephadex G-75. The peak I at void volume was principally amylose components and peak II at ${\overline{dp}}$ 25-10, constituted of branched amylopectin. However, the elution profile of debranched amylopectin by pullulanase revealed a bimodal peak distribution at ${\overline{dp}}$ 35-25 hydrolyers and ${\overline{dp}}$ 25-10, and no distinct peak at void volume. The elution profile of the debranched, ${\beta}-amylase$ hydrolyrates of starch and amylopectin yielded major peak at ${\overline{dp}}$ 2-10.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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