Fecal examinations using the Kato Katz technique were performed on a total of 1,287 villagers (945 students and 342 general inhabitants) of Oddar Meanchey Province, Cambodia in May 2007 and November 2009. The overall intestinal helminth egg positive rate was 23.9%, and the most prevalent helminth species was hookworms (21.6%). Other helminth eggs detected included echinostomes (1.0%), Enterobius vermicularis (0.8%), small trematode eggs (0.7%), which may include Opisthorchis viverrini and Haplorchis spp., and Hymenolepis nana (0.4%). In order to recover adult echinostomes, we treated 2 patients with 10-15 mg/kg praziquantel and purged. Total 14 adult echinostomes, 1 and 13 worms from each patient, were collected. The echinostomes characteristically had 49-51 collar spines and 2 round or slightly lobated testes. They were identified as Echinostoma ilocanum (Garrison, 1908) Odhner, 1911. So far as literature are concerned, this is the first record on the discovery of human E. ilocanum infection in Cambodia.
Diseased tiger puffer (Takijugu rubripes) showed anorexia and severe anemia in the gills. In wet mount preparations Heterobothrium sp. with 4 sets of clamps on the opisthohaptor attached to the gill filaments of the diseased fish. From the drum-shaped filter for filtration of the culturing water and the sediment of aquarium held the diseased fish in the laboratory, their eggs forming long strings through connection of the bipolar filaments could be easily collected. The parasites with 4 pairs of clamps on the opisthohaptor were 2.38mm in length and 0.71 mm in width, but had no isthmus which was separated the opisthohapor from the body proper. The parasites could be easily distinguished from Heterobothrium tetrodonis and H. okamotoi in the absence of distinct isthmus, and resembled H. yamagutii described from the gills of Takifugu xanthopterus in Japan. Their eggs were yellowish spindle in shape and 180-200 x 5-6 Iffil in size, which were pointed at both ends. The eggs were linked to adjacent egg shells like a string of beads by the filaments. Onchomiracidia, ciliated larvae spawned from the eggs were 133 Iffil (120-146 Iffil) x 751ffil (68-80 Iffil) in size. The length of the ciliates was 12 Iffil in the anterior part of the larvae and 14 Iffil in the posterior part. Round or leaf-shaped young parasites attached on the secondary gill lamellae. There was a tendency that most of round smaller parasites without an opisthohaptor were found in the middle part of the gill lamellae while leaf-shaped larger ones with a opisthohaptor attached on the distal part of the gill filaments. Each clamp of mature parasites grasped one secondary gill filament which resulted in bending of the filaments and hyperplasia of the epithelium and mucous cells. In the branchial cavity around the pseudobranch, mature parasites grasped the adjacent ones by means of the clamps, and the epithelia of the branchial cavity around the parasites showed severe irregular hyperplasia and erosion with strongly PAS-positive mucous cells.
In order to investigate the epidemiological situation of intestinal parasite infections in Lao PDR, parasitological surveys were carried out on a national scale including 17 Provinces and the Vientiane Municipality. A total of 29,846 stool specimens were collected from primary schoolchildren in May 2000 June 2002 and examined once with the cellophane thick smear technique. The cumulative egg Positive rate For intestinal helminthes was 61.9%, BV species, the rate for As caris lumbricoides was 34.9%, hookworm 19.1%, Trichuris trichiura 25.8%,Opisthorchis viverrini 10.9%, Taenia spp. 0.6% and Hymenolepis spp. 0.2%. The northern mountainous regions suck as Phongsaly, Huaphan or Saysomboune Province showed higher prevalence(over 70%) of soil- transmitted helminthes. The regions along the Mekong River such as Khammuane, Saravaue or Savannakhet Province showed higher prevalence(over 20%)of fish-borne parasites. On the other hand, Schistosoma mekongi eggs were detected from1.7% of schoolchildren only in Champassak Province, a previously known endemic area. The highest prevalence was noted in Phongsaly Province(96.0%) and the lowest in Bolikhamxay Province(27.5%). An additional smal1-scale survey by cellophane anal swab detected Enterobius vermicularis eggs in 35.7% of 451 schoolchildren aged 6-8 in Khammuane, Vientiane, Champassak Province and the Vientiane Municipality. Meanwhile, the mean blood hemoglobin level of hootrworm-infected children was not lower than that of hookworm-uninfected children, suggesting that nutritional factors are more important than parasite infection per se. Nevertheless, the above results indicate that a nationwide parasite control project is necessary to reduce possible morbidity of parasitic diseases in the country.
In order to investigate the ramyeon intake patterns, food value recognition, and their effects on blood pressure and blood lipid levels, a total of 385 male students aged 13- 15 years living in rural area were sampled randomly, and they were surveyed using questionnaire. Blood pressure and fasting serum lipids levels of 123 subjects selected among the total were determined. Of the total subjects 80.3% either liked or liked very much ramyeon and 42.2% of them were eating ramyeon from 1 to 2 times a week,21.1% 5-6 times a week, while 11.7% more than once a day, and 13.1% less than once a month. They took ramyeon from one (56.8%) to two (25.4%) packs each time. Two-third of subjects consumed entire ramyeon soup or more than half of it. Mostly they added egg or onion to ramyeon and took along with kimchi, cooked rice, danmuji, or dried laver. The food value recognition score about ramyeon was 41.33 out of 100 full grade. Comparing to underweight or normal weight subjects, overweight students tended to take ramyeon more frequently when playing with friends and tended to consume less soup of ramyeon. There was a significant negative correlation between ramyeon intake frequencies and HDL-cholesterol levels (r = -.223 p < .05). Moreover, among the normal body weight students (n = 72) adjusted with relative weight, ramyeon intake frequencies showed not only a significant negative correlation with HDL-cholesterol level (r = -.244 p < .05), but also significant positive correlations with atherogenic index (r : .249 p < .05) and systolic blood pressure (r : .259 p < .05) . These results suggested that frequent intake of ramyeon with limited sidedishes as a whole meal might have negative influences on blood pressure and serum lipid levels. Nutrition education is needed to have correct food value recognition and proper consumption of ramyeon along with the balanced diet. (Korean J Community Nutrition 8(4) : 485-494, 2003)
The genetic diversity of Schistosoma haematobium remains largely unstudied in comparison to that of Schistosoma mansoni. To characterize the extent of genetic diversity in S. haematobium among its definitive host (humans), we collected S. haematobium eggs from the urine of 73 infected schoolchildren at 5 primary schools in White Nile State, Sudan, and then performed a randomly amplified polymorphic DNA marker ITS2 by PCR-RFLP analysis. Among 73 S. haematobium egg-positive cases, 13 were selected based on the presence of the S. haematobium satellite markers A4 and B2 in their genomic DNA, and used for RFLP analysis. The 13 samples were subjected to an RFLP analysis of the S. haematobium ITS2 region; however, there was no variation in size among the fragments. Compared to the ITS2 sequences obtained for S. haematobium from Kenya, the nucleotide sequences of the ITS2 regions of S. haematobium from 4 areas in Sudan were consistent with those from Kenya (> 99%). In this study, we demonstrate for the first time that most of the S. haematobium population in Sudan consists of a pan-African S. haematobium genotype; however, we also report the discovery of Kenyan strain inflow into White Nile, Sudan.
Human taeniases had been not uncommon in the Republic of Korea (=Korea) until the 1980s. The prevalence decreased and a national survey in 2004 revealed no Taenia egg positive cases. However, a subsequent national survey in 2012 showed 0.04% (10 cases) prevalence of Taenia spp. eggs suggesting its resurgence in Korea. We recently encountered 4 cases of Taenia saginata infection who had symptoms of taeniasis that included discharge of proglottids. We obtained several proglottids from each case. Because the morphological features of T. saginata are almost indistinguishable from those of Taenia asiatica, molecular analyses using the PCR-RFLP and DNA sequencing of the cytochrome c oxidase subunit 1 (cox1) were performed to identify the species. The PCR-RFLP patterns of all of the 4 specimens were consistent with T. saginata, and the cox1 gene sequence showed 99.8-100% identity with that of T. saginata reported previously from Korea, Japan, China, and Cambodia. All of the 4 patients had the history of travel abroad but its relation with contracting taeniasis was unclear. Our findings may suggest resurgence of T. saginata infection among people in Korea.
Presence of marine birnavirus (MABV) was examined against egg and ovarian fluid, and seminal fluid from the brood stocks of flounder, Paralichthys olivaceus collected from 9 different stations around Korean peninsula. The detection rate of MABV in brood stocks flounder was observed to 34% by PCR. The mean virus titer of the PCR positive fish was $10^{2.30}$ to $10^{4.30}$$TCID_{50}$/g(ml). By a neutralization test, all of the isolated virus were ascertained to be closely related to marine birnavirus (MABV).
Vitellogenin (Vtg), a phospholipoglycoprotein precursor of egg yolk is synthesized and secreted from the liver in response to estrogens in female fish. Vtg is normally undetectable in the blood of male fish, but can be induced by exposure to chemicals possessing estrogenic activity. Thus, the presence of Vtg in blood of male fish can serve as a useful biomarker for assessing previous exposure to estrogenic compounds. In the present study, Vtg was abnormally expressed in Rhynchocypris oxycephalus using estradiol benzoate ($E_2$). As the result, it was found that the level of Vtg in blood from R. oxycephalus was increased by treated quantity of $E_2$ with dose-effect manner. Monoclonal antibodies were generated against Vtg of R. oxycephalus. The hybridoma were screened with an enzyme immunoassay for the production of specific anti-Vtg antibodies. Five positive cell lines with a high specificity were selected. Monoclonal antibodies against vtg of R. oxycephalus that was developed in this study, may be a useful bio-indicator for the detection of estrogenic contamination in the aquatic ecosystem.
The beneficial effect of glycerol as a cryoprotectant, especially for sperm cryopreservation, has been shown in many studies. However, glycerol is toxic to living cells, and boar sperm in particular show greater sensitivity to glycerol than sperm from other domestic animals. Amides have been studied as alternative cryoprotectants for freezing stallion sperm. Sperm frozen in methylformamide or dimethylformamide as cryoprotectants show similar motility when thawed compared with sperm frozen in glycerol. We evaluated the cryoprotective effects of dimethylformamide on boar sperm freezing. To test the effect of amides, the concentration of boar semen was adjusted to $10^9sperm/mL$, and seminal plasma was removed using Hulsen solution. After centrifugation, the pellet was diluted in modified-Modena B extender. Lactose-egg yolk (LEY) extender was used as the cooling extender. The freezing extender was madeed aaddition of the optimal amount of glycerol and amides to LEY-Glycerol-Orvus ES Paste extender, and this extender was used for the second dilution. Diluted sperm were frozen in liquid nitrogen using the 0.5 mL straw method. Sperm frozen in extender with glycerol as a cderol were compared with those frozen in extender including the different amides. Sperm were tested for motility, viability, the sperm chromatin structure assay, and normal apical ridge after thawing. The percent of motile sperm diluted in glycerol was as high as that in the stallion study (61%). Dimethylformamide showed positive effects on sperm quality and was better than glycerol. Methylformamide provided similar sperm quality as glycerol. Therefore, dimethylformamide is useful for reducing cryoinjury in boar sperm and is expected to be useful as an alternative cryoprotectant.
Transgenic animals have been widely used for developmental biology studies, as disease models, and even in industry such as transgenic bioreactor animals. For transgenic birds, quail has the great advantages of small body size, short generation time, and frequent egg production. To date, retroviral or lentiviral transduction has been used to generate transgenic quail for various purposes. However, the efficiency of transgenic offspring production with these methods is relatively low and viral vector usage has safety issues. Unfortunately, non-viral transgenesis has not been established in quail due to a deficiency of stem cell and germ cell culture systems. In this study, we established a direct in ovo lipofection method that could be used to create transgenic quail without germline-competent cells or viruses. To optimize the injection stage during embryo development, the liposome complex (containing piggyBacCMV-GFP and transposase plasmids) was introduced into an embryonic blood vessel at 50 hr, 55 hr or 60 hr. GFP expression was detected in various tissues (heart, kidney, liver and stomach) on day 12 of incubation under a fluorescence microscope. Additionally, GFP-positive cells were detected in the recipient embryonic gonads. In conclusion, the direct in ovo lipofection method with the piggyBac transposon could be an efficient and useful tool for generating transgenic quail.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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