미역고사리(Polypodium vutgare L.)와 쇠무릎(Achyranthes japonica Nakai)에 있어서 광과 methyl jasmonate(MJ), 6-benzylaminopurine(BA), thidiazuron(TDZ), 2,4-dichlorophenoxyacetic acid(2,4-D)가 식물체 중의 ecdysteroids (${\beta}$-ecdysone+polypodine B) 함량에 미치는 영향을 조사하였다. 수광량을 조절하여 재배한 미역고사리의 잎과 근경 모두 상대광도가 높을수록 ecdysteroids 함량이 감소하였고 쇠무릎 유묘의 배양시 광 조건일 때가 암 조건일 때 보다 ecdysteroids함량이 낮아 식물의 ecdysteroids 함량은 광에 의해 저하되는 것으로 나타났다. 미역고사리 전엽체와 쇠무릎 유묘의 배양계에서 식물체 중의 ecdysteroids 함량은 배지 중의 MJ와 BA 그리고 TDZ의 농도가 높아짐에 따라 증가된 반면 2,4-D의 농도와는 무관하게 일정한 수준으로 유지되어,식물의 ecdysteroids 함량은 MJ와 cytokinin처리에 의해 증가되지만 auxin처리에 의해서는 영향을 받지 않는 것으로 나타났다.
Melandrii Herba has been used for tympanitis, sore throat, dysentery and dehumidifying diuretic. From the BuOH fraction of methanol extracts, three ecdysteroids (ecdysterone, ecdysterone 22-acetate and inokosterone) were isolated by column chromatography using Amberlite XAD-4, ODS and Sephadex LH-20 gel and by HPLC method. The structures of these compounds were identified on the basis of spectroscopic methods.
Objectives: This study was conducted in order to investigate the specific correlation between physicochemical properties and bioactivity in ecdysteroids found in living organisms. Methods: The examined steroidal compounds were classified into three groups according to their relevance to ecdysone activity. Each compound molecule was completely drawn to automatically calculate its physicochemical parameters and docked against 20-hydroxyecdysone to calculate the total distance. Electronic charge distribution was also observed for each molecule. All procedures were conducted using a computational chemistry program. Results: Ecdysone agonists showed different ranges of parameter values, such as log P, hydrophilic-lipophilic balance (HLB), solubility parameter (SP), hydrophilic surface (HPS), hydrogen bond (HB) and Kappa 2, when compared with antagonists and steroids without ecdysone activity. They also showed a similar electronic charge distribution that is significantly different from the electron charge distribution of antagonists and steroids without ecdysone activity. The total distance values of agonists, estimated by docking them with 20-hydroxyecdysone, were relatively small but showed no correlation with binding affinity with receptor ligand. Conclusions: These results suggest that physicochemical properties such as steric and electronic effects, hydrophobicity and hydrogen bonding may operate in combination to determine the binding activity of ecdysteroids to the receptor protein.
In crustaceans, as in other arthropods, the molt cycle and the physiological process of growth are controlled by molting hormones (MH) which are steroid hormones, the ecdysteroids. Ecdysteroids are major arthropod hormones which control both development (embryonic and larval molts, metamorphosis) and reproduction. The purpose of the present study was to evaluate both fenarimol and methoprene for embryotoxicity to daphnids. The embryotoxicity associated with each compound was assessed to discern whether the embryotoxicity of methoprene might be due to ecdysone agonist and the ecdysone antagonistic effects of fenarimol on Daphnia embryo. Exposure of daphnids for three weeks to 50 M methoprene resulted in a significantly high incidence of offspring that exhibited general toxicity. This exposure concentration had significant effects on the overall number of embryo death. However, exposure to 3 or 1 $\mu$M fenarimol were no significant effects on the embryo toxicity. The incidence of both of these toxicity increased with methoprene exposure. This observation suggest that methoprene showed embryonic general toxicity during embryo development, while, only fenarimol showed weak general toxicity with early stages of embryonic development.
Ecdysteroid는 곤충의 탈피호르몬으로 알려져 있으며, phytoecdysteroid는 식물의 ecdysteroid로 포유동물에 여러 유용한 효과를 가진다고 알려져 있다. 본 연구는 식물의 phytoecdysteroids가 골대사에서 미치는 영향을 알아보기 위하여 세포수준에서 관찰하였다. 즉 조골세포에 미치는 영향을 알아보기 위하여 세포증식율, 염기성인산분해효소 활성, gelatinase 활성의 변화를 관찰하였고, 파골세포에 미치는 영향을 알아보기 위하여 tartrate-저항성 인산분해효소 양성인 다핵세포의 형성을 측정함으로써 관찰하였다. Phytoecdysteroid 처리에 의해 조골세포의 ALP 활성과, gelatinase의 활성이 증가되었다. 또한 phytoecdysteroid는 macrophage-colony stimulating factor (M-CSF)와 receptor activator of NF-kB ligand (RANKL)에 의해 유도된 파골세포의 생성을 감소시켰다. 이상의 결과 phytoecdysteroid는 조골세포와 파골세포의 활성 및 생성을 변화 시킴으로써 골수의 미세환경에서 세포내 조절작용에 관여하리라 여겨진다.
Basically insect hormones include ecdysteroids (molting hormone), juvenile hormones, and neurohormones comprising neuropeptides and biogenic amines. This article reviewed their chemical structures and biological functions. The active molting hormone is 20-hydroxyecdysone in most insects but makisterone A in some other insects including the honey bee and several phytophagous hemipterans. Most insects use JH III, but lepidopterans JH I and II. Dipterans also use a different JH, so-called JH $B_3$(JH III bisepoxide) and we still do not know the exact chemical structure of JH utilized in hemipterans. Some other insects use methyl farnesoate or hydroxylated JH III analogues as their juvenile hormone. Most diverse pictures can be found in neurohormones (NH), especially in neuropeptides, in terms of their number and structure. There are more than 200 neuropeptides (NP), classified into more than 30 families, which structures have been identified, and more of them are expected to be reported in the near future, partly due to rapid development in molecular biological techniques and in analytical techniques. More than half of them are involved in controlling activity of visceral muscles. But function (s) of many NPs are not clarified yet, even though their amino acid sequences have been identified. It is partly due to the fact that a single NP may have multiple functions. Another interesting point is their gene structure, having many number of independent, active peptides in one gene, apparently working for similar or totally different functions. NH also includes amines, such as octopamine, dopamine, serotonin, etc. From now on, investigation will be concentrated on identifying their function (s) and receptors, and on possibilities of their utilization as control agents against pest insects.
Ecdysteroid 생합성에 관련된 식물 유전자를 분리할 목적으로 ecdysteroid 생성능이 확인된 쇠무릎(Achyranthes japonica Nakai)으로부터 RNA를 분리하고, ecdysteroid 생합성에 관여한다고 알려진 cytochrome P45O family 유전자 4개와 곤충의 ecdysone 20-hydroxylase 유전자의 다중정렬 분석결과를 토대로 상동성이 높은 부위의 염기서열에 상응하는 degenerate primer를 사용하여 RT-PCR을 행하고, 고유한 염기서열을 가진 partical cDNA clone 14개를 선발했다. 기존에 ecdysteroid 생합성에 관여한다고 알려진 cytochrome P450 family 유전자들과의 염기 및 아미노산 서열의 상동성을 분석한 결과, 선발된 cDNA 중 6개가 cytochrome P45O fumily 유전자들과 상동성이 있는 것으로 나타났다. 이 중에서 4개의 clone은 곤충의 ecdysone 20-hydroxylase 유전자와도 상동성이 높아 ecdysteroid 생합성에 관련된 유전자로 추정되었다.
The prothoracicotropic hormone (PTTH) produced by the neurosecretory cells in insects is involved in molting and metamorphosis by activating the prothoracic frins) glands to secrete ecdysone (or related ecdvsteroidsl. In the present study, the small PTTH-like gene was isolated by screening of CDNA library using the bombvxin (corresponding to small PTTH in Bombvx moril gene probe in Drosophilo melonogaster. It showed 50-6096 sequence homology to bombyxin gene. The expression patterns of this gene showed developmental stage- and tissue-dependent manners. The mRNA was detected only in the late third instar larval-prepupa which is stases showing the highest hormonal activity to secrete ecdysteroids, and detected in the brain pan of the Isle third instar lanrae.
연두·금파리에서 혈구 세포가 면역반응의 일환으로 일으키는 결절형성(nodule formation) 현상을 형태학적으로 관찰하고자 본 실험이 수행되었다. 연두금파리 종령 유충 체내에 정상 효모, 고정된 대모, 세포액이 제거된 원형질체의 효모를 각각 주입하여 면역반응 과정을 전자현미경으로 관찰하였다 먼저 정상 효모를 주입하였을 경우, 효모와 접촉한 헐구의 과립방출과 곧 이은 혈구의 파괴 그리고 효모 주위에 혈림프와 함께 점액성응혈(clot)의 형성을 관찰 할 수 있었다 점액성 응혈에는 여러 유형의 파괴된 혈구가 포함되어 있었다. 이같은 면역반응에는 체내 혈구 중 과립혈구(granulocyte)가 가장 활발히 반응였고 응혈의 대부분을 형성하였다. 결절의 중심부인 응혈은 대모와 파괴되지 않은 혈구 대 파괴된 혈구 그리고 방출된 과립들로 차 있었고, 효모 주입 3시간 까지는 이같은 응혈은 계속 확대되었다. 그러나 10시간 이후에는 응혈이 관찰되지 않았으며 이때 체강내에서 효모가 관찰되곤 하였다. 고정된 효모를 주입하였을 경우에는 혈구파괴나 과립방출 등이 관찰되지 않았으며, 고정된 효모에 대한 혈구의 식 세포작용만이 관찰되었다. 이 식세포작용은 주입후 10시간 까지 계속되었다. 원형질 체의 효모를 주입하였을 경우에는 혈구에의한 면역반응이 관찰되지 않았다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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