• Parasites, Hosts and Diseases
• /
• 제52권1호
• /
• pp.21-26
• /
• 2014

Dirofilaria immitis (heartworm) infections affect domestic dogs, cats, and various wild mammals with increasing incidence in temperate and tropical areas. More sensitive antibody detection methodologies are required to diagnose asymptomatic dirofilariasis with low worm burdens. Applying current transcriptomic technologies would be useful to discover potential diagnostic markers for D. immitis infection. A filarial homologue of the mammalian translationally controlled tumor protein (TCTP) was initially identified by screening the assembled transcriptome of D. immitis (DiTCTP). A BLAST analysis suggested that the DiTCTP gene shared the highest similarity with TCTP from Loa loa at protein level (97%). A histidine-tagged recombinant DiTCTP protein (rDiTCTP) of 40 kDa expressed in Escherichia coli BL21 (DE3) showed immunoreactivity with serum from a dog experimentally infected with heartworms. Localization studies illustrated the ubiquitous presence of rDiTCTP protein in the lateral hypodermal chords, dorsal hypodermal chord, muscle, intestine, and uterus in female adult worms. Further studies on D. immitis-derived TCTP are warranted to assess whether this filarial protein could be used for a diagnostic purpose.

• 미생물학회지
• /
• 제41권1호
• /
• pp.60-66
• /
• 2005

국내산 한우, 흑염소, 돼지, 개, 닭 및 마우스 둥을 포함한 각종 동물과 사람환자에서 분리된 MRSA 균주를 포함하여 총 116주의 S. aureus 균주를 확보하여 이들 균주들의 유전학적 다양성을 분석하고자 시도하였다. 이를 위하여 쉽고, 편리하며 많이 활용되고 있는 PCR을 이용하여, 개별 분석기법에 따른 유전학적 특성을 파악하는 것은 물론 활용한 기법들 중에서 유전자수준에서 가장 효율적이며 뛰어난 감별능력을 지닌 기법을 선발하고자 하는데 궁극적인 목적을 두었다. 이를 위해서 통계학적 인 수치에 따라 객관적인 분석방법으로서 Simpson's index of diversity (SID)를 산출하여 성적상호간을 비교 및 평가하였다. 공시한 총 99 주에 대한 4M primer를 이용한 RAPD 성적에 근거하여 산출한 SID 값은 0.915의 양호한 간이 산출되었다. 같은 방법으로 충 98 주에 대한 RA primer를 이용한 RAPD성적을 토대로 산출한 SID 값은 0.874로 확인되었다. 한편 총 107주에 대한 ERIC-PCR을 수행한 종합분석 성적에서 공시균주들은 모두 10종의 유전형(genotype)으로 구분되었고, EM-type 는 14주가 포함되어 가장 대표적 인 유전형으로 분류되었으며, 이 그룹에는 사람유래의 6주가 포함되어 가장 지배적인 유전형으로 확인되었다. 또한 DNA profile에 근거한 덴드로그람을 작성하고 SID간을 산출하였던 바, SDI 0.929의 신뢰도 높은 성적을 산출하였다. 반면에 공시한 총 108주의 S. aureus균주에 대한 종합적인 REP-PCR 성적에서 모두20종의 유전형으로 세분되었고 RB-type은 17주로 가장 많은 균주가 포함되었다. 작성된 덴드로그람 성적에서 산출한 SID 값은 우리의 연구에서 수행한 PCR에 기초한 유전자 분석기법들 중에서는 가장 높은 0.930으로 확인되었다. 결론적으로 RAPD 기법 중에서는 4M primer를 활용한RAPD가 보다 효율적임을 확인할 수 있었고, REP-PCR과 ERIC-PCR의 양자의 성적은 거의 비슷하여 적용했던 PCR분석기법 중에서는 이들 분석기법이 가장 우수한 감별능력을 확보한 분석법으로 최종 선발할 수 있었다.

• Journal of Veterinary Science
• /
• 제23권2호
• /
• pp.20.1-20.8
• /
• 2022

Background: Emergent and re-emergent canine tick-borne infections are attracting increasing attention worldwide. The rise in pet ownership and the close relationship between dogs and their owners are the most concerning factors because dogs may act as competent reservoirs for human tick-transmitted infectious agents. Objectives: This study contributes to the epidemiological surveillance of canine tick-transmitted infections with zoonotic risk in the Republic of Korea (ROK) by investigating the seroprevalence of the pathogens, Anaplasma spp., Borrelia burgdorferi, and Ehrlichia canis. Methods: Four hundred and thirty whole blood samples from domestic dogs were collected in seven metropolitan cities and nine provinces in the ROK and tested using SensPERT Ab test kits (VetAll Laboratories^®) to detect seroreactive animals. Results: The seroprevalence rates identified were 9.8% (42/430) for Anaplasma spp., 2.8% (12/430) for B. burgdorferi, and 1.4% (6/430) for E. canis. The risk factors evaluated in this study that could be associated with the development of a humoral immune response, such as sex, age, and history of tick exposure, were similar. There was only one exception for dogs seroreactive to Anaplasma spp., where the risk factor "tick exposure" was statistically significant (p = 0.047). Conclusions: This serological survey exhibited the widespread presence of Anaplasma spp., B. burgdorferi, and E. canis throughout the ROK. Hence, dogs may play a key role as the sentinel animals of multiple zoonotic infectious agents in the country.

• 미생물학회지
• /
• 제41권1호
• /
• pp.24-37
• /
• 2005

국내 사육 하우 염소, 돼지, 개, 닭 및 마우스 등을 포함한 각종 동물과 사람환자에서 분리한 총 116주의 S. aureus 분리주에 대해서 5종의 PCR 기법을 적용하여 분자역학적 특성을 분석하였다. 먼저 종특이 유전자(SSG: aroA, coa, nuc 및 spa-gene)의 다양성을 PCR 기법으로 조사하였고, 또한 약제내성의 MRSA 균주의 분포양상과 내독소(Enterotoxin)산생유전자(SE)의 분포양상에 대해서도 조사하였다. 그리고 이 연궁선 수행한 5종의 PCR 기법 들이 생산한 개별성적을 객관적으로 비교하여, 가장 신뢰도 높고 효율적 PCR기법을 선발하였다. 먼저 PCR기법을 적용한 SSG의 분포양상 조사에서는 $nuc-gene\;(100\%)$, $spa-gene\;(91.4\%)$, $coa-gene\;(87.9\%)$, 및 $aroA-gene\;(26.7\%)$의 빈도로 조사되었다. 그리고 aroA와 coa-gene PCR 증폭산물에 대한 RsaI과 AluI 효소로 소화시킨 RELP 성적에서 coa-Bene PCR-RFLP에서는 모두 10 type의 con-type이 동정되었고, 그중 coa-3 type (809 bp)이 닭, 마우스, MRSA 및 사람유래 균주를 포함한 총 36주 $(33.0\%)$로서 가장 대표적인 genotype으로 결정되었다. 반면에 aroA-gene PCR-RELP에서는 단지 7 type의 genotype만이 산생되어 대조를 보였고, 17주 $(73.9\%)$가 대표적인 그룹으로 분류되었다. 한편 spa-gene PCR에서는 총 11 type의 spa-type이 확인되었고, 그중 spa-7 type (9 repeats; 263 bp)이 한우, 닭, 개, 염소, 마우스 및 MRSA 균주 등을 포함한 총 39주 $(34.8\%)$로서 가장 대표적인 genotype으로 결정되었다. 또한 총 116주에 대해 MRSA 균주의신속한 검출을 위해서 mecA-gene PCR을 적용하였던 바, 단지 사람유래의 14주 $(12.1\%)$에서만 양성의 증폭산물 (533 bp)이 검출되었고, 이들 증폭된 PCR산물의 유전학적 검증을 위해 HhaI으로 소화시켰던바 14주 모두 $(100\%)$가 알려진 2개의 DNA band (332 & 201 bp)로 양분되어 유전자수준에서 MRSA 양성균주로 검증되었다. 한편 내독소 산생유전자 (SE-gene)는 multiplex-PCR기법으로 조사하였으며 sea-gene $(63.7\%)$이 가장 지배적이었고, 이어서 seb-gene $(10.0\%)$ 및 sec-gene $(7.2\%)$의 순서였다. 특히 sea+sec의 2종의 SE genes를 보유한 균주도 11주로서 가장 많았으며 그 외에도 sea+seb (2주)및 seb+see (1주) genes를 보유한 균주도 함께 검출되었다. 최종적으로 5종의 PCR기법들이 생산한 성적들을 수치 (SID)로 변환하여 객관적으로 감별능력 (DA)을 비교하였던바, aroA-gene PCR-RFLP는 가장 저조한 DA [SID=0.462]을 나타내었고, 반면에 coa-gene PCR-RELP는 5종의 분석기법 중에서 가장 신뢰도 높은 DA [SID=0.894]을 발현하였다. 따라서 현재의 연구결과con-gene PCR-RELP기법이 사람을 포함한 다양한 동물종유래 S. aureus 균주들의 유전학적 분석목적에 가장 신뢰도 높고 감별능력이 뛰어난 분석기법으로 선발되었다.