The aminomethylation of phenols with para-substituents by the Mannich reaction has successfully been accomplished to produce the Mannich bases 2-6. The compounds 7-8 have also been synthesized in order to identify the effect of the side arms and t he macrocycle in the complex formation. Protonation constants and stability constants of the double armed diaza-18-crown-6 ethers 2-7 with metal ions have been determined by potentiometric method at 25 $^{\circ}C$ in 95 % methanol solution. Under a basic condition (pH > 8.0), the double-armed crown ethers 2-6 revealed stronger interaction with divalent metal ions than the simple diazacrown ether 1. The stability constants with these metal ions were Co 2+ < Ni2+ < Cu2+ > Zn 2+ in increasing order, which are in accordance with the order of the Williams-Irving series. The stability constants with alkali earth metal ions were Ca 2+ < Sr 2+ < Ba 2+ in increasing order, which may be explained by the concept of size effect. It is noteworthy that the hosts 2-6, which have phenolic side arms and a macrocycle, bind stronger with metal ions than the hosts 1 and 7. On the other hand, the host 8, which has phenolic side arms with a pyperazine ring,provided comparable stability constants to those with the host 3. These facts demonstrate that phenolic side arms play a more important role than the azacrown ether ring in the process of making a complex with metal ions especially in a basic condition. In particular, the log KML values for complexation of divalent metal ions with the hosts 2-6 had the sequence, i.e., 2 (R=OCH3) < 3 (R=CH3) < 4 (R=H) < 5 (R=Cl) < 6 (R=CF3). The stability constants of the hosts 5 and 6 containing an electron-withdrawing group are larger than those of the hosts 2 and 3 containing an electron-donating group. This substituent effect is attributed to the solvent effect in which the aryl oxide with an electron-donating group has a tendency to be tied strongly with protic solvents.
This study was investigated to test whether the zygote recognized the topoisomerase II beta (TOP2B) mediated DNA fragmentation in epididymal spermatozoa or the nuclease degradation in vas deferens spermatozoa by testing for the presence of gammaH2AX (γH2AX). The γH2AX is phosphorylation of histone protein H2AX on serine 139 occurs at sites flanking DNA double-stranded breaks (DSBs). The presence of γH2AX in the pronuclei of mouse zygotes which were injected with DNA broke epididymal spermatozoa was tested by immunohistochemistry at 5 and 9 h post fertilization, respectively. Paternal pronuclei that arose from epididymal spermatozoa treated with divalent cations did not stain for γH2AX at 5 h. On the other hand, in embryos injected with vas deferences spermatozoa that had been treated with divalent cations, γH2AX was only present in paternal pronuclei, and not the maternal pronuclei at 5 h. Interestingly, both pronuclei stained positively for γH2AX for all treatments and controls at 9 h after sperm injection. In conclusion, the embryos recognize DNA that is damaged by nuclease, but not by TOP2B because H2AX in phosphorylated in paternal pronuclei resulting from spermatozoa treated with fragmented DNA from vas deferens spermatozoa treated with divalent cations, but not from epididymal spermatozoa treated the same way.
골판지 상자의 수분저항성을 증진시키기 위해 골판지 상자 제조에 사용되는 라이너지의 표면을 알긴산으로 표면코팅을 하기 위한 최적 조건을 결정하기 위하여 농도, 가소제의 종류와 사용량, 알긴산의 불용화를 위한 다가 금속이온의 종류와 최적농도 및 침지시간 등을 결정하였다. 라이너지의 표면코팅을 위한 알긴산의 농도는 2.5%(w/w)가 적합하였으며, 가소제인 글리세롤은 알긴산 대비 35%의 농도로 사용하는 것이 적합하였고, 알긴산 필름의 불용화를 위해서는 2% $CaCl_2$ 용약을 사용하여 3분간 처리하는 것이 라이너지의 수분에 대한 저항성 증진에 최적조건을 결정되었다. 다가 금속이온으로 $CA^{2+}$ 이외에 $Cu^{2+}$를 사용했을 때 낮은 투습계수와 수분용해도를 나타냈다. 가소재의 종류에 따라서는 수분 흡습에 대한 저항성이 큰 솔비톨을 첨가 했을 때 라이너지의 수분저항성이 유의적인 차이를 보이며 증가하였다.
The removal performances of divalent heavy metal ions ($Pb^{2+}$, $Cu^{2+}$, $Cd^{2+}$, $Sr^{2+}$ and $Mn^{2+}$) were studied using the Na-P1 zeolite synthesized from Jeju scoria in the batch and continuous fixed column reactor. The uptakes of heavy metal ions by synthetic Na-P1 zeolite decreased in the order of $Pb^{2+}$ > $Cu2^{2+}$ > $Cd^{2+}$ > $Sr^{2+}$ > $Mn^{2+}$ based on the selectivity of each ion to ionic exchange site of Na-P1 zeolite for single and mixed solutions in batch or continuous fixed column reactor. For mixed solution, each heavy metal ion uptake was lower than that in single solution, and especially the uptake for $Mn^{2+}$ decreased greatly. In batch reactor, the uptakes of heavy metal ions by synthetic Na-P1 zeolite were described by Freundlich or Langmuir equation, but they followed the former better than the latter. In continuous fixed column reactor, the maximum ion exchange capacity obtained for each of heavy metal ions, was about 90----- of that in batch reactor. The uptakes of heavy metal ions by synthetic Na-P1 zeolite increased with the increase of initial heavy metal concentration and solution pH, and the decrease of the amount and particle size of synthetic zeolite.
Song Jeong-Wha;Won Jae-Seon;Lee Yong-Chan;Choe Mu-Hyeon
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제16권7호
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pp.1104-1110
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2006
Recombinant antibody-toxin is a bifunctional protein that binds and kills a target cell expressing a specific antigen on the surface of the cell, and its structure is chimeric, in which a toxin is fused to an antigen-binding domain such as scFv or Fab. Divalent antibody-toxin molecules showed higher cytotoxicities against cancer cell lines than monovalent molecules. However, the yields of the divalent molecules were very low. In this study, we introduced the CH2, CH3, or CH2-CH3 (=Fc) domain of antibody in the middle of the Fab-toxin between the hinge region of human IgG1 and the toxin domain to increase the yield. The covalently bonded dimer could be formed by three disulfide bridges from cysteine residues in the hinge region. The molecule with the CH3 domain showed about 3-fold higher dimerization yield than previously constructed Fab-toxin molecules, while maintaining the cytotoxic activity comparable to that of scFv-toxin. However, the introduction of CH2 or Fc domain to the same position showed little effect on the dimerization yield. We also observed that the introduction of the CH3 region made it possible to form noncovalently associated dimer molecules.
B3 antibody specifically binds the $Lewis^Y$-related carbohydrate antigen of many carcinomas, and it is used as a model antibody in this study. In a previous study, the Fab fragment of the antibody was fused to a 38 kDa truncated form of Pseudomonas exotoxin A, PE38, to make Fab-PE38, where PE38 is fused to the Fd fragment of the Fab domain. This parent monomer molecule, Fab-PE38, had no cysteine in the hinge region, and it could not make a disulfide bond to form a disulfide bond bridged homodimer. In this study, we constructed three different kinds of divalent Fab-toxin fusion homodimers where the toxin is fused to the light chain of Fab, $(Fab-PE38fl)_2$. In addition to the PE38 toxin fused to the light chain, these three molecules have different hinge sequences hi, h2, and h3 making Fabh1-, Fabh2-, and Fabh3-PE38fl monomers, respectively. These hinges contain only one cysteine on different positions of the hinge sequence. The disulfide bond between the hinge region of two monomers forms homodimers $(Fabh1-PE38fl)_2$, $(Fabh2-PE38fl)_2$, and $(Fabh3-PE38fl)_2$. The refolding yields of these dimers were 5-16-fold higher than a previously constructed dimer where the PE38 was fused to the Fd fragment $(Fabh2-PE38)_2$ [8]. Our data suggest that the steric repulsion between the two PE38s in $(Fabh1-PE38)_2$ during disulfide bridge formation is relieved by fusing it at the end of the light chain. The best cytotoxicity value of these dimers showed about 2.5-fold higher on an MCF7 cell line than that of the monovalent reference molecule in ng/ml scale, which is 15-fold higher in pM scale.
Kim, Jin-Kyoung;Ko, Jae-Hong;Nam, Joo-Hyun;Woo, Ji-Eun;Min, Kyeong-Min;Earm, Yung-E;Kim, Sung-Joon
The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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제9권2호
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pp.69-75
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2005
TRPM7, a cation channel protein permeable to various metal ions such as $Mg^{2+}$, is ubiquitously expressed in variety of cells including lymphocytes. The activity of TRPM7 is tightly regulated by intracellular $Mg^{2+}$, thus named $Mg^{2+}$-inhibited cation (MIC) current, and its expression is known to be critical for the viability and proliferation of B lymphocytes. In this study, the level of MIC current was compared between immature (WEHI-231) and mature (Bal-17) B lymphocytes. In both cell types, an intracellular dialysis with $Mg^{2+}$-free solution (140 mM CsCl) induced an outwardly-rectifying MIC current. The peak amplitude of MIC current and the permeability to divalent cation ($Mn^{2+}$) were several fold higher in Bal-17 than WEHI-231. Also, the level of mRNAs for TRPM7, a molecular correspondence of the MIC channel, was significantly higher in Bal-17 cells. The amplitude of MIC was further increased, and the relation between current and voltage became linear under divalent cation-free conditions, demonstrating typical properties of the TRPM7. The stimulation of B cell receptors (BCR) by ligation with antibodies did not change the amplitude of MIC current. Also, increase of extracellular $[Mg^{2+}]_c$ to enhance the $Mg^{2+}$ influx did not affect the BCR ligation-induced death of WEHI-231 cells. Although the level of TRPM7 was not directly related with the cell death of immature B cells, the remarkable difference of TRPM7 might indicate a fundamental change in the permeability to divalent cations during the development of B cells.
In this study, zinc germanate ($Zn_2GeO_4$) thin films has been synthesized by using radio frequency magnetron sputtering and the divalent manganese-activated luminescence was characterized. X-ray diffraction patterns of the as-deposited $Zn_2GeO_4$:Mn films showed only a broad feature, indicative of an amorphous structure. Scanning electron microscopy images revealed that the as-deposited $Zn_2GeO_4$:Mn has a smooth surface morphology. The $Zn_2GeO_4$:Mn films were found to be crystallized by annealing in air ambient at temperatures as low as $700^{\circ}C$. The annealed $Zn_2GeO_4$:Mn possessed a rhombohedral polycrystalline structure. The broad-band photoluminescent emission spectrum from 470 to 650nm was obtained at room temperature from the $Zn_2GeO_4$:Mn films. The emission peak was centered at around 535nm in the green range, which originates from the intrashell transition of manganese $3d^5$ electrons from $^4T_1$ excited-state level to the $^6A_1$ ground state. The PL emission spectrum had an asymmetric line shape, which results from the $^3d_5$ electron transitions of divalent manganese ions located at different sites of the zinc germanate host crystal lattice. Electroluminescent devices were fabricated using $Zn_2GeO_4$:Mn as an emission layer. The fabricated devices showed a green EL emission similar to the PL emission. The CIE chromaticity color coordinates of the EL emission were determined to be x=0.308 and y=0.657.
In this study, we investigated the removal efficiencies of pollutants and permeate fluxes depending on chemistry of feed water, various molecular weight cut-offs (MWCOs) and materials of membrane, operating pressure. We used seven MWCO membranes of YC0.5, YM1, YM3, YM10, YM30, YM100 and PM30, humic acid solution and surface water as feed water, and examined variation in permeate flux. Results of TOC removal experiment demonstrate that MWCO lower 1,000daltons could remove humic acid effectively. As increasing solution pH and decreasing divalent cations ($Ca^{2+}$) concentration, TOC removal increased. But $UV_{254}$ removal efficiency increased with higher divalent cation concentration and solution pH. Membrane fouling increased with increasing electrolyte (NaCl), divalent cation concentration and decreasing solution pH. In spite of initial permeate flux of the hydrophobic membrane (PM30) was higher than that of the hydrophilic membrane (YM30), flux decline of PM30 was significant during operation. At higher operating pressure, compactness of the cake layer on the membrane surface increased, resulting in gradual increase in hydraulic resistance.
The inorganic components in tobacco sheet extract have significant influence on the sensory taste of the cigars and the harmful component delivery in cigarette smoke. To identify the contributions of the divalent inorganic components on harmful components delivery in cigarette smoke, a self-made selective electrodialysis was assembled with monovalent ion-selective ion exchange membranes. The influences of current density and extract content on the desalination performance were investigated. Result indicates that the majorities chloride, nitrate, and sulfate ions were removed, comparing with 50-60% of potassium and only less than 10% of magnesium and calcium ions removed in the investigated current density. The permselectivity of the tested cations across the Selemion CSO cation exchange membranes follows the order: $K^+>Ca^{2+}>Mg^{2+}$. A current density of $15mA/cm^2$ is an optional choice by considering both the energy consumption and separation efficiency. When the extract contents are in the range of 7%-20%, the removal ratios the potassium ions are kept around 60%, while the removal ratios of the calcium and magnesium ions fluctuate in the range of 16-27% and 8-14%, respectively. The tobacco smoke experiments indicated that the divalent metal ions have dual roles for the harmful component delivery in cigarette smoke. The divalent potassium and calcium ions were unfavorable for the total particulate matter emission but beneficial to decrease the HCN delivery in the mainstream cigarette smoke. The selective electrodialysis is a robust technology to decrease the harmful component delivery in cigarette smoke.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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